口腔扁平苔蘚癌變生物標(biāo)記物的研究進(jìn)展

薛曉寒 周 陽(yáng) 李 琛 高 旭 魏秀峰

口腔扁平苔蘚（OLP）是一種口腔黏膜慢性炎性疾病，臨床上表現(xiàn)為白色紋狀或斑塊狀，主要位于頰黏膜和舌[1]。WTO 已把OLP 定為口腔黏膜潛在惡性疾患[2]。最近的一項(xiàng)Meta 分析顯示約1.1%的OLP會(huì)發(fā)生癌變，其中吸煙者，酗酒者及感染丙型肝炎病毒的人群癌變率較高[3]。大量研究表明糜爛型OLP最易癌變，而舌是最常癌變的部位。組織學(xué)上判斷OLP 癌變的標(biāo)準(zhǔn)是根據(jù)是否具有上皮異常增生，但這一標(biāo)準(zhǔn)具有一定的主觀性，本文就將OLP 癌變預(yù)測(cè)標(biāo)記物做一綜述，為臨床癌變預(yù)防和早期診斷提供一定的理論依據(jù)和指導(dǎo)。

一、細(xì)胞凋亡相關(guān)的標(biāo)記物

1.p53：p53 是位于17 號(hào)染色體上的主要腫瘤抑制基因，編碼p53 蛋白。該蛋白可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，細(xì)胞周期停滯，細(xì)胞凋亡和衰老等過(guò)程受p53活化的控制[4]。p53 基因突變后，由于其空間構(gòu)象發(fā)生改變，失去對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡的調(diào)控作用，p53 基因就由抑癌基因轉(zhuǎn)變?yōu)榘┗?，這種突變的積累可能誘導(dǎo)OLP 癌變。Atena Shiva 研究發(fā)現(xiàn)糜爛型OLP中p53 陽(yáng)性細(xì)胞的平均百分比顯著高于非糜爛型OLP 和正常黏膜，提出p53 的高表達(dá)可用于鑒定具有癌變趨勢(shì)的OLP 病變[5]。

2.Bcl-2/Bax：B 淋巴細(xì)胞瘤 -2 基因（B-cell lymphoma-2，Bcl-2） 家族可分為 Bcl-2 亞族及Bcl-2 相關(guān) X 蛋白 （Bcl-2 associated X protein，Bax）亞族[6]。T 細(xì)胞 Bcl-2 與基底細(xì)胞 Ki－67 的表達(dá)密切相關(guān)，Bcl-2 抗T 細(xì)胞凋亡會(huì)誘發(fā)基底細(xì)胞Ki－67 過(guò)表達(dá)，使基底細(xì)胞大量增殖，因此Bcl-2被認(rèn)為是參與構(gòu)成OLP 惡變的分子基礎(chǔ)。而當(dāng)Bax過(guò)表達(dá)，細(xì)胞接受死亡誘導(dǎo)信號(hào)后，Bax 與Bcl-2結(jié)合形成二聚體，中和Bcl-2 抗凋亡的作用，二者相互作用參與OLP 的癌變。G.Shailaja 研究發(fā)現(xiàn)正常黏膜中Bcl-2 的表達(dá)與OLP 相比顯著降低，Bcl-2過(guò)表達(dá)可引起OLP 的惡變，可將其列為OLP 癌變的預(yù)測(cè)標(biāo)記物[7]。研究表明Bcl-2、Bax 在OLP 中表達(dá)均較高，其表達(dá)增高可能與OLP 病情惡化有關(guān)[8]，提示Bcl-2、Bax 可能是OLP 惡變的預(yù)測(cè)標(biāo)記物。

3.Survivin：Survivin 是凋亡抑制因子（inhibitor of apoptosis proteins，IAPs）家族的成員，通過(guò)抑制細(xì)胞凋亡和調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂，在癌發(fā)生中起著重要作用[9]。Survivin 參與癌變的多種分子機(jī)制，其中之一是Survivin 能與含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（cysteinyl aspartate specific proteinase，caspase）9，caspase 3，caspase7 結(jié)合并對(duì)其有抑制作用，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡阻滯。此外Survivin 通過(guò)阻斷半胱天冬酶來(lái)抑制鼠雙微基因（murine double minute2，MDM2）切割，從而增強(qiáng)p53 的降解，誘導(dǎo)癌變的發(fā)生[10]。最近的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)Survivin 在OLP 和OSCC 中高表達(dá)，且OSCC 比OLP 表達(dá)更高，而在正常黏膜幾乎不表達(dá)，提示Survivin 在OLP 向OSCC 轉(zhuǎn)變的過(guò)程中可能起重要作用，導(dǎo)致OLP 惡性轉(zhuǎn)化風(fēng)險(xiǎn)增加[11]。

