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    青稞麩皮油聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂飲食大鼠動(dòng)脈硬化脂代謝的影響

    2020-12-15 04:44:56劉雪梅胡古月
    中國(guó)糧油學(xué)報(bào) 2020年11期
    關(guān)鍵詞:麩皮青稞有氧

    李 悅 劉雪梅 胡古月

    (長(zhǎng)春大學(xué)1, 長(zhǎng)春 130022) (長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)2, 長(zhǎng)春 130000) (吉林交通職業(yè)技術(shù)學(xué)院3,長(zhǎng)春 130012)

    青稞屬禾本科大麥屬,在植物學(xué)上屬于栽培大麥的變種,青稞耐寒性強(qiáng),適應(yīng)性廣,高產(chǎn)早熟,在青藏高原已有3500多年的種植歷史[1]。廣泛種植于我國(guó)的四川、西藏、青海等地區(qū)[2]。青稞的營(yíng)養(yǎng)較為全面,其具有高蛋白、高纖維、高維生素、低脂肪以及低糖等,另外青稞中富含β-葡聚糖、花青素、黃酮類化合物、維生素、膳食纖維等功能性成分[3-4]。

    當(dāng)前,青稞加工生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生了大量的青稞麩皮,并且它是生產(chǎn)加工中的副產(chǎn)品,僅僅作為動(dòng)物飼料或者直接廢棄,造成了巨大的資源浪費(fèi)。青稞麩皮資源豐富,有廣闊的開(kāi)發(fā)前景。目前對(duì)于青稞麩皮的研究主要集中于對(duì)青稞麩皮的功能性成分的相關(guān)提取,錢俊偉[5]等對(duì)青稞麩皮油脂肪酸成分分析及其對(duì)高血脂癥大鼠脂質(zhì)代謝的影響,朱穎秋[6]等對(duì)青稞麩皮油進(jìn)行了提取并研究了對(duì)高血脂大鼠的降脂作用研究,馬超[7]等對(duì)青稞麩皮油進(jìn)行了分析以及對(duì)其含有的β-葡聚糖的含量進(jìn)行了測(cè)定。青稞麩皮中主要營(yíng)養(yǎng)成分為淀粉(43.80%)、蛋白質(zhì)(10.50%)以及膳食纖維(39.23%)[8]。另外,青稞麩皮中β-葡聚糖的含量大約為15%,具有降低膽固醇、降血糖、增強(qiáng)免疫力、抗癌功能等功效。維生素E含量較高(0.3~0.8 mg/100 g),具有降血脂、防止動(dòng)脈硬化和血栓的形成的功效[9]。青稞麩皮中花青素的含量大約為7.0 mg/g,花青素是水溶性自由基清除劑,能夠保護(hù)細(xì)胞和組織不被自由基氧化,具有降血脂、抗脂質(zhì)過(guò)氧化、改善血液循環(huán)等功能[10]。鑒于青稞麩皮油的對(duì)于降低膽固醇、降血糖、降血脂的功效較好,并且國(guó)內(nèi)對(duì)于青稞麩皮油的相關(guān)功能性研究較少。本研究通過(guò)制備青稞麩皮油并且聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)動(dòng)脈硬化大鼠模型脂代謝的影響,為青稞麩皮的開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    黑青稞麩皮(Hordeum):室溫干燥儲(chǔ)藏;正己烷:分析純;甘油三脂(Triglyceride,TG)試劑盒、總膽固醇(Total cholesterol,TC)試劑盒、高密度脂蛋白(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)試劑盒、低密度脂蛋白(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)試劑盒、基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix Metalloprotein-9,MMP-9)試劑盒、金屬蛋白酶組織抑制因子(Tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMP-1)試劑盒;高脂飼料(4%膽固醇、0.5%膽酸鈉、10%豬大油、5%蛋黃粉、80.5%的基礎(chǔ)飼料)。

    選取SPF級(jí)雄性SD大鼠50只,體重在(160±5)g:上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司,許可證編號(hào):(SYXK(滬)2017—0008)。

    1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

    DD-5M型離心機(jī),JJ523BC型電子天平,F(xiàn)W-100型粉碎機(jī),BQS-1020型超聲波清洗機(jī),ZS-PT-Ⅲ型動(dòng)物實(shí)驗(yàn)跑臺(tái)。

    1.3 方法

    1.3.1 青稞麩皮油的制備

    將青稞麩皮洗凈晾干,粉碎過(guò)80目篩收集備用。稱量青稞麩皮粉末若干,置于錐形瓶中,分別加入提取溶劑正己烷100 mL,在超聲功率140 W、超聲溫度40 ℃、超聲時(shí)間處理20 min。將得到的提取液在4 000 r/min的條件下離心10 min,取上清液,利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溶劑進(jìn)行濃縮,將濃縮物置于干燥箱中烘干至恒重,得到青稞麩皮油[11]。

