• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    清熱潤燥方對哮喘小鼠氣道反應(yīng)及炎性反應(yīng)影響的實驗研究*

    2020-12-16 07:55:56吳佳麗余文麗魏丹霞
    陜西中醫(yī) 2020年12期
    關(guān)鍵詞:潤燥黏液低劑量

    趙 茜,吳佳麗,余文麗,魏丹霞

    1.云南中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院(昆明 650011);2.昆明市中醫(yī)醫(yī)院(昆明 650011)

    支氣管哮喘在中醫(yī)屬“哮病”范疇[1],近年來哮喘患病率在全球范圍內(nèi)有逐年增長的趨勢,2019年一項調(diào)查顯示,目前我國成人哮喘患者總數(shù)已達到4570萬[2]。中醫(yī)認為哮病的發(fā)生是由于宿痰伏肺,若誘因或感邪引觸致痰阻氣道,肺失肅降、痰氣搏結(jié)便產(chǎn)生發(fā)作性痰鳴氣喘疾患。既然引起哮病的根本原因是宿痰,那么運用培土生金以“潤養(yǎng)”、通調(diào)津氣以“通利”[3]不失為治療哮病的方法,“清熱潤燥口服液”[4]是名中醫(yī)陸家龍老師的經(jīng)驗方,通過現(xiàn)代工藝制備而成,其作用機理是通過增加肺組織或者氣道的水液生成,以“潤”養(yǎng)氣道,通過減少氣道病理性黏液分泌,以“通利”氣道、促痰液排出來治療哮喘。本實驗基于以上理論,通過觀察該藥對哮喘模型小鼠的氣道炎癥以及慢性氣道炎癥中最主要的黏蛋白5AC(Mucin 5AC,MUC5AC),以及肺組織中影響氣道水液代謝的水通道蛋白5(Aquaporin 5,AQP5)的影響,并根據(jù)結(jié)果探討基于“潤養(yǎng)與通利”理論,治療哮喘的實驗基礎(chǔ)。

    材料與方法

    1 實驗材料

    1.1 實驗動物:72只6~8周齡BALB/c小鼠,平均體重(20±2)g,由昆明醫(yī)科大學(xué)實驗動物學(xué)部提供[許可證號:SCXK(滇)k2015-0002]。

    1.2 實驗藥物:清熱潤燥口服液由桑葉、浙貝母、麥冬、茯苓、半夏各200 g,苦杏仁120 g,炒谷芽、炒麥芽、蘆根、薏苡仁、冬瓜仁各300 g,陳皮60 g,南沙參240 g組成。委托云南中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院制劑室制備提供,4.1 g原生藥/ml。藥物保存于4~8 ℃冰箱中備用,使用前復(fù)溫至20~25 ℃使用。

    2 實驗方法

    2.1 動物模型建立:每組12只小鼠,除對照組外,各組小鼠于第1、8、15 天腹腔注射OVA致敏液0.2 ml(含0.2 mg OVA和1 mg氫氧化鋁)。于第21 天起,將小鼠置于透明容器內(nèi),給予2% OVA的生理鹽水霧化激發(fā),1次/d,30 min/次,連續(xù)7 d;正常組采用生理鹽水代替OVA進行處理。模型組造模后死亡2只,清熱潤燥低劑量組死亡1只。

    2.2 動物分組及給藥:72只6~8周齡BALB/c小鼠隨機分為正常組、模型組、陽性藥物對照組(地塞米松)及清熱潤燥高、中、低劑量組,每組12只小鼠雌、雄各半。每組給藥劑量的依據(jù):根據(jù)相關(guān)標準[5]并結(jié)合前期實驗結(jié)果,正常組與模型組于每日OVA霧化攻擊前1天,按照給藥劑量同體積的生理鹽水進行灌胃,清熱潤燥高劑量組在造模成功后以8.64 g/(kg·d)劑量進行灌胃,清熱潤燥中劑量組在造模成功后以4.32 g/(kg·d)劑量進行灌胃,清熱潤燥低劑量組在造模成功后以2.16 g/(kg·d)劑量進行灌胃,陽性藥物對照組在造模成功后以給藥劑量同體積的地塞米松進行灌胃。