4.Mcl-1：髓樣細(xì)胞白血病-1（myeloid cell leukemia-1，Mcl-1）蛋白是Bcl-2 蛋白家族中重要的抗凋亡蛋白成員之一。Mcl-1 能夠與促凋亡蛋白Bak 結(jié)合形成異二聚體，阻斷凋亡信號(hào)的傳遞，從而導(dǎo)致細(xì)胞的增殖失控，介導(dǎo)癌變的發(fā)生[12]。研究表明OLP 的惡性潛能可能與Mcl-1 的表達(dá)有關(guān)，而Mcl-1 的下調(diào)可能阻止OLP 惡變?yōu)镺SCC[13]。

二、遺傳相關(guān)的標(biāo)記物

1.microRNA：microRNA（miRNA）是一組短的非編碼RNA，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)，增殖，凋亡，分化等。大量研究證實(shí)了miRNA 在腫瘤的發(fā)生，侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用[14]。Aghbari SMH 等發(fā)現(xiàn)與健康者相比，OLP 患者組織和唾液中miRNA 27b 和miRNA 137 表達(dá)下調(diào); 且糜爛型OLP 組織和唾液中miRNA 27b 和miRNA 137 表達(dá)最低。提示miRNA 27b 和 miRNA 137 可作為預(yù)測(cè) OLP 惡變潛能的標(biāo)記物[15]。Mehdipour M 研究發(fā)現(xiàn)與健康者相比，OLP，發(fā)育異常的OLP 和OSCC 患者的唾液樣本中miR-21 水平依次增加。相反，與健康者相比，OLP，發(fā)育異常的OLP 和 OSCC 中 miR-125a 水平依次降低。表明miR-125a 表達(dá)降低以及miR-21 增加的OLP 患者預(yù)后不良[16]。

2.微核：微核（micronucleus，MCN）是核分裂過(guò)程中與主核分離的結(jié)構(gòu)，分裂末期不能進(jìn)入主核，在細(xì)胞胞漿中形成直徑小于主核的圓形或橢圓形微小核。MCN 在口腔脫落細(xì)胞中被多種物質(zhì)誘導(dǎo)，包括煙草，檳榔和酒精中的基因毒物和致癌化合物。研究發(fā)現(xiàn)與正常個(gè)體相比，OLP 中微核和微核細(xì)胞頻率顯著增加，且糜爛和潰瘍型OLP 頻率更高，口腔細(xì)胞微核測(cè)定可提供一個(gè)鑒定高風(fēng)險(xiǎn)OLP 平臺(tái)[17]。

3.LOH：雜合性缺失（loss of heterozygosity，LOH）是指位于一對(duì)同源染色體的兩個(gè)等位基因的一個(gè)發(fā)生缺失。某些腫瘤抑制基因的一對(duì)等位基因中的1 個(gè)失活會(huì)有致癌作用，多項(xiàng)研究表明腫瘤抑制基因的LOH 可能是口腔癌前病變進(jìn)展為OSCC的預(yù)測(cè)因子[18]。Brent T.Accurso 研究發(fā)現(xiàn)3 個(gè)腫瘤抑制基因位點(diǎn)（3p14.2，9p21 和 17p13） 的 LOH 在OLP、上皮異常增生和OSCC 中的發(fā)生率依次顯著增高[19]。

三、腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物

1.Bmi-1：B 細(xì)胞特異的莫洛尼白血病毒插入位點(diǎn) 1 基 因 （B cell- specific Moloney murine leukemia virus integration site1，Bmi-1）是一種多梳組蛋白和腫瘤干細(xì)胞因子，參與細(xì)胞增殖，并在干細(xì)胞的自我更新中發(fā)揮作用。Bmi-1 敲低能夠增加幾種腫瘤抑制miRNA 的表達(dá)，從而抑制癌細(xì)胞的侵襲，遷移和增殖[20]。Ma L 等研究發(fā)現(xiàn)Bmi-1 在正常口腔黏膜中不表達(dá)，而在癌變OLP 中的表達(dá)顯著高于未癌變OLP，在OSCC 中則100%陽(yáng)性表達(dá)。多變量分析顯示，Bmi-1 陽(yáng)性表達(dá)的OLP 患者惡變風(fēng)險(xiǎn)顯著高于Bmi-1 陰性患者[21]。

2.ABCG2：ATP 結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 G2（ATP-binding cassette super-family G member 2，ABCG2）又稱乳腺癌耐藥蛋白，是ATP 結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（ABC）的成員之一，也是一種腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物?？梢员贸黾?xì)胞內(nèi)的化療藥物而產(chǎn)生抗藥性，導(dǎo)致抗腫瘤藥物功效的降低[22]。Shi P 等通過(guò)檢測(cè)未癌變OLP 患者和癌變OLP 患者的組織，發(fā)現(xiàn)ABCG2 在癌變OLP 中表達(dá)顯著高于未癌變OLP，表明ABCG2 在OLP 中的表達(dá)與惡變風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)[23]。

