基于代謝組學(xué)的慢性心衰病證診斷研究述評

鐘森杰 李靜 李琳

[摘要] 慢性心衰的病理過程中伴隨著一系列代謝功能的復(fù)雜改變，代謝組學(xué)通過先進(jìn)的檢測技術(shù)與統(tǒng)計算法，可以從整體層面把握機體的代謝功能改變情況，現(xiàn)已成為心衰實驗研究的常用手段。本文歸納總結(jié)代謝組學(xué)技術(shù)在慢性心衰病證診斷中的研究概況，基于“代謝性重構(gòu)”理論闡述慢性心衰的代謝特征，探討慢性心衰不同證候的代謝組學(xué)變化規(guī)律，認(rèn)為代謝組學(xué)技術(shù)對心衰的病情評價及證型辨析具有一定的診斷價值。并對研究中存在的關(guān)鍵問題進(jìn)行論述，提出規(guī)范統(tǒng)一研究標(biāo)準(zhǔn)、合理設(shè)計對照實驗、注重心衰病證的動態(tài)過程研究等相應(yīng)的思路，以期為后續(xù)研究提供借鑒。

[關(guān)鍵詞] 慢性心衰;代謝組學(xué);生物標(biāo)志物;診斷研究

[中圖分類號] R259? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2020）10（b）-0040-05

[Abstract] The pathological process of chronic heart failure is accompanied by a series of complex changes of metabolic function. Metabolomics can grasp the metabolic function changes of the body from the overall level through advanced detection technology and statistical algorithms， which has now become a common means of experimental research on heart failure. This article summarizes metabonomics technology in the diagnosis of chronic heart failure disease research， based on the theory of “metabolic remodeling”， the metabolic characteristics of chronic heart failure are expounded， and the metabonomics change rules of different syndromes of chronic heart failure are discussed. It is believed that metabonomics technology has certain diagnostic value for the assessment of heart failure and the discrimination of syndrome types of heart failure. In addition， the key problems in the study are discussed， and the corresponding ideas such as standardized and unified research standards， reasonable design of controlled experiments， and emphasis on the dynamic process research of heart failure syndrome are put forward， so as to provide reference for subsequent studies.

[Key words] Chronic heart failure; Metabolomics; Biomarkers; Diagnostic research

慢性心衰是各種心臟疾病的終末階段，其發(fā)病率高、致死率高，為21世紀(jì)最重要的慢性心血管病癥[1-2]。心衰的相關(guān)癥狀、體征往往出現(xiàn)較晚，且表現(xiàn)不具有特異性，在一定程度上制約著疾病的診斷與證候的辨析[3]。由于方法學(xué)的先進(jìn)性，代謝組學(xué)等系統(tǒng)生物學(xué)技術(shù)已廣泛應(yīng)用于心衰的實驗研究中，已有多項研究表明心衰的病理過程中伴隨著多種代謝功能的復(fù)雜變化，其中心肌能量代謝障礙被視為心衰的關(guān)鍵生物學(xué)基礎(chǔ)[4-6]。因此，本文歸納總結(jié)代謝組學(xué)在慢性心衰病證診斷中的研究概況，探討其診斷價值，并對存在的關(guān)鍵問題進(jìn)行論述，提出相應(yīng)的研究思路。