    2.3 實驗檢測指標:氣道反應(yīng)性的測定:灌胃結(jié)束后第2天,小動物生理儀記錄小鼠的呼吸頻率和潮氣量。肺組織病理學(xué)檢測:HE染色,普通光學(xué)顯微鏡下觀察顯色結(jié)果并拍照。氣道杯狀細胞的檢測:PAS染色觀察各組間小鼠肺氣道杯狀細胞的分布及數(shù)量變化。小鼠肺泡灌洗液中MUC5AC、AQP5、IL-13的檢測:小鼠飼養(yǎng)第30 天,禁食12 h后予10 %水合氯醛(0.3 ml/100 g)腹腔內(nèi)注射麻醉,腹主動脈取血后放血處死小鼠,開胸,暴露氣管及肺。用套管針插入左主支氣管并結(jié)扎、固定,拔出針芯后用2 ml冰生理鹽水灌洗左肺,再緩慢回抽,每次回抽液體約1.5 ml,如此反復(fù)灌洗3次,回收率約75%。將回收的灌洗液混勻,先取0.5 ml用細胞計數(shù)板行BALF細胞計數(shù),余下的液體4 ℃,1000 r/min,離心10 min,取上清液-20 ℃保存。使用ELISA法檢測肺泡灌洗液中MUC5AC含量。

    結(jié) 果

    1 各組小鼠吸氣峰流速比較 灌胃結(jié)束后第2天,小動物生理儀記錄小鼠吸氣峰流速(Peak value inspiratory velocity of flow,PIF)值。與正常組比較,模型組、清熱潤燥各劑量組及陽性藥物組的吸氣峰流速比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。與模型組比較,清熱潤燥各劑量組及陽性藥物組的吸氣峰流速比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

    2 各組小鼠呼氣峰流速比較 灌胃結(jié)束后第2天,小動物生理儀記錄小鼠吸氣峰流速(Peak value expiration velocity of flow,PEF)值。與正常組比較,模型組呼氣峰流速明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。與正常組比較,清熱潤燥低劑量組呼氣峰流速減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。清熱潤燥中、高劑量組及陽性藥物組的呼氣峰流速相比正常組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。與模型組比較,清熱潤燥低劑量組呼氣峰流速升高,組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),清熱潤燥中、高劑量組及陽性藥物組的呼氣峰流速與模型組比較,均明顯增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

    3 各組小鼠呼吸頻率比較 與正常組比較,模型組及清熱潤燥低劑量組呼吸頻率(Respiratory rate,R)明顯增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。清熱潤燥中、高劑量組及陽性藥物組與正常組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。清熱潤燥低劑量組呼吸頻率與模型組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。清熱潤燥中劑量組的呼吸頻率低于模型組,清熱潤燥高劑量組及陽性藥物組的呼吸頻率與模型組比較,均減少,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

    1993年,美國國會通過的《政府績效與結(jié)果法案》,首次從立法上對美國聯(lián)邦機構(gòu)績效評價做出了制度性規(guī)定。該法案將資源和管理決策與績效掛鉤,建立以績效為目的的預(yù)算制度,將美國政府的績效管理重點由“過程問責(zé)”轉(zhuǎn)向“結(jié)果問責(zé)”,由“投入—產(chǎn)出”模式轉(zhuǎn)為“目標—結(jié)果”模式[3],促使聯(lián)邦部門和機構(gòu)在預(yù)算中加強“戰(zhàn)略—目標—預(yù)算—績效”的閉環(huán)管理,提高政府管理績效和服務(wù)效率。

    4 各組小鼠肺組織病理學(xué)比較 根據(jù)HE染色結(jié)果可知,正常組小鼠氣管內(nèi)可見少量黏液,氣管黏膜上皮完整、管腔內(nèi)無黏液滲出及炎癥細胞浸潤;模型組小鼠氣管內(nèi)有黏液,可見嗜酸性粒細胞,黏液細胞不規(guī)則增生,上皮細胞壞死脫落;血管和氣管周圍,肺泡間隔可見大量炎細胞浸潤;清熱潤燥低劑量組小鼠支氣管管腔可見黏液栓,管壁各層可見炎細胞浸潤,平滑肌增生,血管和氣管周圍,肺泡間隔可見大量炎性細胞浸潤;清熱潤燥中劑量組小鼠血管及氣管周圍可見炎性細胞浸潤,氣管壁增厚,細胞增生;清熱潤燥高劑量組小鼠氣管擴張,氣管和血管周圍可見少量炎性細胞浸潤,血管內(nèi)可見中性粒細胞;陽性藥物組小鼠血管及氣管周圍可見炎細胞浸潤,氣管壁增厚,細胞增生(圖1)。

