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    樺褐孔菌多糖對(duì)乳酸菌發(fā)酵及酸奶品質(zhì)的影響

    2020-12-09 05:25:12楊晨芝郝靜丁霄吳欣怡曹嘯龍張澤張子軼陸婷婷趙文張楊林陳義勇
    中國(guó)乳品工業(yè) 2020年11期
    關(guān)鍵詞:孔菌乳清酸度

    楊晨芝,郝靜,丁霄,吳欣怡,曹嘯龍,張澤,張子軼,陸婷婷,趙文,張楊林,陳義勇

    (常熟理工學(xué)院生物與食品工程學(xué)院,江蘇常熟215500)

    0 引 言

    酸奶在發(fā)酵過(guò)程中保留了原乳的優(yōu)點(diǎn)及產(chǎn)生了諸如維生素等很多的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),具有促進(jìn)消化、提高免疫力以及維持腸道的菌群平衡等效果[1]。目前有學(xué)者在酸奶開(kāi)發(fā)過(guò)程中將一些多糖[2-8]應(yīng)用到酸奶的開(kāi)發(fā)中,研究發(fā)現(xiàn)多糖能夠促進(jìn)乳酸菌的發(fā)酵,使酸奶的穩(wěn)定性及保質(zhì)期進(jìn)一步提高[9]。

    近年來(lái),國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)樺褐孔菌多糖(Polysaccharides from Inonotus obliquus)的研究主要集中提取技術(shù)如高壓脈沖電場(chǎng)[10]、超聲波[11]、微波[12]等及生物活性如增強(qiáng)免疫、抗氧化[8]、抗腫瘤[9]等方面的研究,關(guān)于樺褐孔菌多糖對(duì)乳酸菌發(fā)酵及酸奶品質(zhì)的影響還未見(jiàn)報(bào)道。因此本研究以樺褐孔菌多糖為研究對(duì)象,研究樺褐孔菌多糖對(duì)乳酸菌酸奶發(fā)酵及其品質(zhì)的影響,旨在為樺褐孔菌多糖酸奶的研究開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。

    1 實(shí) 驗(yàn)

    1.1 材料與設(shè)備

    樺褐孔菌多糖,購(gòu)自西安普瑞斯生物工程有限公司;蛋白胨、葡萄糖、吐溫80、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、酚酞、氫氧化鈉,購(gòu)自江蘇強(qiáng)盛功能化學(xué)股份有限公司;發(fā)酵菌種,江蘇梁豐食品集團(tuán)有限公司提供;DHG-9030A 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱,上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司;DH600OII 電熱恒溫培養(yǎng)箱,天津市泰斯特儀器有限公司;LDZX-50KBS 立式高壓蒸汽滅菌器,上海申安醫(yī)療器械廠;pH 計(jì),瑞士METTLER TOLEDO 公司。

    1.2 方法

    1.2.1 樺褐孔菌多糖酸奶的制備

    將鮮奶置于玻璃瓶中,向鮮奶中添加6%的蔗糖,在65 ℃條件下水浴攪拌,然后分別添加0 、0.1%、0.2%、0.3%和0.4%的樺褐孔菌多糖,空白和每個(gè)添加量平行做3 個(gè),滅菌(95 ℃,10 min)后用蒸餾水冷卻至44 ℃左右,將發(fā)酵菌種以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.5% 的接種量接種于滅菌乳,于43 ℃恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵培養(yǎng)5 h后,然后將酸奶置于4 ℃ 冰箱中冷藏后熟待用。

    1.2.2 酸奶滴定酸度測(cè)定[13]

    取后熟24 h 的不同濃度的樺褐孔菌多糖酸奶10 g,然后加入蒸餾水(20 mL)混合均勻,再加入酚酞指示劑0.5 mL,用NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度為0.1mol /L)滴定至微紅色,保持30 s 內(nèi)不褪色,將消耗的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的毫升數(shù)乘以10,即得滴定酸度(吉爾涅爾度),連續(xù)7 d 做三次平行定時(shí)測(cè)定。

    1.2.3 酸奶乳酸菌活菌數(shù)測(cè)定[14]

    取后熟24 h 的不同多糖濃度的酸奶25 g,酸奶樣品加入225 mL 無(wú)菌生理鹽水至錐形瓶中混勻制成10-1的樣品均勻稀釋液,然后再用無(wú)菌移液管吸取1 mL 樣品均勻稀釋液(10-1)加入到滅菌生理鹽水(9 mL)的試管中混合均勻,制成10-2的樣品均勻稀釋液,再依次進(jìn)行類比稀釋,制備10 倍系列稀釋樣品勻液。分別選取10-6、10-7和10-8三個(gè)梯度的稀釋液0.2 mL,分別在MRS 固體培養(yǎng)基上涂布,然后在36 ℃條件下培養(yǎng)48 h 后計(jì)數(shù),做3 次平行測(cè)定。