1 “代謝性重構(gòu)”與心衰

現(xiàn)有的研究證據(jù)顯示，慢性心衰的病理過程中伴隨著一系列代謝功能的改變[7]。van Bilsen等[8]學(xué)者提出“代謝性重構(gòu)”概念，即由心肌細(xì)胞糖類和脂類等物質(zhì)代謝紊亂引起心臟能量代謝途徑的改變，從而導(dǎo)致結(jié)構(gòu)和功能異常的現(xiàn)象。衰竭心臟的“代謝性重構(gòu)”主要體現(xiàn)在三個方面：①心臟產(chǎn)能底物利用的改變，心臟可利用多種底物以滿足自身的能量需求，其中脂肪酸氧化是心臟所需能量的主要來源[9];心衰時心臟的代謝特征在于產(chǎn)能底物利用從脂肪酸向葡萄糖的明顯轉(zhuǎn)移，更有研究指出酮體、支鏈氨基酸是心衰末期的替代底物，但底物利用的轉(zhuǎn)移并不能滿足衰竭心臟的能量需求[10]。②高能磷酸鹽代謝異常：磷酸肌酸/三磷酸腺苷比值（PCr/ATP）反映心肌高能磷酸鹽的改變情況，并與心衰程度密切相關(guān)，而能量代謝障礙可直接導(dǎo)致PCr/ATP比值下調(diào)[11-12]。③線粒體功能障礙：線粒體是能量產(chǎn)生的核心，心衰時機體的線粒體數(shù)量降低，線粒體酶含量與活性減低，致使線粒體功能與結(jié)構(gòu)損傷[13]。

上述改變反映心衰時心肌能量產(chǎn)生不足，同時能量需求增加，能量供需失衡，提示能量代謝異常是疾病的典型表征[14]。盡管“代謝性重構(gòu)”與心衰病理機制之間的直接因果關(guān)系尚未完全明確，但現(xiàn)有的研究表明能量代謝異常是心衰收縮功能不全和心室重構(gòu)的關(guān)鍵因素[15]。尤其在心衰的終末階段，糖、脂氧化代謝功能障礙，致使產(chǎn)能急劇減少，機體處于“能量饑餓”狀態(tài)，不足以維持心臟正常的收縮功能[16]。“代謝性重構(gòu)”概念提出以后，許多學(xué)者從諸如糖酵解途徑、脂肪酸代謝等角度開展了相關(guān)研究，研究熱點多集中于代謝底物的利用轉(zhuǎn)變方面[17]。但單一的代謝途徑研究并不能反映機體的整體代謝狀況，而代謝組學(xué)的發(fā)展則彌補了這一局限。

代謝組學(xué)作為新興的系統(tǒng)生物學(xué)技術(shù)，致力于研究生物體受擾動后的內(nèi)源性代謝產(chǎn)物變化規(guī)律，為評價心肌能量代謝特征提供了新工具，近年來已成為心衰研究的常用技術(shù)手段。已有研究證據(jù)表明，心衰的能量代謝變化主要體現(xiàn)在酰基肉堿代謝的改變，如Hunter等[18]發(fā)現(xiàn)射血分?jǐn)?shù)保留的心衰患者血液中長鏈?；鈮A含量比正常人群高，而該代謝產(chǎn)物在射血分?jǐn)?shù)降低的心衰患者中則進(jìn)一步升高;Bedi等[19]則發(fā)現(xiàn)終末階段心衰患者有三種?；鈮A類物質(zhì)含量顯著下調(diào)。另有研究發(fā)現(xiàn)，心衰患者血液中的糖酵解代謝產(chǎn)物含量上調(diào)、葡萄糖氧化率降低可用于心肌能量代謝的評估，具有重要的診斷價值[20]。國內(nèi)學(xué)者亦開展了相關(guān)研究，如龐博等[21]利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對慢性心衰患者的尿液樣本進(jìn)行研究，篩選出尿苷和丙氨酰色氨酸作為疾病的潛在標(biāo)志物。代謝組學(xué)能提供單個患者的代謝表型及其相關(guān)的生物學(xué)信息，有望成為心衰病情及能量代謝異常的診斷依據(jù)，值得更為深入的研究。

2 代謝組學(xué)在心衰證候診斷中的研究概況

代謝組學(xué)強調(diào)從整體角度對生物體進(jìn)行研究，具有鮮明的整體性、系統(tǒng)性特點，與中醫(yī)學(xué)“整體觀念”下的辨證思維不謀而合。同時代謝組學(xué)所提供的現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)，可以彌補傳統(tǒng)四診方法的局限，為證候的現(xiàn)代化研究提供技術(shù)支持[22]。代謝組學(xué)作為心衰研究的常用技術(shù)，亦已廣泛應(yīng)用于心衰的證候研究方面，現(xiàn)將近年來的研究進(jìn)展總結(jié)如下：

