桉油精氣相色譜分析方法研究

黃 蕙，黃朝萬(wàn)，夏麗娟，楊細(xì)蓉，夏洪兵

(1.成都彩虹電器(集團(tuán))股份有限公司，四川 成都 610045；2.四川省農(nóng)藥檢定所，四川 成都 610041)

1 前言

白紋伊蚊AedesalbopictusSkuse是我國(guó)一種重要的醫(yī)學(xué)媒介昆蟲(chóng)，是登革熱和基孔肯雅病的主要傳播媒介，感染實(shí)驗(yàn)表明還能傳播乙腦病毒等多種蟲(chóng)媒病毒病[1]。使用驅(qū)避劑是個(gè)人戶外防蚊的主要措施之一。目前市場(chǎng)上的驅(qū)避劑主流成分皆為化學(xué)農(nóng)藥,主要成分有避蚊胺(DEET)，驅(qū)蚊酯，羥哌酯等成分，產(chǎn)品形式多為驅(qū)蚊液或驅(qū)蚊花露水。近年來(lái)也有關(guān)于DEET被報(bào)道對(duì)人體有副作用、對(duì)環(huán)境有害[2]。法國(guó)Corbel等[3]最新研究成果表明，DEET對(duì)昆蟲(chóng)和哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)酶的活性有抑制作用，且DEET與氨基甲酸鹽類殺蟲(chóng)劑混用時(shí)，毒性增強(qiáng)。驅(qū)蚊酯和羥哌酯雖然還未見(jiàn)負(fù)面報(bào)道，但是隨著國(guó)家農(nóng)藥綠色發(fā)展的趨勢(shì)，從植物中尋找驅(qū)蚊活性物質(zhì)受到了人們的重視。我國(guó)植物種類豐富，為尋找植物源蚊蟲(chóng)驅(qū)避劑提供了豐富資源。

桉樹(shù)(Eucalyptusrobusta Smith)又稱尤加利樹(shù)，是桃金娘科、桉屬植物的統(tǒng)稱，它是全球擁有最多品種的樹(shù)種之一，有945個(gè)種和變種[4]。桉樹(shù)的樹(shù)根、花及葉都可供藥用且具有獨(dú)特的藥理活性。從藥學(xué)角度來(lái)說(shuō)，桉樹(shù)葉性平，味微辛且苦，可以用于治療流感、流腦以及各種炎癥，同時(shí)還可用于傷口殺菌、治療皮膚瘙癢、廯、紅腫等疾病[5-10]。桉油精廣泛存在于藍(lán)桉、油樟、迷迭香鼠尾草等植物揮發(fā)油中，是經(jīng)一定工藝提取的桉樹(shù)活性物質(zhì)。桉油精通過(guò)與光化學(xué)產(chǎn)生的羥基自由基(SRC)反應(yīng)，在空氣中氣相電暈可降解。在空氣中這種反應(yīng)的半衰期估計(jì)為1.4d，其在25℃的反應(yīng)速率常數(shù)為1.11×10-11 cu cm/molecule-sec。這說(shuō)明桉油精是一個(gè)在空氣中易降解的化學(xué)物質(zhì)，對(duì)環(huán)境的影響很小。桉油精又稱桉樹(shù)腦、桉葉素、桉樹(shù)精、桉葉油，其化學(xué)名稱為1,3,3-三甲基-2-氧雙環(huán)[2,2,2]辛烷。桉油精是一種重要的精細(xì)化工產(chǎn)品，桉油精主要用于醫(yī)藥、日用品工業(yè)、食品添加劑等方面。1,8-桉葉素被用作食品，糖果，咳嗽滴劑，個(gè)人護(hù)理產(chǎn)品和藥物中的香料和調(diào)味劑。它也被用作煙草中的風(fēng)味劑。它存在于許多消費(fèi)品中，例如漱口水，皮革用蠟，地板，空氣清新劑和松油基清潔劑。桉油精具有清涼香氣，對(duì)人無(wú)毒，作為食品舔加劑使用時(shí)最多見(jiàn)于口香糖的配方。

經(jīng)過(guò)研究，桉油精因其自然揮發(fā)的氣味能讓蚊蟲(chóng)感到不適，從而逃離，因此能起到驅(qū)蚊的效果,可以應(yīng)用于植物精油驅(qū)蚊產(chǎn)品上。本文即是對(duì)植物精油驅(qū)蚊產(chǎn)品里所含的桉油精進(jìn)行氣相色譜檢測(cè)，建立檢測(cè)方法進(jìn)行分離和定量分析。

2 試驗(yàn)部分

2.1 試劑和溶液

丙酮(分析純)由成都市科隆化學(xué)品有限公司提供；桉油精標(biāo)準(zhǔn)品(已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.0%)由上海阿拉丁生化科技股份有限公司提供；氯苯 (內(nèi)標(biāo)，分析純)由武漢富鑫遠(yuǎn)科技有限公司提供。

2.2 儀器

7890B氣相色譜儀：具有FID檢測(cè)器(Aglient)；色譜柱：30m×0.32mm×0.25μm INNOWAX毛細(xì)管色譜柱(Aglient)；微量注射器：10ul(Aglient)。