    表1 各組小鼠吸氣峰流速、呼氣峰流速及呼吸頻率比較

    圖1 各組哮喘小鼠肺組織病理學(xué)表現(xiàn)(HE染色,×20)

    5 各組小鼠氣道杯狀細胞比較 根據(jù)PAS染色結(jié)果(圖2),正常組小鼠支氣管壁可見零星幾個杯狀細胞,呈紫紅色,管腔內(nèi)無黏液分泌;模型組小鼠氣管壁可見有大量的深染杯狀細胞增生,呈紫紅色,個別管腔內(nèi)黏液分泌明顯;清熱潤燥低劑量組小鼠與模型組比較,氣管壁中杯狀細胞減少,呈紫紅色,腔內(nèi)無黏液分泌;清熱潤燥中劑量組小鼠與模型組比較,管壁中的杯狀細胞較模型組明顯減少,呈紫紅色,個別支氣管未見杯狀細胞;清熱潤燥高劑量組小鼠與模型組比較,支氣管壁見少量杯狀細胞,呈紫紅色,腔內(nèi)無黏液分泌;陽性藥物組小鼠支氣管壁有零星幾個杯狀細胞,呈紫紅色,管腔內(nèi)無黏液分泌。

    6 各組小鼠BALF中MUC5AC蛋白表達比較 與正常組比較,模型組、清熱潤燥低劑量組BALF中MUC5AC蛋白表達明顯增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。清熱潤燥中、高劑量組和陽性藥物組MUC5AC表達與正常組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.01)。與模型組比較,清熱潤燥低劑量組MUC5AC表達有所下降,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);陽性藥物組及清熱潤燥中、高劑量組MUC5AC表達下降更多,組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。

    7 各組小鼠BALF中AQP5表達比較 與正常組比較,模型組BALF中AQP5表達明顯減少,清熱潤燥各劑量組和陽性藥物組AQP5表達明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。與模型組比較,清熱潤燥低劑量組AQP5增加無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);陽性藥物組及清熱潤燥中、高劑量組的AQP5,與模型組比較均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)。見表2。

    8 各組小鼠BALF中IL-13表達比較 與正常組比較,模型組BALF中IL-13含量明顯增加;清熱潤燥低劑量組、中劑量組中IL-13均高于正常組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。清熱潤燥高劑量組、陽性藥物組中IL-13與正常組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);與模型組比較,清熱潤燥低劑量組中的IL-13差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);陽性藥物組,清熱潤燥中、高劑量組中的IL-13含量與模型組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表2。

    表2 各組小鼠BALF中MUC5AC、AQP5、IL-13表達比較

    討 論

    哮喘是多種炎癥因子參與的氣道慢性炎癥性疾病[6],炎性因子IL-13是哮喘發(fā)作的重要原因,其在黏液分泌中作用較為明顯,MUC5AC作為氣道黏液中最為重要的黏蛋白,是呈IL-13誘導(dǎo)性表達,健康人氣道中MUC5AC含量很少[7],MUC5AC與哮喘慢性炎癥引起的氣道黏液高分泌有密切關(guān)系[8];水分是氣道黏液的重要組成部分,氣道黏液95%以上都是水分,而水通道蛋白通過調(diào)節(jié)生理和細胞對液體體積和滲透壓變化的反應(yīng),來進行整個生物體內(nèi)水分平衡的基本系統(tǒng)調(diào)節(jié)[9],在肺組織中,水通道蛋白5是主要的水轉(zhuǎn)運通道之一,其減少將導(dǎo)致氣道水分分泌的減少[10],進而引起氣道黏液的黏稠度增加,使其更加難以排出氣道。AQP5的異常表達與支氣管哮喘水液代謝失衡及氣道黏液高分泌有著密切聯(lián)系,是近年來研究支氣管哮喘發(fā)病機制的新方向[11-13]。

