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    非配套生化檢測系統(tǒng)酶類項目吸光度閾值與自動稀釋重測設(shè)定的臨床應(yīng)用*

    2020-12-05 12:10:46蔡永梅毛東英王志偉
    中國醫(yī)學裝備 2020年11期
    關(guān)鍵詞:檢測

    蔡永梅 劉 京 毛東英 王志偉*

    在臨床生化檢驗中,當樣本中待測物濃度大于檢測系統(tǒng)線性范圍(analytical measurement range,AM R)時,需要稀釋重測(rerunon dilution),尤其是在進行丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase,AST)、γ-谷氨?;D(zhuǎn)肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,GGT)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase,LDH)、α-羥丁酸脫氫酶(alpha-hydroxybutyric dehydrogenase,HBDH)和肌酸激酶(creatine kinase,CK)等酶類項目檢測,當待測物濃度超過檢測系統(tǒng)線性區(qū)間時,出現(xiàn)底物耗盡導致結(jié)果不可靠[1]。使用配套生化系統(tǒng)時,制造商根據(jù)檢測系統(tǒng)的特點,在大量實驗數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上事先確定吸光度閾值和自動稀釋重測條件,實現(xiàn)超出線性范圍檢測結(jié)果的自動識別、篩選并通過稀釋重測(手動或自動),獲得準確檢測結(jié)果[2]。使用第三方試劑組成非配套生化檢測系統(tǒng)時,往往忽視吸光度閾值和自動稀釋重測的設(shè)定,采用系統(tǒng)默認參數(shù),存在潛在質(zhì)量風險、影響檢驗工作效率。非配套生化檢測系統(tǒng)也應(yīng)當根據(jù)所使用試劑特點正確設(shè)置吸光度閾值,自動識別并標記底物耗盡時的異常檢測結(jié)果,具備自動稀釋重測功能的全自動生化分析儀,還應(yīng)正確設(shè)置稀釋倍數(shù)和稀釋重測條件,實現(xiàn)自動稀釋重測,避免異常高值結(jié)果漏檢和誤檢。本研究通過吸光度閾值和自動稀釋重測的設(shè)定和應(yīng)用,保證酶類項目檢測結(jié)果的準確性,提高檢驗工作效率,實現(xiàn)對酶類反應(yīng)過程的監(jiān)控,使非配套生化檢測系統(tǒng)具備媲美配套系統(tǒng)的檢測質(zhì)量。

    1 材料與方法

    1.1 一般材料

    選取2017年6-9月在寧夏醫(yī)科大學總醫(yī)院住院或門診患者,檢測其ALT、AST、GGT、ALP、LDH、HBDH和CK7個項目結(jié)果接近試劑說明書提供線性高限(±10%)的樣本各10份;另選取超過線性上限的高值結(jié)果樣本各30份。

    1.2 儀器與試劑

    SIEMNES ADVIA 2400型全自動生化分析儀(德國西門子醫(yī)學診斷產(chǎn)品有限公司),酶類項目檢測試劑、標準品(北京利德曼生化股份有限公司)。

    1.3 檢測方法

    利德曼酶類項目試劑檢測范圍分別為:ALT和AST各為0~600 U/L,ALP為25~750 U/L,GGT為10~500 U/L,CK為25~1000 U/L,LDH和HBDH各為25~750 U/L。將各項目大于線性上限結(jié)果按自動稀釋與手動稀釋方式分為兩組,并上機檢測。

    1.3.1 吸光度閾值的獲取與設(shè)置

    選取ALT、AST、GGT、ALP、LDH、HBDH和CK接近說明書提供線性高限(±10%以內(nèi))各10份樣本上機檢測,讀取各項目起始讀點時主波長的吸光度并計算均值,將其設(shè)為北京利德曼試劑在ADVIA 2400型全自動生化分析儀吸光度閾值。ADVIA 2400設(shè)置樣品上升反應(yīng)上限為“u”,下降反應(yīng)下限為“d”。

    1.3.2 吸光度閾值的驗證

    將另選取并檢測的ALT、AST、GGT、ALP、LDH、HBDH和CK的7個項目大于線性上限樣本各30份,確認所有超過線性的結(jié)果均被有效識別,驗證所設(shè)吸光度閾值的正確性。

    1.3.3 自動稀釋重測設(shè)置

    ADVIA 2400型全自動生化分析儀具有自動稀釋重測功能,根據(jù)實驗室驗證的不同項目最大稀釋倍數(shù),進行自動稀釋重測倍數(shù)和自動稀釋重測條件的設(shè)置。分別用手工稀釋和自動稀釋的方式檢測ALT、AST、GGT、ALP、LDH、HBDH和CK的7個項目大于線性上限樣本各30份,進行兩種稀釋方式結(jié)果的比較。

    1.4 統(tǒng)計學方法

    采用SPSS16.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,將兩種稀釋方式結(jié)果進行成對雙樣本均值分析的t檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié)果

    2.1 吸光度閾值

    正確設(shè)置北京利德曼生化試劑和ADVIA2400型全自動生化分析儀組成的非配套檢測系統(tǒng)酶類項目吸光度閾值參數(shù)后,儀器自動識別所有超線性上限的結(jié)果,上升反應(yīng)結(jié)果并附帶警示標志“u”,下降反應(yīng)結(jié)果并附帶警示標志“d”,提示檢測結(jié)果超過線性上線,可能存在底物耗盡而不可靠,需要稀釋重測。各檢測項目的吸光度閾值見表1。

