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    復(fù)方烏鱧口服液對(duì)產(chǎn)后抑郁癥模型大鼠行為學(xué)的影響

    2020-12-09 11:03:04何清林田翔宇楊玉奇
    實(shí)用中醫(yī)藥雜志 2020年9期
    關(guān)鍵詞:母鼠烏鱧抗抑郁

    何 娜,魏 云,何清林,聶 晶,田翔宇,羅 維,楊玉奇

    (1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)2017級(jí)在職碩士研究生,湖南 長(zhǎng)沙 410128;2.湖南醫(yī)藥工業(yè)研究所,湖南 長(zhǎng)沙 410013;3.明瑞制藥有限公司,湖南 瀏陽(yáng) 410331;4湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司,湖南 長(zhǎng)沙 410013)

    復(fù)方烏鱧口服液是由鮮烏鱧、黃芪、大棗等組成,主要用于促進(jìn)創(chuàng)傷、外科手術(shù)、分娩后的傷口愈合及傷后頭面虛腫、心悸氣短、神疲自汗等癥。臨床應(yīng)用發(fā)現(xiàn)其對(duì)分娩后情緒郁悶癥有一定療效[1-2]。本實(shí)驗(yàn)探討了復(fù)方烏鱧口服液抗抑郁的藥效作用及機(jī)制,報(bào)道如下。

    1 材料與方法

    藥物:復(fù)方烏鱧口服液,規(guī)格10mL/支,生藥含量為1.062g/mL,批號(hào)160109,由湖南明瑞制藥有限公司提供。鹽酸帕羅西汀片,規(guī)格20mg/片,由浙江尖峰藥業(yè)有限公司提供,批號(hào)150101。地塞米松磷酸鈉注射液,規(guī)格1mL∶5mg,濟(jì)南利民制藥有限責(zé)任公司,批號(hào)15120602-1。

    動(dòng)物:受孕SD大鼠,60只,250~280g,SPF級(jí),由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供,飼養(yǎng)于SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)室,溫度20℃~26℃,濕度40%~70%。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)為No.43004700015835。

    儀器與試劑:DNM-9606酶標(biāo)分析儀,北京普朗新技術(shù)有限公司。5-HT檢測(cè)試劑盒,由Cusabio提供,批號(hào)C0969790372。

    方法:將60只受孕大鼠隨機(jī)分為6組,分為對(duì)照組,模型組,陽(yáng)性對(duì)照組,復(fù)方烏鱧口服液低劑量組、中劑量組、高劑量組,獨(dú)籠飼養(yǎng)。除對(duì)照組外,其余各組大鼠自受孕第1天起,皮下注射,注射用水1mL/kg;至受孕成功第15天開始,皮下注射地塞米松磷酸鈉0.2mg/kg,直到產(chǎn)崽。產(chǎn)崽后繼續(xù)給藥,模型組用蒸餾水,陽(yáng)性對(duì)照組用鹽酸帕羅西汀3.6mg/kg,復(fù)方烏鱧口服液低、中、高劑量組用1.8、3.6、7.2mL/kg,連續(xù)給藥15天。產(chǎn)后4天觀察母愛行為(噙崽潛伏期、集窩時(shí)間、舔崽時(shí)間、噙崽頻率),產(chǎn)后10天進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)(活動(dòng)性及興趣性),產(chǎn)后12天進(jìn)行懸尾實(shí)驗(yàn)(絕望不動(dòng)持續(xù)時(shí)間),產(chǎn)后15天進(jìn)行強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(自救持續(xù)時(shí)間、絕望不動(dòng)持續(xù)時(shí)間),產(chǎn)后22天,母鼠腹主動(dòng)脈取血,采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)5-HT含量。