    1.2.4 酸奶持水力測(cè)定[15]

    用天平精密稱取潔凈的干燥好的空的50 mL 離心管,質(zhì)量記為M;將10 g 后熟24 h 的不同多糖濃度酸奶置于50 mL 離心管中,并精確稱量其質(zhì)量記為M1;在4 ℃ 的條件下離心(轉(zhuǎn)速3 000 r/min,10 min),離心完畢后,靜置10 min,用移液槍吸取上清液,稱量總質(zhì)量記為M2,做三次平行測(cè)定。根據(jù)以下公式計(jì)算持水力:持水力=(M2-M)/(M1-M2)×100%。

    1.2.5 乳清析出率的測(cè)定[8]

    精確稱量后熟24 h 的不同多糖濃度的酸奶10 g置于50 mL 燒杯中,輕輕吸取酸奶表面析出的乳清并稱其質(zhì)量,析出乳清的質(zhì)量與酸奶質(zhì)量之比即為酸奶的乳清析出率。根據(jù)以下公式計(jì)算乳清析出率為

    乳清析出率= 析出乳清質(zhì)量(g)/酸奶質(zhì)量(g)×100%。

    1.2.6 酸奶感官分析

    對(duì)后熟24 h 的不同多糖濃度酸奶進(jìn)行感官品質(zhì)的評(píng)定。選擇20 位具有區(qū)分酸奶感官指標(biāo)之間細(xì)微差別能力的品評(píng)員,依靠觸覺(jué)、味覺(jué)、嗅覺(jué)及視覺(jué)分別從組織狀態(tài)、口感、滋味以及色澤等方面來(lái)鑒定酸奶的外觀形態(tài)、色澤氣味、硬度等,按照表1 的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分。滿分為100 分,得到的最終分?jǐn)?shù)為20 位品評(píng)員感官分?jǐn)?shù)的平均值。

    1.3 數(shù)據(jù)分析

    采用SAS 軟件AVOVA(P<0.05)程序進(jìn)行顯著性分析,Dunc a n程序進(jìn)行多重比較。

    表1 酸奶品質(zhì)的感官評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

    2 結(jié)果與討論

    2.1 樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶滴定酸度的影響

    樺褐孔菌多糖對(duì)滴定酸度的影響結(jié)果如圖1 所示。由圖1可以看出,連續(xù)7 d添加不同濃度樺褐孔菌多糖后,酸奶的滴定酸度均高于70 °T,符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。第1天酸奶的滴定酸度差異較小,樺褐孔菌多糖酸奶貯藏第2天至第7 天,滴定酸度有一定程度的提高,與空白對(duì)照組酸奶相比,發(fā)現(xiàn)樺褐孔菌多糖酸奶在后熟過(guò)程中滴定酸度變化趨勢(shì)緩慢,低于空白對(duì)照組(P<0.05)。當(dāng)樺褐孔菌多糖添加量為0.2% 時(shí),樺褐孔菌多糖酸奶的滴定酸度上升趨勢(shì)最為緩慢和穩(wěn)定,說(shuō)明樺褐孔菌多糖在一定程度上能抑制發(fā)酵劑的發(fā)酵產(chǎn)酸,有利于提高酸奶的品質(zhì)及延長(zhǎng)酸奶的貨架期。

    圖1 樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶滴定酸度的影響

    2.2 樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶乳酸菌活菌數(shù)的影響

    乳酸菌有利于改善腸道的菌群環(huán)境,抑制腐敗微生物的生長(zhǎng)繁殖,是檢驗(yàn)酸奶品質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo)。樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶乳酸菌活菌數(shù)的影響結(jié)果如表2所示。由表2 可以看出,與未添加樺褐孔菌多糖對(duì)照組相比,添加樺褐孔菌多糖發(fā)酵的酸奶乳酸菌活菌數(shù)均有明顯的增加(P<0.05),并且隨著樺褐孔菌多糖添加量的增加,乳酸菌的活菌數(shù)表現(xiàn)為先增高后降低的趨勢(shì),當(dāng)樺褐孔菌多糖添加量達(dá)到0.2% 時(shí),乳酸菌的活菌數(shù)達(dá)到峰值,繼續(xù)增大樺褐孔菌多糖的添加量,乳酸菌活菌數(shù)呈下降并逐漸平穩(wěn)趨勢(shì),原因可能是適量的多糖能夠促進(jìn)乳酸菌更好的利用酸奶中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),過(guò)量的多糖導(dǎo)致酸奶中的水分活度下降,進(jìn)而對(duì)乳酸菌的生長(zhǎng)繁殖產(chǎn)生不利的影響[1]。乳酸菌能夠抑制腐敗菌的生長(zhǎng),進(jìn)而改善腸道的菌群環(huán)境,因此適量添加樺褐孔菌多糖酸奶更有利于人體的健康。

