慢性乙型肝炎患者HBV-DNA載量、肝功能指標(biāo)與免疫學(xué)標(biāo)志物的相關(guān)性研究

張 玲，鄭 榮,何三軍,魏少軍,唐寒秋,馮仕川△

陜西省漢中市中心醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.全科醫(yī)學(xué)科，陜西漢中 723000

慢性乙型肝炎(以下簡稱“乙肝”)是一種由乙型肝炎病毒(HBV)感染所導(dǎo)致的慢性肝病，乙肝患者及HBV攜帶者都是該疾病的重要傳染源。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在我國約有1.2億HBV隱性感染者，并且每年可能有30萬人死于乙肝相關(guān)疾病，乙肝發(fā)病率一直居高不下[1]。研究指出，慢性乙肝患者不僅會有肝區(qū)疼痛、肝脾腫大等臨床癥狀，其相關(guān)肝功能指標(biāo)也會隨之發(fā)生變化，使肝功能受損[2]。乙肝免疫學(xué)標(biāo)志物(HBV-M)可反映機(jī)體對于HBV的免疫反應(yīng)，HBV脫氧核苷酸(HBV-DNA)可反映HBV的復(fù)制水平，而肝功能指標(biāo)則可以反映HBV對于肝細(xì)胞的損害程度[3]。本研究將探討慢性乙肝患者的HBV-DNA水平、肝功能與免疫學(xué)標(biāo)志物(HBV-M)三者間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取于2017年3月至2019年3月在本院治療的慢性乙肝患者124例，男78例、女46例，年齡28～65歲，平均(48.58±12.47)歲，輕度乙肝38例，中度46例，重度40例。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合慢性乙肝的相關(guān)診斷[4]；(2)此前未經(jīng)任何疾病相關(guān)的治療；(3)配合度較高。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)重要臟器功能不全；(2)合并其他類型感染；(3)認(rèn)知、精神障礙。本研究已由醫(yī)院倫理委員會審核批準(zhǔn)。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集 均抽取患者晨起空腹靜脈血5 mL，室溫下靜置2 h后行離心處理。

1.2.2HBV-DNA的檢測 采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-PCR)進(jìn)行檢測，儀器為德國羅氏公司的PCR儀，試劑盒來自深圳匹基生物工程技術(shù)股份有限公司，操作均按照說明書進(jìn)行。HBV-DNA正常(陰性)參考值為<500 IU/mL。

1.2.3肝功能指標(biāo)的檢測 采用日立全自動(dòng)生化分析儀對患者的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)及前清蛋白(PA)進(jìn)行檢測。

1.2.4免疫學(xué)指標(biāo) 采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測乙肝表面抗原(HBsAg)、表面抗體(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗體(HBeAb)，以及乙肝核心抗體(HBcAb)。

2 結(jié) 果

2.1HBV-M不同模式與HBV-DNA水平對比 124例患者共檢出9種HBV-M陽性模式，其中大三陽(HBsAg、HBeAg、HBcAb陽性)38例，小三陽(HBsAg、HBeAb、HBcAb陽性)50例，HBsAg、HBcAb陽性14例，共計(jì)102例，占82.26%。模式Ⅰ的HBV-DNA陽性率及水平均高于其他模式(P<0.05)。見表1。

表1 不同HBV-M感染模式與HBV-DNA水平結(jié)果對比

2.2HBV-DNA水平與HBV-M的關(guān)系 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb及HBcAb 5項(xiàng)免疫學(xué)指標(biāo)中，僅HBeAg與HBV-DNA水平相關(guān)。124例患者中，HBeAg陽性42例，HBV-DNA陽性39例，陽性率為92.86%(39/42)；HBeAg陰性82例，HBV-DNA陽性31例，陽性率為37.80%(31/82)。HBeAg陽性患者的HBV-DNA陽性率高于HBeAg陰性患者(χ2=32.038，P<0.001)。另將HBV-DNA與HBeAg水平分都分為4個(gè)等級，行Spearman相關(guān)分析，HBV-DNA與HBeAg水平呈正相關(guān)(r=0.652，P<0.05)。見表2。