    在本次實驗中,哮喘模型小鼠氣道病理染色表現(xiàn)出炎細胞浸潤、MUC5AC明顯增多,提示構(gòu)建的模型符合氣道黏液高分泌模型。與模型組比較,地塞米松組及清熱潤燥中、高劑量組炎細胞浸潤較模型組好轉(zhuǎn),且能明顯減少IL-13、降低MUC5AC的表達同時增強了AQP5蛋白的表達。黏蛋白分子原本參與組成呼吸道黏液,有保護和潤滑上皮的作用,但在感染、過敏原等多種因素的影響下,氣道上皮分泌MUC5AC便顯著增加,引起了氣道黏液的高分泌[13];AQP5主要分布在哺乳動物的唾液腺、肺泡Ⅰ型細胞、上呼吸道分泌上皮細胞等[14-15],作為肺組織中主要水通道蛋白,可幫助水分子快速通過質(zhì)膜移動,幫助氣道及肺內(nèi)液體的吸收及轉(zhuǎn)運,并參與氣道黏液的分泌與調(diào)節(jié)[16]。哮喘患者,尤其是慢性哮喘或者咳嗽變異性哮喘的患者,常常感覺咽干、痰難以咯出,這是腺體結(jié)構(gòu)或功能受損、唾液分泌減少所致,而腺體,尤其是涎腺的分泌調(diào)控作用與AQP5的異常分布密切相關(guān)[17]。根據(jù)本次實驗結(jié)果,清熱潤燥口服液可增加BALF中AQP5的表達。本次實驗中與正常組比較,模型組BALF中IL-13含量明顯增加,證明氣道黏液高分泌的小鼠IL-13值是升高的,低劑量組小鼠BALF中的IL-13含量比模型組低,地塞米松藥物組及清熱潤燥中、高劑量組中的IL-13明顯降低,結(jié)合本次實驗MUC5AC及AQP5的結(jié)果,提出IL-13與MUC5AC值呈正相關(guān),與AQP5值呈負相關(guān)的設(shè)想,但其具體的作用機制及通路有待研究。

    哮喘屬于中醫(yī)“哮病”的范疇,《癥因脈治·喘促》:“哮病之因,痰飲留伏,結(jié)成窠臼,潛伏于內(nèi),偶有七情之犯,飲食之傷,或外有時令之風(fēng)寒束其肌表,則哮喘之癥作矣”?!疤怠背S煽韧隆⒖瓤┒?,中醫(yī)有“肺為嬌臟,喜潤惡燥”之說,或因環(huán)境等“外燥”原因、或因飲食、遺傳等“內(nèi)燥”原因或內(nèi)外原因共同致病導(dǎo)致“內(nèi)外合燥”傷及肺臟,灼傷肺津,肺失宣肅,上焦水津不能通降與布散,便停聚于肺化為痰飲,痰伏于肺,成為發(fā)病的潛在“夙根”,此類“伏痰”色黃或白而黏稠,堅而成塊[18],遇各類誘因即發(fā),但因其堅硬難排,故可見干咳、痰難咯等癥狀。所以從減少痰液生成、促進痰液排出,通過“潤養(yǎng)”與“通利”[3]治療本病。

    潤養(yǎng),一取其潤養(yǎng)脾胃之效,其中沙參、麥冬合用,益氣且養(yǎng)胃陰,脾胃為人體氣機升降的樞紐,脾胃功能正常則中氣盛,津液上可輸布于肺,配合白扁豆、山藥等補脾、實脾之品起“培土生金”之效,下能滋腎,以達“金水相生”之功[19]。肺腎互資,陰津充盛,達“潤養(yǎng)”以化燥。二取其潤養(yǎng)肺臟之效,肺為嬌臟,喜濕惡燥,方中桑葉為君藥,苦能潤燥、甘能生津,其性清輕上揚,其形同肺葉,故最能入肺經(jīng)潤肺燥,津液滋潤肺部,使伏痰、燥痰得以潤化,而得以排出。通利,其一通利氣道得伏痰能排出,其二通利水道,使津液能潤布各個臟腑。除了健脾胃、滋潤肺腎使津液得以布輸之外,甘寒之蘆根為佐藥,清熱生津,利濕通利,宣肺氣于上而通達水濕于下,蘆根及薏苡仁、冬瓜仁三藥合用通利三焦,浙貝母配以陳皮行氣利痰,使痰得以“通利”隨氣化外達,氣道通暢,肺之宣降功能正常,氣可載津,津液輸布有則;水道通暢,津液充足以助氣化,既可正常布散津液又可使邪外排,是以本方以辛涼甘潤之法潤養(yǎng)脾胃、資肺津腎陰,通利氣道水道使運化有則,氣道順暢,津液得以輸布、痰濁得以排出。