    表1 各檢測項目的吸光度閾值

    2.2 自動稀釋與手工稀釋濃度比較

    設(shè)置吸光度閾值可實現(xiàn)超高限酶類檢測結(jié)果自動識別,在此基礎(chǔ)上設(shè)置自動稀釋重測倍數(shù)和自動稀釋重測條件,可完成此類結(jié)果的自動識別、自動稀釋重測,重測過程不需要人為干預,進一步提高工作效率。所有項目P值均>0.05,自動稀釋結(jié)果與手動稀釋結(jié)果無顯著性差異,一致性良好,可優(yōu)先選用自動稀釋方式重測酶類超高限異常結(jié)果。儀器自動稀釋與手工稀釋濃度見表2。

    表2 儀器自動稀釋與手工稀釋濃度比較()

    表2 儀器自動稀釋與手工稀釋濃度比較()

    注:表中ALT為丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶;AST為天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶;GGT為γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)肽酶;ALP為堿性磷酸酶;LDH為乳酸脫氫酶;HBDH為α-羥丁酸脫氫酶;CK為肌酸激酶

    3 討論

    國內(nèi)許多臨床實驗室選用由進口全自動生化分析儀和國產(chǎn)第三方試劑組成非配套(開放)生化檢測系統(tǒng)。第三方試劑應(yīng)用于不同制造商多種型號儀器,其工程技術(shù)人員只能給用戶提供基本分析參數(shù)設(shè)置,僅滿足第三方試劑在各種分析儀上的基本使用要求,而不能針對每種分析儀的特征更進一步對相關(guān)參數(shù)進行優(yōu)化設(shè)置,一些高階參數(shù)均選用儀器默認值,不能對分析檢測過程進行有效監(jiān)控,這是目前非配套系統(tǒng)應(yīng)用存在的普遍問題和主要缺陷[3]?;诖耍狙芯块_展非配套生化檢測系統(tǒng)酶類項目吸光度閾值與自動稀釋重測設(shè)定和臨床應(yīng)用。

    全自動生化分析儀速率法一般設(shè)定在固定循環(huán)點讀取吸光度,由于方法學及檢測系統(tǒng)的限制,當待測物酶活度高于檢測線性上限時,吸光度每分鐘的變化率急劇增大,底物迅速耗盡、反應(yīng)提前結(jié)束進入平臺期,讀點區(qū)間內(nèi)反應(yīng)曲線不成線性而“失真”,導致結(jié)果計算錯誤[4-5]。這種異常高值結(jié)果約占每日檢測數(shù)的千分之幾,在非配套系統(tǒng)應(yīng)用中若無設(shè)置吸光度閾值參數(shù),實驗室工作人員通過查閱歷史結(jié)果、查看儀器反應(yīng)曲線以及儀器結(jié)果是否有異常標志[6-7]以及臨床診斷并結(jié)合工作經(jīng)驗等措施,進行超線性異常檢測結(jié)果的篩選與復查,工作效率低,容易漏檢,導致檢驗結(jié)果錯誤報告[8]。針對此現(xiàn)象,高小文等[9]報道,設(shè)置檢測項目的線性范圍上限值進行攔截或通過反應(yīng)曲線斜率進行結(jié)果的糾正計算,但仍存在漏檢或誤差。依據(jù)酶類檢測項目的反應(yīng)原理,進行吸光度閾值參數(shù)的優(yōu)化設(shè)置,通過設(shè)定上升反應(yīng)(u)或下降反應(yīng)(d)[10]進行超高限結(jié)果的識別,攔截效率高,可杜絕漏檢和誤檢。

    ADVIA 2400全自動生化分析儀具有自動稀釋重測功能,根據(jù)ALT、AST、GGT、ALP、LDH、HBDH及CK檢測方法的反應(yīng)類型,設(shè)置自動稀釋重測倍數(shù)和條件[12]。結(jié)合吸光度閾值的應(yīng)用,實現(xiàn)超限結(jié)果自動識別、攔截,自動稀釋重測,提高了檢驗工作效率[13]。通過儀器自動稀釋與手動方式稀釋比較,證實兩者結(jié)果無顯著性差異,一致性良好,保證檢測結(jié)果的正確性[13-14]。

    4 結(jié)論

    通過吸光度閾值的設(shè)定和應(yīng)用,有效攔截、標識超過線性上限酶類結(jié)果的同時,實現(xiàn)對非配套生化檢測系統(tǒng)酶類項目反應(yīng)過程的監(jiān)控,結(jié)合自動稀釋重測,實現(xiàn)自動識別、自動稀釋重測。杜絕異常高值結(jié)果的漏報、誤報,保證檢測結(jié)果準確、可靠,提高檢驗質(zhì)量;有效自動篩選出高于限值的檢測結(jié)果減少繁復、無必要的工作,降低工作人員勞動強度,縮短樣本TAT,提高檢驗工作效率,使非配套生化檢測系統(tǒng)具備媲美配套系統(tǒng)的檢測質(zhì)量和檢測效率。

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