表2 HBV-DNA與HBeAg水平的相關(guān)性分析[n(%)]

2.3HBV-M與肝功能的關(guān)系 124例慢性乙肝患者中，HBeAg陽性42例，HBeAg陰性82例。HBeAg陽性患者的AST、ALT水平均高于HBeAg陰性患者，其PA水平低于HBeAg陰性患者(P<0.05)。另外，乙肝患者血清HBV-DNA水平與AST、ALT水平均呈正相關(guān)(r=0.433、0.367，P<0.05)，與PA不具有相關(guān)性(r=0.042，P>0.05)。見表3。

表3 HBV-M與肝功能相關(guān)指標(biāo)對比分析

3 討 論

乙型肝炎患者相關(guān)臨床癥狀、表現(xiàn)較為繁雜，其HBV-DNA、HBV-M，以及肝功能指標(biāo)水平只能片面地反映患者感染HBV的不同時(shí)期與機(jī)體免疫系統(tǒng)反應(yīng)的結(jié)果，血清中有無HBV的復(fù)制，以及肝臟損傷的嚴(yán)重程度。既往的臨床診斷中多將血清HBV-DNA的檢測水平用于衡量病毒復(fù)制情況，隨著對疾病的研究逐漸深入，大多學(xué)者提出血清HBeAg轉(zhuǎn)陰并不意味著HBV停止復(fù)制，部分HBeAg陰性患者同樣也會存在HBV的復(fù)制和傳播現(xiàn)象[5]。

當(dāng)前，血清學(xué)指標(biāo)在乙肝疾病的臨床診斷中較為常見，可反映患者機(jī)體內(nèi)病毒的轉(zhuǎn)變過程，但對于HBV在機(jī)體內(nèi)的復(fù)制情況及患者有無傳染性的判定存在局限性[6]。HBV-DNA是反映HBV感染最直接的指標(biāo)，通過對其進(jìn)行檢測可對HBV復(fù)制情況進(jìn)行判斷，HBV-DNA水平越高，提示HBV的復(fù)制越活躍，其傳染性就越強(qiáng)[7]。HBeAg作為HBV核心基因的一部分，是HBV復(fù)制的重要指標(biāo)，HBeAg陽性表明HBV復(fù)制的活動(dòng)性，意味著傳染性較大，容易轉(zhuǎn)為慢性。本研究中，HBeAg陽性組的HBV-DNA陽性率高于HBeAg陰性組，且其HBV-DNA水平也較高，提示HBeAg陽性與HBV-DNA水平相關(guān)，與鄒紅霞等[8]的觀點(diǎn)一致。隨著HBeAg水平的增加，血清中HBV-DNA水平也相應(yīng)增加，即HBeAg水平反映HBV-DNA水平，與HBV的復(fù)制水平有關(guān)。有研究報(bào)道，相較于單一的HBeAg陽性或者HBV-DNA陽性，乙肝患者HBeAg與HBV-DNA同時(shí)陽性，其ALT、AST水平會更高，肝損傷程度與HBeAg和HBV-DNA水平呈正相關(guān)[9]。本研究通過對124例慢性乙肝患者進(jìn)行相關(guān)的檢測，共檢出9種HBV-M陽性模式，以大三陽和小三陽這兩種模式多見，且大三陽模式的HBV-DNA陽性率及水平均高于其他模式，提示HBV-DNA水平與HBeAg水平呈正相關(guān)。HBeAg陽性患者的AST、ALT均明顯高于HBeAg陰性患者，其PA水平低于HBeAg陰性患者，且血清HBV-DNA的水平與其AST、ALT水平均呈正相關(guān)，提示HBV-DNA、HBV-M及肝功能3者之間存在密切的聯(lián)系。

綜上所述，慢性乙肝患者HBV-DNA、肝功能指標(biāo)、HBV-M水平密切相關(guān)，加強(qiáng)對HBV-DNA、HBV-M水平的檢測，有利于提高慢性乙肝的篩查率，對患者發(fā)生嚴(yán)重肝功能損害具有重要的預(yù)防作用。