    本實驗發(fā)現(xiàn)本藥對于慢性哮喘或者哮喘合并慢性阻塞性肺疾病,尤其是以干咳、痰液難以咯出為主要癥狀的患者效果更佳,由此提出,清熱潤燥口服液潤養(yǎng)與通利的理論,是通過其激活上皮細胞中AQP5的表達,改善了氣道的水液代謝,提高了肺組織濕的比重,從而稀釋痰液使其稀薄而易于排出,是以顯示了“潤養(yǎng)”氣道,稀釋痰液的作用,同時本藥可以拮抗哮喘氣道炎癥反應(yīng)、減少MUC5AC的生成,通過減少氣道黏液的分泌起到“通利”氣道的作用,從而有效緩解哮喘發(fā)作時的咳嗽、喘息等癥。

    綜上,本次實驗初步探討“清熱潤燥口服液”對哮喘小鼠BALF中MUC5AC以及AQP5的影響,證明本方可以通過抑制MUC5AC表達以及增強AQP5的表達來抑制氣道黏液高分泌、改善氣道炎癥以及調(diào)節(jié)氣道的水液代謝失衡,本次實驗的結(jié)果也部分符合“潤養(yǎng)”與“通利”的治療理論,但本次測試的因子較少,故其具體作用機制及通路有待進一步研究。