    檢測(cè)指標(biāo)[3-4]:①關(guān)愛行為:于分娩后的第4天,母鼠給藥1h后,將幼鼠分散于鼠籠四角,母鼠置于鼠籠中央,在鼠籠正上方100 cm處懸掛攝像機(jī)進(jìn)行記錄,記錄每只母鼠關(guān)愛幼崽行為。噙崽潛伏期,母鼠噙起第1只幼鼠的時(shí)間;集窩時(shí)間,母鼠將所有幼鼠集中的時(shí)間;舔崽時(shí)間,母鼠用舌頭舔或頭部在幼鼠頭背和肛門生殖器周圍持續(xù)3s以上的總時(shí)間;噙崽頻率,母鼠噙起幼鼠的總次數(shù)。②曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn):于分娩后的第10天,母鼠給藥1h后,用自制OPEN-FIELD敞箱。四周箱壁為黑色,底面用黑線均勻劃分為相等面積的25塊方格。以動(dòng)物穿越方格數(shù)作為水平活動(dòng)的得分,以直立次數(shù)為垂直活動(dòng)得分。每只動(dòng)物僅測(cè)定1次,每次3min。每次測(cè)試前保持敞箱內(nèi)干凈。曠場(chǎng)試驗(yàn)水平運(yùn)動(dòng)的得分反映大鼠的活動(dòng)性,垂直活動(dòng)的得分則反映大鼠的興趣性。③懸尾實(shí)驗(yàn):于分娩后的第12天,末次給藥1h后,距大鼠尾尖部約1cm處用膠布貼于懸尾箱支架上,使大鼠成倒掛狀態(tài),其頭部離箱底約10cm,1次懸掛1只大鼠。懸掛時(shí)間為6min,記錄大鼠4min內(nèi)懸尾累積不動(dòng)時(shí)間。④強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn):于分娩后的第15天,末次給藥1h后,在約60cm高的水桶內(nèi)放人約30cm高度的37℃溫水,距離桶上方100cm處懸掛攝像機(jī)進(jìn)行記錄。大鼠持續(xù)游泳力竭后繼續(xù)觀察6min,記錄游泳不動(dòng)時(shí)間,即大鼠只在水中做少量輕微擺動(dòng)保持頭部不下沉的時(shí)間。⑤血清5-HT含量測(cè)定:各組動(dòng)物繼續(xù)給藥7天后,母鼠腹主動(dòng)脈取血,采用酶聯(lián)免疫法,用ELISA試劑盒檢測(cè)5-HT含量。

    統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以(±s)表示,用SPSS17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.01為差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    各組關(guān)愛幼崽行為比較見表1。與對(duì)照組比較,模型組母鼠噙崽潛伏期明顯增加,集窩時(shí)間顯著增加,舔崽時(shí)間明顯減少,噙崽頻率顯著降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.01);與模型組比較,復(fù)方烏鱧口服液低、中、高劑量組噙崽潛伏期、集窩時(shí)間、舔崽時(shí)間、噙崽頻率有不同程度的改善作用,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    表1 各組關(guān)愛幼崽行為比較 (±s ,n=10)

    表1 各組關(guān)愛幼崽行為比較 (±s ,n=10)

    注:與對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01;與模型組比較,#P<0.05。

    噙崽頻率(次/30min)對(duì)照組 - 14.61±2.91 12.08±3.49 62.08±23.84 17.60±5.40模型組 - 17.91±2.99*18.12±5.24**46.04±11.92*10.50±3.17**低劑量組 1.8 17.04±2.87 15.95±4.61 50.65±13.11 13.40±5.54中劑量組 3.6 14.97±3.19#14.50±4.19 50.88±13.17 16.20±6.25#高劑量組 7.2 14.80±3.26#14.08±4.07#55.35±14.38 16.50±6.10#陽(yáng)性對(duì)照組 3.6mg/kg 14.78±3.04#13.90±4.02#55.39±14.34 16.40±7.00#組別 劑量(mL/kg)噙崽潛伏期(s)集窩時(shí)間(min)舔崽時(shí)間(s)