2.1 心衰心氣虛證、心氣陰虛證、心陽虛證的代謝組學(xué)研究

中醫(yī)學(xué)對心衰的病機認(rèn)識已趨于一致，即為“本虛標(biāo)實”之證。單純的“本虛”之證多出現(xiàn)于心衰病程的早期或中期，其中心氣虛衰是始動因素并貫穿疾病的全過程，隨著病程發(fā)展逐漸演變?yōu)樾臍怅幪?、心陽虛衰[23]。李琪琳等[24]利用核磁共振氫譜分析心衰心氣虛證大鼠的尿液樣本，鑒定出12種相關(guān)的代謝產(chǎn)物，涉及糖、脂、氨基酸代謝紊亂及胃腸功能紊亂。李欣春等[25]、鐘森杰等[26]通過“以方測證”法建立心衰心氣陰虛證大鼠模型，并運用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)篩選出19種潛在的血液代謝標(biāo)志物，反映該病證模型存在氨基酸、糖、脂代謝紊亂及肝功能異常。有研究運用反相高效液相色譜分析了心衰心陽虛證患者的氨基酸代謝情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)苯丙氨酸與心陽虛證候積分存在明確的直線關(guān)系，而另一學(xué)者的研究再次驗證了苯丙氨酸與該病證關(guān)系密切[27-28]。Wang等[29]通過核磁共振氫譜技術(shù)，發(fā)現(xiàn)心衰心陽虛證患者的糖蛋白、乳酸、丙酮酸、脂蛋白等代謝產(chǎn)物水平出現(xiàn)改變，提示患者的脂代謝、糖酵解等代謝功能受擾動。

縱觀心衰“本虛”證的代謝組學(xué)研究結(jié)果，發(fā)現(xiàn)代謝途徑存在一定的共性，即多表現(xiàn)為三大營養(yǎng)素代謝通路（氨基酸類、糖類、脂類）的紊亂。這也體現(xiàn)了心衰早中期的代謝特征，即機體的糖、脂氧化代謝供能障礙，此時處于氨基酸代謝增強以供給能量的應(yīng)急代謝狀態(tài)。

2.2 心衰血瘀證、水停證、痰濁證的代謝組學(xué)研究

隨著“本虛”的進(jìn)一步發(fā)展，如心氣虛衰而血液運行不暢、陽氣虛衰而水飲溫化無力等，最終會導(dǎo)致血瘀、痰濁、水飲停聚等“標(biāo)實”之證。劉玲玲[30]運用液相色譜-質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，精氨酸代謝途徑與心衰關(guān)系密切，且心衰氣虛血瘀證與心衰陽虛水停證的尿液代謝表型存在顯著差異。王鵬軍等[31]驗證了心衰陽虛水停證與心衰氣虛血瘀證存在顯著的血液代謝表型差異，并發(fā)現(xiàn)氣虛血瘀證與磷脂、氨基酸代謝失衡相關(guān)，陽虛水停證與能量、肉堿、氨基酸、磷脂代謝失衡相關(guān)。王娟等[32]利用核磁共振氫譜技術(shù)研究心衰血瘀證與心衰非血瘀證患者的代謝差異，發(fā)現(xiàn)兩者血液之間存在11種差異代謝產(chǎn)物，進(jìn)一步分析認(rèn)為氨基酸、脂類、能量代謝的改變是心衰血瘀證的代謝特征。該學(xué)者還探討了慢性心衰痰濁證患者的血液代謝組學(xué)特征，篩選出丙氨酸、葡萄糖、膽堿、乳酸、脂蛋白等潛在的代謝標(biāo)志物[33]。陳靜等[34]運用核磁共振氫譜技術(shù)發(fā)現(xiàn)慢性心衰的代謝特征為氨基酸、糖、脂和三羧酸循環(huán)代謝紊亂，但運用此技術(shù)并不能很好地區(qū)分心衰氣虛血瘀證和心衰氣虛證患者。