3.ALDH1： 乙 醛 脫 氫 酶 1（acetaldehyde dehydrogenase1，ALDH1）作為乙醛脫氫酶家族的成員之一，是一種腫瘤干細(xì)胞分子標(biāo)記物，表達(dá)ALDH1 的癌細(xì)胞具有自我更新，高增殖和高克隆能力[24]。研究發(fā)現(xiàn)非網(wǎng)狀（糜爛/潰瘍）OLP 組中的ALDH1 表達(dá)顯著高于網(wǎng)狀OLP，由于潰瘍型和糜爛型OLP 的惡變率更高，表明ALDH1 的表達(dá)與OLP的惡變有關(guān)?？赡艿臋C(jī)制是活性氧、活性氮的產(chǎn)生與抗氧化系統(tǒng)之間的不平衡引起的氧化應(yīng)激可能有致癌作用。而糜爛型OLP 的氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過(guò)氧化增加，因?yàn)榛钚匝踉谥|(zhì)過(guò)氧化中會(huì)產(chǎn)生醛，所以醛消除是氧化應(yīng)激保護(hù)機(jī)制的一部分，ALDH1 可減少由醛引起的氧化應(yīng)激。因此，非網(wǎng)狀OLP 中較高的ALDH1 水平可能是抵抗氧化應(yīng)激的防御機(jī)制[25]。

四、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子

1.p16 和 CDK4：p16 是一種抑癌基因，是細(xì)胞周期的負(fù)調(diào)節(jié)因子，可使細(xì)胞周期停滯，p16 失活有助于癌癥進(jìn)展[26]。CDK4 是周期蛋白依賴性激酶（cyclin-dependent kinases，CDK）蛋白家族中的一種，CDK4 和CDK6 與細(xì)胞周期蛋白D1 結(jié)合形成復(fù)合物，其通過(guò)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白（retinoblastoma protein，pRb）的磷酸化促進(jìn)細(xì)胞從G1 期轉(zhuǎn)化到S期，從而加快細(xì)胞增殖[27]。p16 蛋白與CDK4 或CDK6的特異性結(jié)合誘導(dǎo)這些蛋白質(zhì)的變構(gòu)構(gòu)象變化，并抑制細(xì)胞周期蛋白D1-CDK4-CDK6 復(fù)合物的形成，缺乏這種復(fù)合物會(huì)抑制pRb 的磷酸化，誘導(dǎo)G1期細(xì)胞周期停滯[28]。p16 誘導(dǎo)的細(xì)胞停滯或衰老可能是阻止OLP 上皮細(xì)胞發(fā)生癌變的機(jī)制之一。Goel等人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，與正常黏膜相比，OLP 患者p16 和CDK4 的表達(dá)顯著增加。然而，與OSCC 相比，OLP中p16 和CDK4 的表達(dá)較低。p16 和CDK4 的過(guò)表達(dá)可能提示OLP 的惡變潛能大[29]。

2.Ki-67： 細(xì) 胞 增 殖 核 抗 原 Ki-67（nuclcar-associated antigen Ki-67，Ki-67）是一種非組蛋白核蛋白，在整個(gè)細(xì)胞周期中合成，除了G0期，可反映細(xì)胞的增殖狀況，也可判斷癌細(xì)胞的活躍程度[30]。細(xì)胞增殖是組織惡性轉(zhuǎn)化的基礎(chǔ)，所以細(xì)胞增殖蛋白可能參與OLP 的癌變。Pigatti FM 等發(fā)現(xiàn)Ki-67 在OLP 患者與中度或嚴(yán)重上皮異常增生的白斑中高表達(dá)，而在正常黏膜表達(dá)較低。這些結(jié)果表明，上皮中細(xì)胞增殖速率的增加可能代表OLP 癌變潛能的基礎(chǔ)，Ki-67 可被認(rèn)為是具有惡性潛能的病變中增殖活性的標(biāo)記物[31]。

五、其他相關(guān)標(biāo)記物

VEGF 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是一種促血管生成蛋白，也是病理性血管生成的主要原因，從而導(dǎo)致炎癥和腫瘤的發(fā)生發(fā)展[32]。OLP 中VEGF 過(guò)表達(dá)會(huì)加快血管生成，從而促進(jìn)淋巴細(xì)胞聚集和炎性浸潤(rùn)及疾病進(jìn)展。Suchita Sheelam 研究發(fā)現(xiàn)從正?？谇火つは騉LP，口腔黏膜下纖維化（oral submucous fibrosis，OSF）和OSCC 過(guò)渡期間，VEGF 的表達(dá)顯著上調(diào)。表明VEGF可能與OLP 及OSF 的癌變存在密切聯(lián)系[33]。

綜上，雖然OLP 癌變率很低，但它仍是一種具有癌變潛能的疾病，需對(duì)患者進(jìn)行充分監(jiān)測(cè)，以防止癌變。組織活檢可對(duì)OLP 診斷明確，但無(wú)法對(duì)OLP癌變進(jìn)行早期預(yù)測(cè)。而生物標(biāo)記物有助于早期檢測(cè)組織學(xué)上未觀察到的改變，可用于OLP 的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和癌變監(jiān)測(cè)。