    猜你喜歡
    潤燥黏液低劑量
    秋日滋陰潤燥佳品——百合
    白露秋分 潤燥養(yǎng)陰
    中老年保健(2021年9期)2021-08-24 03:51:46
    鞍區(qū)軟骨黏液纖維瘤1例
    會陰部侵襲性血管黏液瘤1例
    冬季如何補腎護陽、潤燥養(yǎng)陰
    16排螺旋CT低劑量掃描技術(shù)在腹部中的應(yīng)用
    黏液型與非黏液型銅綠假單胞菌Cif基因表達研究
    黏液水腫性苔蘚1例
    自適應(yīng)統(tǒng)計迭代重建算法在頭部低劑量CT掃描中的應(yīng)用
    低劑量輻射致癌LNT模型研究進展
    伦理电影免费视频| 午夜a级毛片| 欧美午夜高清在线| 91av网站免费观看| 久久久国产成人精品二区| 久久久久久久久免费视频了| 成人特级黄色片久久久久久久| 亚洲真实伦在线观看| 色综合亚洲欧美另类图片| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲欧美激情综合另类| 看免费av毛片| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产高清激情床上av| 九色成人免费人妻av| 色综合亚洲欧美另类图片| 级片在线观看| 久久热在线av| 免费无遮挡裸体视频| 在线国产一区二区在线| 婷婷精品国产亚洲av| 国产一级毛片七仙女欲春2| 国产三级中文精品| 色噜噜av男人的天堂激情| 欧美三级亚洲精品| 亚洲美女视频黄频| 美女黄网站色视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| 99久久国产精品久久久| 欧美3d第一页| 国产探花在线观看一区二区| 又黄又粗又硬又大视频| 亚洲中文字幕日韩| 午夜免费成人在线视频| 黄色女人牲交| 视频区欧美日本亚洲| 人成视频在线观看免费观看| 午夜精品在线福利| 狂野欧美激情性xxxx| 久久久久久久久免费视频了| 国产成+人综合+亚洲专区| 精品不卡国产一区二区三区| 97碰自拍视频| 黄色女人牲交| 成在线人永久免费视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 黄色片一级片一级黄色片| 亚洲男人的天堂狠狠| 日日爽夜夜爽网站| av免费在线观看网站| 成人三级黄色视频| 色综合站精品国产| 免费观看人在逋| 午夜精品在线福利| 91麻豆av在线| 成人一区二区视频在线观看| 成年版毛片免费区| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国产av不卡久久| 1024香蕉在线观看| 久久人妻福利社区极品人妻图片| av超薄肉色丝袜交足视频| 欧美成狂野欧美在线观看| 少妇的丰满在线观看| 一本综合久久免费| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 中亚洲国语对白在线视频| 黄色丝袜av网址大全| 在线观看免费视频日本深夜| 国产私拍福利视频在线观看| 国产精华一区二区三区| 天堂av国产一区二区熟女人妻 | www日本黄色视频网| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲国产中文字幕在线视频| 亚洲熟女毛片儿| 亚洲18禁久久av| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产欧美日韩精品亚洲av| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲avbb在线观看| 精品国产亚洲在线| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲人成电影免费在线| 黑人操中国人逼视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 啪啪无遮挡十八禁网站| 欧美久久黑人一区二区| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲av电影在线进入| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 免费在线观看影片大全网站| 黄色视频,在线免费观看| 热99re8久久精品国产| 欧美乱码精品一区二区三区| 人妻夜夜爽99麻豆av| 99久久精品热视频| 国产av不卡久久| 中国美女看黄片| 很黄的视频免费| 淫妇啪啪啪对白视频| 色老头精品视频在线观看| 波多野结衣高清无吗| 国产精品一区二区三区四区久久| www.www免费av| 国产亚洲欧美98| 看免费av毛片| 一本综合久久免费| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 男人的好看免费观看在线视频 | 国产精品av久久久久免费| 国产成人欧美在线观看| 在线a可以看的网站| 99久久精品热视频| 一进一出抽搐动态| 日本熟妇午夜| 岛国视频午夜一区免费看| av福利片在线| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 午夜福利18| 欧美成人性av电影在线观看| 国产av一区在线观看免费| 国产午夜福利久久久久久| 九色成人免费人妻av| 久久久久性生活片| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲精品美女久久av网站| 三级毛片av免费| 搞女人的毛片| 免费av毛片视频| 欧美成狂野欧美在线观看| 一区二区三区国产精品乱码| 婷婷六月久久综合丁香| 在线观看日韩欧美| 日韩欧美在线乱码| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产av又大| 久久久久久久久中文| 少妇人妻一区二区三区视频| 在线观看午夜福利视频| 99久久99久久久精品蜜桃| 成人三级黄色视频| 好男人在线观看高清免费视频| 在线国产一区二区在线| 色噜噜av男人的天堂激情| 桃红色精品国产亚洲av| 亚洲一区二区三区不卡视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美乱妇无乱码| 日韩欧美在线乱码| 国产精品,欧美在线| 国产真实乱freesex| 亚洲成av人片在线播放无| 午夜a级毛片| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 久久国产乱子伦精品免费另类| 亚洲五月天丁香| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 亚洲精品在线观看二区| 男插女下体视频免费在线播放| 黄色毛片三级朝国网站| 午夜a级毛片| 最近在线观看免费完整版| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产又色又爽无遮挡免费看| 欧美日韩福利视频一区二区| 曰老女人黄片| 亚洲中文av在线| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 久久婷婷成人综合色麻豆| 听说在线观看完整版免费高清| 国产成人欧美在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 国产成人影院久久av| 国内精品久久久久精免费| 国产av在哪里看| 国模一区二区三区四区视频 | 好男人电影高清在线观看| 18禁美女被吸乳视频| 久久人妻av系列| 国产av在哪里看| 国模一区二区三区四区视频 | 免费看a级黄色片| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 91老司机精品| 国产真人三级小视频在线观看| 在线观看午夜福利视频| 制服人妻中文乱码| 身体一侧抽搐| 国产精品精品国产色婷婷| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 正在播放国产对白刺激| 成人三级黄色视频| 亚洲欧美日韩高清专用| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 久久中文字幕一级| 国产探花在线观看一区二区| 国产一区二区在线观看日韩 | 