心衰“標(biāo)實”證的代謝組學(xué)研究結(jié)果顯示，肉堿類、三羧酸循環(huán)等與能量代謝密切相關(guān)的代謝途徑受擾動。三羧酸循環(huán)是機體將糖或其他物質(zhì)氧化而獲得能量的最有效方式，即為能量代謝的核心[35];肉堿類物質(zhì)在線粒體內(nèi)最為豐富，線粒體的損傷必然導(dǎo)致肉堿水平紊亂[36]。這些物質(zhì)與功能的改變反映此階段已出現(xiàn)明顯的能量代謝障礙，印證了能量代謝在心衰病情加重中的重要作用。

2.3 心衰腎陽虛證的代謝組學(xué)研究

心衰病位雖在心，但并非單一臟腑的病變，而是與體內(nèi)諸多臟腑關(guān)系密切，有多項研究證實腎陽虛證亦是疾病的常見證型之一[37]。陶秀梅等[38]運用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)與健康人群及慢性心衰非腎陽虛證患者比較，慢性心衰腎陽虛證患者的尿液中主要出現(xiàn)三羧酸循環(huán)、兒茶酚胺、脂肪酸類代謝產(chǎn)物的變化。鄭海生等[39]運用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析慢性心衰腎陽虛證與慢性心衰氣陰兩虛證患者的尿液樣本，發(fā)現(xiàn)存在16種差異代謝產(chǎn)物，主要涉及能量代謝、氨基酸代謝及腸道菌群。就目前的研究結(jié)果而言，心衰腎陽虛證亦出現(xiàn)了一定程度的能量代謝障礙，這與心衰“標(biāo)實”證的結(jié)果存在共性，體現(xiàn)了心衰中晚期的代謝組學(xué)特征。

3 代謝組學(xué)在心衰病證診斷研究中的問題與對策

代謝組學(xué)由于方法學(xué)上的獨特優(yōu)勢，已在心衰病證診斷的研究領(lǐng)域中取得一定成果，但在應(yīng)用過程中亦暴露出部分問題。如何創(chuàng)新研究思路，充分發(fā)揮優(yōu)勢與改進(jìn)不足之處，是亟待解決的命題。筆者歸納當(dāng)前的應(yīng)用概況，對研究方法的標(biāo)準(zhǔn)化、實驗設(shè)計的合理性、心衰病證的動態(tài)可變性等關(guān)鍵問題進(jìn)行論述，并提出相應(yīng)的思路，以期為進(jìn)一步研究提供借鑒。

3.1 研究方法的標(biāo)準(zhǔn)化

在臨床研究中，代謝產(chǎn)物的變化往往受年齡、性別、體質(zhì)、生活方式等多方面因素的影響，而目前的大部分研究并未能有效排除這些干擾因素[40]。動物模型雖能較好地模擬人類的病理過程，并可降低部分干擾因素的影響，但心衰動物模型的造模方法較為繁雜，如高鹽飲食誘導(dǎo)、阿霉素誘導(dǎo)、左前降支結(jié)扎、腹主動脈結(jié)扎等[41-42]。不同造模方法必然對模型的代謝產(chǎn)物產(chǎn)生不同影響，且某些模型由藥物副作用或特殊飲食所致，這些混雜因素加劇了對模型代謝產(chǎn)物的擾動，導(dǎo)致結(jié)果有所偏倚。另一方面，研究中所采用的技術(shù)手段、儀器設(shè)備、樣本處理方法、數(shù)據(jù)庫等各方面亦尚未形成統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。

鑒于研究中的技術(shù)手段、研究對象、研究樣本等方面并不統(tǒng)一，致使各研究結(jié)果相對獨立，相互之間難以比較、驗證，當(dāng)前僅能從代謝途徑中管窺出一些共性之處。上述問題的存在，不利于敏感性、特異性代謝指標(biāo)的篩選，也在一定程度上制約了實驗的可重復(fù)性。因此，制訂統(tǒng)一的操作規(guī)程與技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)、探索穩(wěn)定可靠的心衰模型制備方法、確立規(guī)范化的納入與排除標(biāo)準(zhǔn)等各項標(biāo)準(zhǔn)化措施勢在必行，亦是今后該研究領(lǐng)域的發(fā)展重點。

