PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在肝細(xì)胞癌患者中的表達(dá)及診斷價(jià)值研究

黃創(chuàng)新 李崢嶸

廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心有限公司合作與共建支持部，廣東省廣州市 510000

肝癌是臨床上常見的惡性腫瘤之一，位居全球常見癌癥第5位，死亡率卻位居癌癥死因第2位[1]。肝細(xì)胞癌(HCC)占肝癌的85%～90%[2]。HCC起病隱匿，進(jìn)展迅速，大多數(shù)患者就診時(shí)已經(jīng)處于中晚期，失去最佳根治性手術(shù)機(jī)會，病死率高。HCC患者5年生存率不足20%，復(fù)發(fā)率高達(dá)70%，主要的原因就是缺乏早期有效的診斷及治療手段[3]。因此，早診斷、早治療對提高HCC患者療效、延長生存期尤為重要。血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物由于創(chuàng)傷小、方便快捷而被認(rèn)為是早期理想診斷指標(biāo)。異常凝血酶原復(fù)合物(PIVKA-Ⅱ)作用于許多信號通路，在HCC的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用[4]；高爾基體糖蛋白73(GP73)是分布于高爾基體的Ⅱ型跨膜糖蛋白，其異常表達(dá)是肝癌發(fā)生敏感而有價(jià)值的標(biāo)志物[5]；甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3)為肝癌細(xì)胞特異度表達(dá)，與甲胎蛋白相比具有更高的靈敏度和特異度[6]。本文主要探討 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在HCC患者中的表達(dá)及診斷價(jià)值，并分析其與肝細(xì)胞癌患者不同病理特征的相關(guān)性，旨在為HCC的早期診斷和病情判斷提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采用回顧性方法，收集2020年1月—2021年6月本院收治的106例肝細(xì)胞癌患者作為肝癌組，其中男62例，女44例，年齡35～70歲，平均年齡(57.1±8.8)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)初次確診且未經(jīng)治療；(2)符合《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2019年版)》[7]中肝細(xì)胞癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(3)臨床資料完整，依從性高，簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾??；(2)合并嚴(yán)重心腦血管疾??；(3)合并其他惡性腫瘤或既往惡性腫瘤史；(4)嚴(yán)重肝、腎功能不全。另收集100例肝硬化患者作為肝硬化組，其中男59例，女41例，年齡35～70歲，平均年齡(57.4±9.0)歲。同期收集體檢中心健康體檢者100例作為對照組，其中男59例，女41例，年齡35～70歲，平均年齡(56.8±8.7)歲。三組年齡、性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，三組具有可比性。本研究符合倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)備案。

1.2 檢測方法 所有觀察對象空腹8h以上，于第2日早晨8點(diǎn)左右抽取靜脈血3ml，注入紅色干燥試管，顛倒混勻數(shù)次后靜置30min。然后以3 000r/min的轉(zhuǎn)速離心10min，取上清液保存于-80℃超低溫冰箱統(tǒng)一進(jìn)行檢測。采用羅氏Combas E602全自動電化學(xué)發(fā)光分析儀及其配套試劑盒進(jìn)行檢測。陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)：PIVKA-Ⅱ≥40mAu/ml，GP73≥150ng/ml，AFP-L3(%)≥10%。

2 結(jié)果

2.1 三組PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3水平比較 肝癌組患者PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3水平明顯高于肝硬化組、對照組，且肝硬化組明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 三組PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3水平比較

2.2 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在HCC患者中的診斷效能比較 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3聯(lián)合檢測的曲線下面積(AUC)為0.905，靈敏度和特異度可達(dá)到90.6%、87.1%，比單獨(dú)檢測具有更高的診斷效能，見表2。

表2 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在HCC患者中的診斷效能分析

2.3 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在不同病理特征HCC患者中的表達(dá) 根據(jù)不同病理特征進(jìn)行分組，結(jié)果表明PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在腫瘤直徑≥3cm、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、Edmonson分級為Ⅲ～Ⅳ級、腫瘤轉(zhuǎn)移、腫瘤復(fù)發(fā)的患者中明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在不同病理特征HCC患者中的表達(dá)

2.4 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3與HCC患者不同病理特征的關(guān)系 根據(jù)Spearman相關(guān)性分析可知，PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3與TNM分期、Edmonson分級、腫瘤轉(zhuǎn)移、腫瘤復(fù)發(fā)密切相關(guān)(P<0.05)，見表4。