    1.3.2 青稞麩皮油理化指標(biāo)測(cè)定

    過(guò)氧化值測(cè)定:參考GB5009.227—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中過(guò)氧化值的測(cè)定》;酸值測(cè)定:參考GB 5009.229—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中酸價(jià)的測(cè)定》;皂化值測(cè)定:參考GB/T 5534—2008《動(dòng)植物油脂皂化值的測(cè)定》;碘值:參考GB/T5532—2008《動(dòng)植物油脂碘值的測(cè)定》。

    1.3.3 動(dòng)脈硬化模型建立

    選取SPF級(jí)雄性SD大鼠50只,體重在(160±5)g,隨機(jī)分成5組,每個(gè)小組10只大鼠,分成對(duì)照組、模型組、運(yùn)動(dòng)組、青稞麩皮油組、青稞麩皮油聯(lián)合運(yùn)動(dòng)組。50只SD大鼠雄性大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,其中對(duì)照組每天給予普通飼料,其他4組給予高脂飼料(4%膽固醇、0.5%膽酸鈉、10%豬大油、5%蛋黃粉、80.5%的基礎(chǔ)飼料),并且大鼠通過(guò)腹腔注射維生素D3注射液(60萬(wàn)U/kg),每2天1次注射,建立大鼠動(dòng)脈硬化模型。其中青稞麩皮油組以及青稞麩皮油聯(lián)合運(yùn)動(dòng)組每天灌胃200 mg/kg的青稞麩皮油。大鼠正常飲水,試驗(yàn)時(shí)間總共6周[12,13]。

    1.3.4 訓(xùn)練方法與測(cè)試

    將大鼠放置在實(shí)驗(yàn)跑臺(tái)上進(jìn)行運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練,第1周對(duì)大鼠進(jìn)行適應(yīng)訓(xùn)練,訓(xùn)練時(shí)間每次跑步15 min,每天2次。第2周開(kāi)始將跑臺(tái)參數(shù)設(shè)置成0°、10m/min,使大鼠跑步訓(xùn)練保持20 min;第3周開(kāi)始將跑臺(tái)參數(shù)設(shè)置成5°、15m/min,訓(xùn)練保持在20 min。試驗(yàn)時(shí)間總共6周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,用1%戊巴比妥鈉對(duì)大鼠進(jìn)行麻醉,取大鼠腹部的主動(dòng)脈血做血脂分析,測(cè)試TG、TC、HDL-C、LDL-C、MMP-9,TIMP-1并且按照試劑盒說(shuō)明測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)。

    1.3.5 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理要求

    在實(shí)驗(yàn)中根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的倫理要求,充分考慮動(dòng)物的利益,試驗(yàn)期間善待動(dòng)物,防止或減少動(dòng)物的應(yīng)激、痛苦和傷害,尊重動(dòng)物生命,制止針對(duì)動(dòng)物的野蠻行為、采取痛苦最少的方法處置動(dòng)物。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

    本文使用SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,數(shù)據(jù)均使用均值±標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)表示,采取組間進(jìn)行對(duì)比,P<0.05表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 青稞麩皮油理化指標(biāo)及質(zhì)量控制

    青稞麩皮油理化指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果如表1所示,青稞麩皮油呈淡黃色,無(wú)異味,殘留溶劑小于50mg/kg,并且測(cè)定結(jié)果符合GB/T 2716—2018《食品安全國(guó)家植物油標(biāo)準(zhǔn)》。

    質(zhì)量控制:原料青稞麩皮采購(gòu)時(shí)控制相應(yīng)的質(zhì)量指標(biāo);控制超聲萃取時(shí)相關(guān)的試驗(yàn)參數(shù);控制提取溶劑的量,防止殘留溶劑超標(biāo);防止油脂氧化,造成酸敗。

    表1 青稞麩皮油理化指標(biāo)

    2.2 青稞麩皮油對(duì)動(dòng)脈硬化大鼠MMP-9、TIMP-1的影響

    從表2分析得出,模型組與對(duì)照組相比MMP-9水平明顯升高(P<0.05),運(yùn)動(dòng)組、青稞麩皮油、青稞麩皮油聯(lián)合運(yùn)動(dòng)組,MMP-9水平呈下降趨勢(shì),青稞麩皮油聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)組與模型組相比MMP-9水平明顯降低(P<0.05);模型組與對(duì)照組相比TIMP-1水平明顯降低(P<0.05),運(yùn)動(dòng)組、青稞麩皮油組、青稞麩皮油聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)組,TIMP-1水平呈上升趨勢(shì),青稞麩皮油聯(lián)合運(yùn)動(dòng)組與模型組相比TIMP-1水平明顯升高(P<0.05)。動(dòng)脈硬化的主要病理基礎(chǔ)是血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、脂質(zhì)的沉積、內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、泡沫細(xì)胞的出現(xiàn)以及血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移,并且細(xì)胞外基質(zhì)降解失衡是動(dòng)脈硬化形成的重要環(huán)節(jié)。MMPs是一組幾乎能降解細(xì)胞外基質(zhì)中各種蛋白成分的重要酶類。MMP-9是MMPs家族中的一個(gè)重要成員,主要作用是降解所有的細(xì)胞外基質(zhì),從而減弱斑塊的纖維帽強(qiáng)度,導(dǎo)致纖維組織薄弱,介導(dǎo)炎癥反應(yīng)促進(jìn)吞噬細(xì)胞聚集,從而導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定和斑塊破裂。TIMP-1是MMP-9的天然特異性抑制劑,其可以競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合MMP-9催化區(qū)中的Zn2+活性中心,形成MMP-9/TIMP-1 復(fù)合物,抑制MMP-9的活性。說(shuō)明青稞麩皮油可以有效緩解大鼠動(dòng)脈硬化的癥狀,能夠抑制炎癥反應(yīng),降解細(xì)胞外基質(zhì),同時(shí)對(duì)TIMP-1起到拮抗作用,盡可能避免TIMP-1對(duì)MMP-9造成影響。另外,大鼠通過(guò)有氧運(yùn)動(dòng)的訓(xùn)練可以對(duì)動(dòng)脈硬化起到影響,但是兩者單獨(dú)作用沒(méi)有兩者聯(lián)合作用效果好。