    表2 樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶乳酸菌活菌數(shù)的影響

    2.3 樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶持水力的影響

    樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶持水力的影響如圖2 所示。由圖2 可以看出,當(dāng)樺褐孔菌多糖添加量增加時(shí),酸奶的持水力先上升后下降,但卻始終顯著高于空白對(duì)照組酸奶的持水力。當(dāng)樺褐孔菌多糖添加量為0.2%時(shí),酸奶的持水力最高達(dá)到83%,酸奶品質(zhì)最佳。當(dāng)樺褐孔菌多糖的添加量超過(guò)0.2%后,酸奶的持水力隨樺褐孔菌多糖添加量的增加而降低,這可能是由于酸奶的持水力受酸奶內(nèi)總固形物及蛋白質(zhì)含量變化的影響。因此,樺褐孔菌多糖的添加有利于增加酸奶的穩(wěn)定性,提升酸奶組織形態(tài),改善酸奶的品質(zhì)。

    圖2 樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶持水力的影響

    2.4 樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶乳清析出率的影響

    乳清的析出率可以衡量酸奶的穩(wěn)定性及組織狀態(tài),品質(zhì)良好的酸奶具有均勻、無(wú)氣泡產(chǎn)生及乳清的析出極少甚至于沒(méi)有的優(yōu)點(diǎn)。樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶乳清析出率的影響結(jié)果見(jiàn)圖3。由圖3 可知,與空白組對(duì)比,樺褐孔菌多糖酸奶的乳清析出率均低于空白組,隨著樺褐孔菌多糖添加量的增加,酸奶的乳清析出率逐步下降,當(dāng)樺褐孔菌多糖的添加量為0.2% 時(shí),酸奶的乳清析出率最低,達(dá)到5.3%。當(dāng)樺褐孔菌多糖的添加量大于0.2% 時(shí),酸奶的乳清析出率進(jìn)一步增加,說(shuō)明適量添加樺褐孔菌多糖可以減少酸奶的乳清的析出,添加過(guò)量樺褐孔菌多糖會(huì)增加酸奶乳清的析出,這可能是由于過(guò)量的樺褐孔菌多糖破壞了酸奶中成分,使其無(wú)法相互作用,降低了酸奶品質(zhì)的穩(wěn)定性[16]。

    2.5 樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶感官的影響

    圖3 樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶乳清析出率的影響

    圖4 樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶感官的影響

    樺褐孔菌多糖對(duì)酸奶感官的影響見(jiàn)圖4。由圖4可知,當(dāng)樺褐孔菌多糖添加量增加時(shí),酸奶的感官評(píng)分表現(xiàn)為先上升后降低的趨勢(shì)。與空白對(duì)照組相比,樺褐孔菌多糖添加量在0.2%~0.3%范圍內(nèi),酸奶的感官評(píng)分明顯高于空白對(duì)照組(P<0.05,P<0.01),當(dāng)樺褐孔菌多糖添加量為0.2%時(shí),感官評(píng)分最高,酸奶口感稠厚,酸味適中,有濃郁發(fā)酵乳氣味,無(wú)不良凝結(jié)塊,組織均勻,黏稠度、柔滑度適宜,酸奶品質(zhì)最佳。樺褐孔菌多糖添加量大于0.3%時(shí),酸奶的感官評(píng)分與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05),由此可知,樺褐孔菌多糖在一定的范圍內(nèi)可以顯著改善酸奶的風(fēng)味、口感、色澤及組織狀態(tài),但超過(guò)一定的范圍會(huì)使酸奶質(zhì)地分離,影響發(fā)酵凝乳情況,影響產(chǎn)品感官品質(zhì),原因可能是過(guò)量的多糖與酸奶中的其他成分相互作用產(chǎn)生部分顆粒,導(dǎo)致口感變差[1]。

    3 結(jié) 論

    本研究以樺褐孔菌多糖為研究對(duì)象,以酸奶滴定酸度、乳酸菌活菌數(shù)、持水力、乳清析出率、感官特性等指標(biāo),探討樺褐孔菌多糖對(duì)乳酸菌酸奶的發(fā)酵及其品質(zhì)的影響,結(jié)果表明,添加適量的樺褐孔菌多糖在一定程度上能抑制發(fā)酵劑的發(fā)酵產(chǎn)酸,有利于提高酸奶的品質(zhì)及延長(zhǎng)酸奶的貨架期,促進(jìn)乳酸菌的增殖,提高酸奶的持水力,增加酸奶的穩(wěn)定性,減少酸奶的乳清的析出,顯著改善酸奶的風(fēng)味、口感、色澤及組織狀態(tài)等感官品質(zhì),綜合酸奶的乳酸菌活菌數(shù)、持水力、乳清析出率、感官品質(zhì)等指標(biāo),樺褐孔菌多糖添加量為0.2%時(shí),可以有效促進(jìn)酸奶中乳酸菌的生長(zhǎng)、提升酸奶的品質(zhì)。

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