欧美一区二区国产精品久久精品 | 美女大奶头视频| 日本一二三区视频观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 久久中文看片网| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产亚洲av高清不卡| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 欧美又色又爽又黄视频| tocl精华| 欧美精品啪啪一区二区三区| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲精品色激情综合| 成人国语在线视频| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 精品久久久久久久久久免费视频| 亚洲国产看品久久| 亚洲欧美激情综合另类| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 中国美女看黄片| 91九色精品人成在线观看| 亚洲激情在线av| 欧美色欧美亚洲另类二区| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产黄a三级三级三级人| 在线看三级毛片| 老司机深夜福利视频在线观看| 熟女电影av网| 桃色一区二区三区在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 午夜影院日韩av| 听说在线观看完整版免费高清| 可以在线观看的亚洲视频| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国产成人av激情在线播放| 在线观看www视频免费| 免费电影在线观看免费观看| 久久九九热精品免费| 欧美大码av| 久久久久久免费高清国产稀缺| 天堂√8在线中文| 精品熟女少妇八av免费久了| 黄色a级毛片大全视频| 一区二区三区高清视频在线| 精品乱码久久久久久99久播| 欧美乱妇无乱码| 国产成人av激情在线播放| 亚洲精品中文字幕在线视频| 欧美一区二区国产精品久久精品 | 999久久久精品免费观看国产| 亚洲av第一区精品v没综合| 窝窝影院91人妻| 黄色女人牲交| 国产精品久久电影中文字幕| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 成年版毛片免费区| 国产黄色小视频在线观看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产精品一区二区三区四区久久| 午夜久久久久精精品| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产成人av教育| 日本黄色视频三级网站网址| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产伦一二天堂av在线观看| 午夜福利免费观看在线| 在线播放国产精品三级| 日韩精品免费视频一区二区三区| 老司机午夜福利在线观看视频| 男人舔女人的私密视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 久久国产精品影院| 夜夜爽天天搞| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 黄色视频不卡| 黄色a级毛片大全视频| 99久久精品热视频| 欧美极品一区二区三区四区| 久久久国产欧美日韩av| 无人区码免费观看不卡| 999久久久国产精品视频| 最近最新免费中文字幕在线| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 精品国产美女av久久久久小说| 成年女人毛片免费观看观看9| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 香蕉国产在线看| 麻豆成人av在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 露出奶头的视频| 午夜精品一区二区三区免费看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲真实伦在线观看| 午夜精品久久久久久毛片777| 亚洲色图av天堂| 黄频高清免费视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 午夜福利免费观看在线| 一级毛片高清免费大全| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 精华霜和精华液先用哪个| 亚洲成a人片在线一区二区| 午夜福利高清视频| av福利片在线| 午夜福利高清视频| 操出白浆在线播放| ponron亚洲| 后天国语完整版免费观看| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲精华国产精华精| 国产精品乱码一区二三区的特点| 两个人视频免费观看高清| 成人永久免费在线观看视频| 日韩欧美免费精品| 日韩国内少妇激情av| 嫩草影院精品99| 麻豆一二三区av精品| 深夜精品福利| 午夜精品一区二区三区免费看| 久久99热这里只有精品18| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产一区二区在线观看日韩 | 淫秽高清视频在线观看| 亚洲国产欧美网| 波多野结衣高清作品| 最新美女视频免费是黄的| 丰满的人妻完整版| 精品第一国产精品| www.999成人在线观看| 制服人妻中文乱码| 亚洲男人天堂网一区| 天堂影院成人在线观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 中文字幕最新亚洲高清| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 成人国语在线视频| 国产一区在线观看成人免费| 老司机福利观看| 五月伊人婷婷丁香| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲国产看品久久| 久久伊人香网站| 男女下面进入的视频免费午夜| 久久久久国产一级毛片高清牌| 午夜福利18| 欧美丝袜亚洲另类 | 天堂动漫精品| 日日爽夜夜爽网站| 久久久精品欧美日韩精品| 日韩欧美在线乱码| 制服丝袜大香蕉在线| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产黄片美女视频| 亚洲黑人精品在线| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲五月天丁香| 久久国产精品影院| 欧美乱妇无乱码| 日本黄大片高清| 亚洲成av人片免费观看| 久久久久久人人人人人| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 18禁观看日本| 亚洲欧美激情综合另类| 国产在线观看jvid| 成熟少妇高潮喷水视频| 丰满的人妻完整版| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 性色av乱码一区二区三区2| 欧美日韩黄片免| 中文字幕熟女人妻在线| 欧美中文综合在线视频| 悠悠久久av| 人成视频在线观看免费观看| 一区二区三区国产精品乱码| 精品国产美女av久久久久小说| 桃色一区二区三区在线观看| 久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲av熟女| 精品高清国产在线一区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 成年免费大片在线观看| 国产一区二区三区视频了| 一夜夜www| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲美女视频黄频| 在线看三级毛片| 老汉色∧v一级毛片| av超薄肉色丝袜交足视频| 欧美日本视频| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲avbb在线观看| 国产av在哪里看| 最近在线观看免费完整版| 国产精品免费视频内射| 搡老妇女老女人老熟妇| 窝窝影院91人妻| 