    表2 青稞麩皮油對(duì)動(dòng)脈硬化大鼠MMP-9酶、TIMP-1酶的影響

    2.3 青稞麩皮油對(duì)動(dòng)脈硬化大鼠脂代謝的影響

    從表3可以分析得出,模型組與對(duì)照組相比血清TC水平明顯升高(P<0.05),運(yùn)動(dòng)組、青稞麩皮油、青稞麩皮油聯(lián)合運(yùn)動(dòng)組,血清TC水平呈下降趨勢(shì),青稞麩皮油聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)組與模型組相比血清TC水平明顯降低(P<0.05);模型組與對(duì)照組相比血清TG水平明顯升高(P<0.05),運(yùn)動(dòng)組、青稞麩皮油、青稞麩皮油聯(lián)合運(yùn)動(dòng)組,血清TG水平呈下降趨勢(shì),青稞麩皮油聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)組與模型組相比血清TG水平明顯降低(P<0.05);模型組與對(duì)照組相比血清HDL-C水平明顯降低(P<0.05),運(yùn)動(dòng)組、青稞麩皮油、青稞麩皮油聯(lián)合運(yùn)動(dòng)組,血清HDL-C水平呈上升趨勢(shì),青稞麩皮油聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)組與模型組相比血清HDL-C水平明顯升高(P<0.05);模型組與對(duì)照組相比血清LDL-C水平明顯升高(P<0.05),運(yùn)動(dòng)組、青稞麩皮油、青稞麩皮油聯(lián)合運(yùn)動(dòng)組,血清LDL-C呈下降趨勢(shì),青稞麩皮油聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)組與模型組相比血清LDL-C水平明顯降低(P<0.05)。高脂血癥是目前公認(rèn)的最重要的導(dǎo)致動(dòng)脈硬化的危險(xiǎn)因素之一,動(dòng)脈硬化的重要防御因子中的一個(gè)主要因素就是血漿血脂中的HDL-C,而血漿中血脂主要成分包括 TC、TG、HDL-C和LDL-C,對(duì)于動(dòng)脈硬化的發(fā)生具有明顯的抑制作用,并且對(duì)動(dòng)脈硬化的消退也有明顯的作用。說(shuō)明青稞麩皮油可以降低TC、TG、LDL-C的水平,提高HDL-C的水平,可以通過(guò)改善脂代謝來(lái)抑制動(dòng)脈硬化的形成。另外,大鼠通過(guò)有氧運(yùn)動(dòng)的訓(xùn)練可以對(duì)動(dòng)脈硬化起到影響,但是兩者單獨(dú)作用沒(méi)有兩者聯(lián)合作用效果好。

    表3 青稞麩皮油對(duì)動(dòng)脈硬化大鼠脂代謝的影響

    3 結(jié)論

    本文通過(guò)在高脂飲食的情況下建立大鼠動(dòng)脈硬化模型,研究青稞麩皮油聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠脂代謝的影響。結(jié)果表明,青稞麩皮油呈淡黃色,無(wú)異味,殘留溶劑小于50 mg/kg,表明青稞麩皮油品質(zhì)較好。并且青稞麩皮油可以有效緩解大鼠動(dòng)脈硬化的癥狀,能夠抑制炎癥反應(yīng),降解細(xì)胞外基質(zhì),同時(shí)對(duì)TIMP-1起到拮抗作用,盡可能避免TIMP-1對(duì)MMP-9造成影響。另外,青稞麩皮油還可以降低TC、TG、LDL-C的水平,提高HDL-C的水平,可以改善脂代謝來(lái)抑制動(dòng)脈硬化的形成。另外,大鼠通過(guò)有氧運(yùn)動(dòng)的訓(xùn)練可以對(duì)動(dòng)脈硬化起到影響,但是兩者單獨(dú)作用沒(méi)有兩者聯(lián)合作用效果好。

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