3.2 實驗設(shè)計的合理性

設(shè)計合理的對照實驗，是開展科學(xué)研究的關(guān)鍵前提?？v觀目前的研究報導(dǎo)，部分心衰證候研究的對照設(shè)計過于簡單，甚至只進(jìn)行模型組與正常對照組的簡單比較。如心衰心氣陰虛證的代謝組學(xué)研究，僅僅選用正常對照組進(jìn)行比較，并未進(jìn)行異病同證、同病異證間的比較。簡單的兩兩對照設(shè)計未能有效厘清病證關(guān)系，慣性地否定了異病同證、同病異證存在的生物學(xué)改變，故只能獲取到與病證結(jié)合相關(guān)的代謝組學(xué)信息，而無法甄別出“病”或“證”的相關(guān)特異性代謝信息[43]。因此，在開展研究時既要遵循病證結(jié)合的研究框架，亦要充分考慮異病同證、同病異證間的生物學(xué)差異，合理設(shè)計對照實驗，盡可能厘清所得代謝指標(biāo)是與“病”相關(guān)或與“證”相關(guān)，保證研究結(jié)果的特異性。

3.3 心衰病證的動態(tài)可變性

心衰病證診斷的相關(guān)代謝組學(xué)研究多選用橫向研究法，即從疾病或證候已形成的時間截點出發(fā)，進(jìn)行橫向比較。這種研究方法旨在探討終端代謝產(chǎn)物，但忽略了病證的動態(tài)可變性，缺乏隨時間變化的動態(tài)研究?！安　迸c“證”并非是固定的鎖定關(guān)系，“證”具有動態(tài)可變性的特點，在疾病不同階段會出現(xiàn)不同的證候變化[44]。同時還需考慮到慢性心衰是由多種基礎(chǔ)性心臟疾病發(fā)展而來的進(jìn)行性病變，心衰的發(fā)展是一個相對緩慢的動態(tài)過程，不同病理階段的代謝組學(xué)表現(xiàn)差異顯著，而這些差異被證實是心衰發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因素[45]?；诩膊∨c證候的動態(tài)性、時空性特點，以及前文所提及的“代謝性重構(gòu)”理論，研究者應(yīng)將目光更多地聚集于心衰病證的縱向發(fā)展，即以心衰病證的動態(tài)變化過程作為代謝組學(xué)研究的切入點，實現(xiàn)橫向研究與縱向研究的相輔相成，以期從代謝學(xué)角度充分闡明病理機制及證候生物學(xué)基礎(chǔ)。

[參考文獻(xiàn)]

[1]? 陳可冀，吳宗貴，朱明軍，等.慢性心力衰竭中西醫(yī)結(jié)合診療專家共識[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2016，36（2）：133-141.

[2]? Metra M，Teerlink JR. Heart failure [J]. Lancet，2017，390（10106）：1981-1995.

[3]? 魏峰，張松林，張玉順，等.心力衰竭生物學(xué)標(biāo)志物的臨床意義及研究進(jìn)展[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2018，43（3）：311-316.

[4]? Doehner W，F(xiàn)renneaux M，Anker SD. Metabolic impairment in heart failure： the myocardial and systemic perspective [J]. J Am Coll Cardiol，2014，64（13）：1388-1400.

[5]? Albert CL，Tang WHW. Metabolic Biomarkers in Heart Failure [J]. Heart Fail Clin，2018，14（1）：109-118.

[6]? McGarrah RW，Crown SB，Zhang GF，et al. Cardiovascular Metabolomics [J]. Circ Res，2018，122（9）：1238-1258.

[7]? Chen L，Song J，Hu S. Metabolic remodeling of substrate utilization during heart failure progression [J]. Heart Fail Rev，2019，24（1）：143-154.