日韩欧美国产一区二区入口| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 99国产精品一区二区蜜桃av| 成人欧美大片| 免费看a级黄色片| 麻豆国产av国片精品| 国产精品99久久99久久久不卡| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 中文字幕久久专区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 欧美中文日本在线观看视频| 午夜视频精品福利| 一级片免费观看大全| 婷婷亚洲欧美| 午夜免费激情av| 少妇粗大呻吟视频| av片东京热男人的天堂| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 最新美女视频免费是黄的| 99在线人妻在线中文字幕| 真人做人爱边吃奶动态| 一夜夜www| 黄色成人免费大全| 亚洲欧美日韩高清专用| 男女午夜视频在线观看| 国产精品 欧美亚洲| 深夜精品福利| netflix在线观看网站| 欧美日韩乱码在线| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 午夜精品久久久久久毛片777| 午夜免费成人在线视频| 精品久久久久久成人av| 国产成年人精品一区二区| 麻豆一二三区av精品| 91av网站免费观看| 在线观看66精品国产| tocl精华| 午夜福利18| svipshipincom国产片| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 国产精品久久久久久精品电影| 国产在线精品亚洲第一网站| 亚洲精品粉嫩美女一区| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲国产精品合色在线| 久久性视频一级片| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 久久伊人香网站| 免费高清视频大片| 国产亚洲精品一区二区www| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 性欧美人与动物交配| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国内精品久久久久精免费| 久久久精品欧美日韩精品| 成人国产综合亚洲| 久9热在线精品视频| 午夜福利在线在线| 99热这里只有精品一区 | 久久中文字幕一级| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 欧美日韩福利视频一区二区| av国产免费在线观看| 国产高清videossex| 亚洲熟妇熟女久久| 又黄又粗又硬又大视频| 日韩高清综合在线| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 久久久久国产一级毛片高清牌| 宅男免费午夜| 精品高清国产在线一区| 夜夜爽天天搞| ponron亚洲| 色综合欧美亚洲国产小说| 亚洲激情在线av| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 黄色女人牲交| 久久久久久久久中文| 亚洲黑人精品在线| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产精品亚洲av一区麻豆| 一进一出好大好爽视频| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产精品 国内视频| 国产精品综合久久久久久久免费| 欧美成人免费av一区二区三区| 深夜精品福利| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 中国美女看黄片| 97碰自拍视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产黄a三级三级三级人| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产av又大| 国产在线观看jvid| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 精品午夜福利视频在线观看一区| 天堂动漫精品| 757午夜福利合集在线观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 婷婷精品国产亚洲av在线| 高清在线国产一区| 久久久久久大精品| 一级黄色大片毛片| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 99re在线观看精品视频| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 亚洲七黄色美女视频| 妹子高潮喷水视频| 91麻豆av在线| 日韩三级视频一区二区三区| 日韩精品中文字幕看吧| 久99久视频精品免费| 国产一区二区在线观看日韩 | 美女 人体艺术 gogo| 日韩精品免费视频一区二区三区| 黄色毛片三级朝国网站| 中亚洲国语对白在线视频| 嫩草影视91久久| √禁漫天堂资源中文www| 午夜福利免费观看在线| 精品不卡国产一区二区三区| 国产亚洲欧美98| 久久久久久久久久黄片| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 日本熟妇午夜| 99精品久久久久人妻精品| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 中文字幕人妻丝袜一区二区| 欧美精品啪啪一区二区三区| 欧美日韩福利视频一区二区| 婷婷六月久久综合丁香| 久久精品国产综合久久久| 久久精品成人免费网站| 久久人人精品亚洲av| 两个人看的免费小视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 中文字幕高清在线视频| 男女视频在线观看网站免费 | 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产精品1区2区在线观看.| 精品无人区乱码1区二区| 国产精品一及| 国产成+人综合+亚洲专区| 一本一本综合久久| 成人三级黄色视频| 国产av麻豆久久久久久久| 亚洲精华国产精华精| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲av成人精品一区久久| av视频在线观看入口| 国产爱豆传媒在线观看 | 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| av福利片在线观看| 桃色一区二区三区在线观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 成年版毛片免费区| 欧美色欧美亚洲另类二区| 久久99热这里只有精品18| 中文字幕久久专区| 国产精品av久久久久免费| 亚洲色图av天堂| 青草久久国产| 一区二区三区激情视频| 香蕉国产在线看| 午夜视频精品福利| 亚洲免费av在线视频| 在线观看一区二区三区| 国产精品永久免费网站| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 波多野结衣巨乳人妻| 日韩欧美免费精品| 又紧又爽又黄一区二区| 麻豆成人午夜福利视频| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 老司机午夜福利在线观看视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 免费观看精品视频网站| 国产精品精品国产色婷婷| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 久久精品成人免费网站| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 日本在线视频免费播放| 亚洲18禁久久av| 香蕉久久夜色| 免费看十八禁软件| 一区二区三区高清视频在线| 久久久国产成人精品二区| 国产精品av视频在线免费观看| 制服人妻中文乱码| 国产精品爽爽va在线观看网站| 天天一区二区日本电影三级| 久久人妻福利社区极品人妻图片|