2.3 氣相色譜操作條件

柱溫：柱溫50℃保持5min，然后以10℃/min升溫至250℃，進(jìn)樣器250℃， 檢測(cè)器 260℃；

氣體流量：載氣(氮?dú)?：1.0mL/min；氫氣：30mL/min；空氣：300mL/min；

進(jìn)樣量：1.0ul。

桉油精標(biāo)樣和樣品中桉油精的氣相色譜圖見(jiàn)圖1和圖2。

2.4 測(cè)定步驟

2.4.1 內(nèi)標(biāo)溶液配制 準(zhǔn)確稱取內(nèi)標(biāo)氯苯0.1g至50mL容量瓶中，用丙酮稀釋后定容，待用。

2.4.2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制 準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)品桉油精約0.09g(精確至0.0002g)于25mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容，作為桉油精標(biāo)準(zhǔn)溶液，待用；移取5mL上述配制好的內(nèi)標(biāo)溶液、桉油精標(biāo)準(zhǔn)溶液25mL容量瓶中，以丙酮溶解并定容，作為標(biāo)樣溶液，備用。

2.4.3 試樣溶液的配制 在一個(gè)潔凈的磨口三角瓶中，使用鑷子夾取一片樣品，準(zhǔn)確稱取樣品質(zhì)量(精確至0.0002g)，再準(zhǔn)確移取上述內(nèi)標(biāo)溶液5mL，加入丙酮約20mL，蓋住橡膠塞浸泡1h后，搖勻，作為樣品溶液。取上層清液進(jìn)行色譜分析。

2.4.4 測(cè)定 在上述色譜條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰兩針桉油精與內(nèi)標(biāo)物氯苯的峰面積比的相對(duì)變化小于1.5%后，按標(biāo)樣溶液、樣品溶液、樣品溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

2.4.5 計(jì)算 將測(cè)得的兩針樣品溶液及樣品前后兩針標(biāo)準(zhǔn)溶液中桉油精與內(nèi)標(biāo)物氯苯峰面積之比，分別進(jìn)行平均。產(chǎn)品中桉油精質(zhì)量分?jǐn)?shù)x(%)按式(1)進(jìn)行計(jì)算：

式中：

X-產(chǎn)品中桉油精質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%

R1—標(biāo)準(zhǔn)品與內(nèi)標(biāo)物氯苯峰面積的比值;

R2—樣品與內(nèi)標(biāo)物氯苯峰面積的比值；

m1—標(biāo)準(zhǔn)溶液中桉油精標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量，mg；

m2—驅(qū)蚊貼樣品的質(zhì)量，mg；

P—標(biāo)準(zhǔn)品中桉油精的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

3 結(jié)果與討論

3.1 分析方法的線性相關(guān)性試驗(yàn)

稱取不同量桉油精標(biāo)準(zhǔn)品于25mL容量瓶中，準(zhǔn)確加入氯苯內(nèi)標(biāo)溶液5mL配制成桉油精與內(nèi)標(biāo)質(zhì)量比(Mr/Mi)分別為5個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述操作條件分別測(cè)定，以桉油精與內(nèi)標(biāo)物氯苯質(zhì)量比為橫坐標(biāo)，以桉油精與內(nèi)標(biāo)物氯苯峰面積比為縱坐標(biāo)，得工作曲線。。

桉油精線性關(guān)系數(shù)據(jù)見(jiàn)表1，線性關(guān)系圖見(jiàn)圖3桉油精標(biāo)樣的添加濃度(x)與平均峰面積比(y)之間滿足線性關(guān)系y=1.192x-0.029，線性相關(guān)系數(shù)R2=0.998。

3.2 分析方法的精密度試驗(yàn)

對(duì)同一試驗(yàn)樣品中的桉油精質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行5次平行測(cè)定，并對(duì)其進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)偏差及變異系數(shù)的統(tǒng)計(jì)運(yùn)算。同時(shí)運(yùn)用修改的Horwits公式作為精密度是否合格的判定依據(jù)，結(jié)果見(jiàn)表1。

由表2可知，本分析方法的變異系數(shù)為0.17%，遠(yuǎn)小于Horwits公式計(jì)算值，精密度合格，能對(duì)桉油精進(jìn)行精確地分析。

表1 桉油精方法精密度實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

3.3 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取經(jīng)分析已知桉油精準(zhǔn)確含量的樣品，加入桉油精標(biāo)準(zhǔn)品溶液9.7mg/5mL于25mL容量瓶中，準(zhǔn)確加入內(nèi)標(biāo)溶液5.0mL，用丙酮定容，按上述方法測(cè)定桉油精的回收率，其結(jié)果如表2。桉油精的添加回收率在98.97%～100.31%之間，平均回收率99.69%，RSD為0.49%，因此本方法可以滿足對(duì)產(chǎn)品中桉油精的分離測(cè)定。

表2 桉油精準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

4 結(jié)論

綜上所述，本試驗(yàn)建立了氣相色譜法檢測(cè)植物精油驅(qū)蚊產(chǎn)品中桉油精成分的分析方法。試驗(yàn)結(jié)果表明，采用本方法測(cè)定桉油精質(zhì)量分?jǐn)?shù)具有較高的線性響應(yīng)，較高的準(zhǔn)確度和精密度。本方法具有操作簡(jiǎn)單、高效的特點(diǎn)，是企業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量控制較為理想的分析檢測(cè)方法，提高了檢測(cè)效率。