    各組抗抑郁作用比較見表2。與對(duì)照組比較,模型組母鼠活動(dòng)性顯著減少,興趣性有降低趨勢(shì),懸尾和游泳絕望不動(dòng)時(shí)間明顯增加,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.01);與模型組比較,復(fù)方烏鱧口服液低、中、高劑量組活動(dòng)性、興趣性、懸尾和游泳絕望不動(dòng)時(shí)間有不同程度的改善作用,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    表2 各組抗抑郁作用比較 (±s ,n=10)

    表2 各組抗抑郁作用比較 (±s ,n=10)

    注:與對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01;與模型組比較,#P<0.05。

    游泳絕望不動(dòng)時(shí)間(min)對(duì)照組 - 50.60±14.12 17.00±6.99 2.22±0.57 2.47±0.38模型組 - 33.40±16.95**12.70±3.92 2.72±0.62* 2.93±0.42*低劑量組 1.8 44.60±10.67 13.60±4.38 2.45±0.42 2.70±0.43中劑量組 3.6 45.00±11.71 14.30±4.52 2.44±0.33 2.54±0.39#高劑量組 7.2 45.80±11.69#15.20±5.01 2.22±0.75# 2.61±0.37陽(yáng)性對(duì)照組 3.6 mg/kg 45.90±12.42#16.10±8.23 2.19±0.44# 2.49±0.41#組別 劑量(mL/kg)活動(dòng)性(格/3min)興趣性(次/3min)懸尾絕望不動(dòng)時(shí)間(min)

    各組對(duì)母鼠血清5-羥色胺含量影響的比較見表3。與對(duì)照組比較,模型組母鼠5-HT濃度明顯降低(P<0.05)。與模型組比較,復(fù)方烏鱧口服液低、中、高劑量組母鼠5-HT濃度有不同程度的改善作用,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    表3 各組對(duì)母鼠血清5-HT含量影響的比較 (±s ,n=10)

    表3 各組對(duì)母鼠血清5-HT含量影響的比較 (±s ,n=10)

    注:與對(duì)照組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05。

    組別 劑量(mL/kg) 5-HT(ng/mL)對(duì)照組 - 6.81±2.50模型組 - 4.49±1.62*低劑量組 1.8 5.09±1.84中劑量組 3.6 5.69±2.06高劑量組 7.2 6.45±2.41#陽(yáng)性對(duì)照組 3.6mg/kg 6.52±2.42#

    3 討 論

    PPD主要表現(xiàn)為焦慮、激動(dòng)、悲傷、沮喪、哭泣、失眠和意識(shí)錯(cuò)亂,甚至出現(xiàn)幻覺和自殺傾向。抑郁癥屬中醫(yī)“郁證”“癲”等范疇。多因脾腎兩虛,肝氣郁結(jié),血?dú)饽郎氖B(yǎng),腦失所調(diào),進(jìn)而發(fā)?。?-4]。西醫(yī)認(rèn)為PPD病因與5-HT含量降低有關(guān),治療抑郁癥的藥物以5-HT作用的靶點(diǎn),主要通過增加單胺類遞質(zhì)的濃度、增強(qiáng)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的功能而起到抗抑郁作用[5-10]。

    復(fù)方烏鱧口服液由烏鱧、黃芪、大棗等組成,具有補(bǔ)血補(bǔ)氣及促進(jìn)傷口愈合的作用。方中烏鱧具有促進(jìn)傷口愈合、抗炎、殺菌等作用,黃芪具有增強(qiáng)免疫功能作用。Saleem A M等[11]研究發(fā)現(xiàn)烏鱧魚片水提物具有明顯抗抑郁作用。韓曉蕾等[12]研究證明黃芪能夠降低小鼠抑郁反應(yīng),提高抑郁癥小鼠血清5-HT含量。研究表明,復(fù)方烏鱧口服液能夠使PPD母鼠抑郁行為減輕,同時(shí)能夠使母鼠血清5-HT含量提高,提示復(fù)方烏鱧口服液具有一定的抗抑郁作用。

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