[8]? van Bilsen M，Smeets PJ，Gilde AJ，et al. Metabolic remodelling of the failing heart：the cardiac burn-out syndrome？ [J]. Cardiovasc Res，2004，61（2）：218-226.

[9]? Tuomainen T，Tavi P. The role of cardiac energy metabolism in cardiac hypertrophy and failure [J]. Exp Cell Res，2017， 360（1）：12-18.

[10]? Bertero E，Maack C. Metabolic remodelling in heart failure [J]. Nat Rev Cardiol，2018，15（8）：457-470.

[11]? Jameel MN，Xiong Q，Mansoor A，et al. ATP sensitive K（+） channels are critical for maintaining myocardial perfusion and high energy phosphates in the failing heart [J]. J Mol Cell Cardiol，2016，92：116-121.

[12]? Mahmod M，Pal N，Rayner J，et al. The interplay between metabolic alterations，diastolic strain rate and exercise capacity in mild heart failure with preserved ejection fraction：a cardiovascular magnetic resonance study [J]. J Cardiovasc Magn Reson，2018，20（1）：88.

[13]? 李楠.調(diào)節(jié)底物代謝對衰竭心肌代謝重構(gòu)的干預(yù)作用及相關(guān)機制研究[D].重慶：第三軍醫(yī)大學(xué)，2010.

[14]? Noordali H，Loudon BL，F(xiàn)renneaux MP，et al. Cardiac metabolism - A promising therapeutic target for heart failure [J]. Pharmacol Ther，2018，182（2）：95-114.

[15]? Peterzan MA，Lygate CA，Neubauer S，et al. Metabolic remodeling in hypertrophied and failing myocardium：a review [J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol，2017，313（3）：H597-H616.

[16]? Doenst T，Nguyen TD，Abel ED. Cardiac metabolism in heart failure：implications beyond ATP production [J]. Circ Res，2013，113（6）：709-724.

[17]? 邱英茹，張瑞英.心肌代謝重構(gòu)在慢性心力衰竭進(jìn)展中的作用[J].心血管病學(xué)進(jìn)展，2018，39（2）：205-209.

[18]? Hunter WG，Kelly JP，McGarrah RW 3rd，et al. Metabolomic Profiling Identifies Novel Circulating Biomarkers of Mitochondrial Dysfunction Differentially Elevated in Heart Failure With Preserved Versus Reduced Ejection Fraction：Evidence for Shared Metabolic Impairments in Clinical Heart Failure [J]. J Am Heart Assoc，2016，5（8）：e003190.

[19]? Bedi KC Jr，Snyder NW，Brandimarto J，et al. Evidence for Intramyocardial Disruption of Lipid Metabolism and Increased Myocardial Ketone Utilization in Advanced Human Heart Failure [J]. Circulation，2016，133（8）：706-716.

[20]? Lopaschuk GD，Ussher JR，F(xiàn)olmes CD，et al. Myocardial fatty acid metabolism in health and disease [J]. Physiol Rev，2010，90（1）：207-258.

[21]? 龐博，王斌，舒振波，等.慢性心功能衰竭患者尿液的代謝組學(xué)研究[J].分析化學(xué)，2017，45（8）：1165-1171.

[22]? 謝雅革，沈克平，盧艷琳，等.基于代謝組學(xué)的中醫(yī)血瘀證研究概述[J].中華中醫(yī)藥雜志，2019，34（6）：2598-2601.

[23]? 楊夢，胡思遠(yuǎn)，胡志希，等.基于“虛氣留滯”理論探討慢性心力衰竭的發(fā)病機理[J].環(huán)球中醫(yī)藥，2019，12（12）：1779-1782.

[24]? 李琪琳，張安晶，吳華芹，等.基于～1H-NMR技術(shù)研究心氣虛證心力衰竭模型大鼠尿液代謝組學(xué)變化[J].北京中醫(yī)藥，2013，32（12）：939-943.

[25]? 李欣春，梁昊，胡志希，等.高血壓心衰大鼠證候本質(zhì)及藥物干預(yù)研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2018，38（8）：853-857.