表4 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3與HCC患者不同病理特征的關(guān)系

3 討論

我國是一個(gè)肝癌大國，全世界50%以上的HCC源自我國，這與我國乙肝病毒的高感染率相關(guān)，大部分HCC患者均是繼發(fā)于乙肝或丙肝相關(guān)的肝炎及肝硬化[8]。HCC是肝癌最常見的原發(fā)類型，具有高發(fā)病率、高病死率、高轉(zhuǎn)移率、高復(fù)發(fā)率的特點(diǎn)。我國每年約有11萬人死于HCC，病死率高主要是由于中晚期患者常常伴有肝外轉(zhuǎn)移、肝內(nèi)擴(kuò)散、腫瘤侵襲而缺少有效的治療措施[9]。因此，尋找早期的生物學(xué)標(biāo)志物，早發(fā)現(xiàn)、早治療對提高HCC患者的治愈率、延長生存期至關(guān)重要。

PIVKA-Ⅱ是一種維生素K缺乏誘導(dǎo)蛋白，主要在肝臟合成。PIVKA-Ⅱ也是一種異常的脫羧基凝血酶原，在HCC患者中，癌細(xì)胞對凝血酶原前體合成異常時(shí)就會導(dǎo)致凝血酶原前體羧化不足而產(chǎn)生大量PIVKA-Ⅱ[10]。PIVKA-Ⅱ是一種新型的腫瘤標(biāo)志物，有研究[11]表明其診斷效能明顯高于甲胎蛋白，對HCC的早期診斷具有重要價(jià)值，可作為臨床常規(guī)篩查的有效指標(biāo)。GP73在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成，位于高爾基體中，主要表達(dá)于膽管上皮細(xì)胞，參與上皮細(xì)胞的多項(xiàng)生理、病理活動。GP73主要通過PI3K-AKT、細(xì)胞因子相互作用、TNF、JAK-STAT等信號通路來實(shí)現(xiàn)對肝癌發(fā)展的調(diào)控[12]。研究表明，GP73在HCC的鑒別診斷上優(yōu)于AFP的診斷效能，聯(lián)合檢測具有更高的診斷價(jià)值[13]。AFP根據(jù)與小扁豆凝集素親和力的不同，分為AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3三種，其中AFP-L3為肝癌細(xì)胞特有,可用于鑒別良惡性肝病[14]。AFP-L3隨疾病進(jìn)展逐漸升高，對HCC患者疾病的發(fā)生發(fā)展以及預(yù)后隨訪有較好的臨床價(jià)值[15]。本文發(fā)現(xiàn)HCC患者PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3水平明顯升高，說明這些指標(biāo)參與了疾病的發(fā)生發(fā)展，與上述研究結(jié)論均一致。本文利用ROC曲線對三者進(jìn)行了單獨(dú)和聯(lián)合檢測的診斷效能分析，結(jié)果顯示，聯(lián)合檢測可進(jìn)一步提高診斷效能，靈敏度和特異度可達(dá)到90.6%、87.1%，優(yōu)于單獨(dú)檢測的診斷效能。

HCC患者根據(jù)不同病理特征進(jìn)行分組后PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在腫瘤直徑≥3cm、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、Edmonson分級為Ⅲ～Ⅳ級、腫瘤轉(zhuǎn)移、腫瘤復(fù)發(fā)的患者中明顯升高，進(jìn)一步采用Spearman相關(guān)性分析PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3與HCC患者臨床病理特征的相關(guān)性，結(jié)果表明PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3與TNM分期、Edmonson分級、腫瘤轉(zhuǎn)移、腫瘤復(fù)發(fā)密切相關(guān)。孫景武等、汪源等[13，16]的研究也證實(shí)了這一結(jié)論。

綜上所述，PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在肝細(xì)胞癌患者中明顯升高，且與TNM分期、Edmonson分級、腫瘤轉(zhuǎn)移、腫瘤復(fù)發(fā)密切相關(guān)，聯(lián)合檢測有助于疾病的早期診斷和病情判斷。但本研究樣本量較小，且未進(jìn)行前瞻性設(shè)計(jì)，可能存在一定偏頗，日后將擴(kuò)大樣本量進(jìn)行更深層次研究來驗(yàn)證結(jié)論的準(zhǔn)確性，以期為HCC患者的診治提供有力依據(jù)。