[26]? 鐘森杰，李欣春，李杰，等.心氣陰兩虛證心力衰竭大鼠血漿代謝組學(xué)研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2018，38（9）：981-985.

[27]? 曾瑞峰.基于反相高效液相的方法研究心衰心陽虛證患者血漿氨基酸指紋圖譜[D].廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2010.

[28]? 梁國榮.心衰心陽虛證血漿氨基酸（纈、苯丙、異亮、亮氨酸）代謝指紋圖譜研究[D].廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2011.

[29]? Wang J，Guo S，F(xiàn)ao K，et al. Plasma metabolomics combined with personalized diagnosis guided by Chinese medicine reveals subtypes of chronic heart failure [J]. Journal of Traditional Chinese Medical Sciences，2015，2（2）：80-90.

[30]? 劉玲玲.慢性心力衰竭氣虛血瘀證和陽虛水停證的尿液代謝組學(xué)研究[D].北京：中國中醫(yī)科學(xué)院，2014.

[31]? 王鵬軍.缺血性心力衰竭氣虛血瘀證和陽虛水停證生物學(xué)基礎(chǔ)及代謝組學(xué)研究[D].北京：中國中醫(yī)科學(xué)院，2013.

[32]? 王娟，趙慧輝，陳建新，等.慢性心力衰竭血瘀證患者血漿代謝物研究[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2016，39（2）：101-105.

[33]? 王娟.慢性心力衰竭中醫(yī)證候生物學(xué)診斷模式及代謝組學(xué)研究[D].北京：北京中醫(yī)藥大學(xué)，2012.

[34]? 陳靜.基于證候要素辨證治療慢性心衰的臨床療效評價及代謝組學(xué)研究[D].北京：北京中醫(yī)藥大學(xué)，2016.

[35]? McKirnan MD，Ichikawa Y，Zhang Z，et al. Metabolomic analysis of serum and myocardium in compensated heart failure after myocardial infarction [J]. Life Sci，2019， 221：212-223.

[36]? Moreira da Silva Guimar？觔es S，de Souza Cruz WM，de Souza Weigert G，et al. Decompensated Chronic Heart Failure Reduces Plasma L-carnitine [J]. Arch Med Res，2018，49（4）：278-281.

[37]? 張玉婷.慢性心力衰竭的中醫(yī)證候要素與心功能分級的關(guān)聯(lián)性研究[D].成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2018.

[38]? 陶秀梅.“腎陽虛”模型及證候的代謝組學(xué)研究[D].上海：上海交通大學(xué)，2009.

[39]? 鄭海生，蔣健.基于代謝組學(xué)慢性心力衰竭腎陽虛證代謝模式的研究[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2017，23（5）：645-647，695.

[40]? 趙琳琳，邱新建，李若夢，等.代謝組學(xué)在冠心病及中醫(yī)證候中應(yīng)用的研究進(jìn)展[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2018， 38（9）：1143-1147.

[41]? Cops J，Haesen S，De Moor B，et al. Current animal models for the study of congestion in heart failure： an overview [J]. Heart Fail Rev，2019，24（3）：387-397.

[42]? Janssen PML，Elnakish MT. Modeling heart failure in animal models for novel drug discovery and development [J].Expert Opin Drug Discov，2019，14（4）：355-363.

[43]? 劉姬艷，江婷婷，李繼承.中醫(yī)證候研究中蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的應(yīng)用進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥雜志，2016，31（1）：196-199.

[44]? 李思漢，李書楠，周福，等.關(guān)于中醫(yī)證候動物模型研究的思考[J].中華中醫(yī)藥雜志，2019，34（8）：3357-3361.

[45]? Hunter WG，Kelly JP，McGarrah RW 3rd，et al. Metabolic Dysfunction in Heart Failure： Diagnostic，Prognostic，and Pathophysiologic Insights From Metabolomic Profiling [J]. Curr Heart Fail Rep，2016，13（3）：119-131.

（收稿日期：2020-04-15）