廣州口岸出境中國人員中百日咳感染的血清學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果分析

朱云楓 張建明 栗召輝 明宏艷 陳建東 黃永欣 梁少軍（通信作者） 廣州海關(guān)廣州國際旅行衛(wèi)生保健中心（廣州，廣東，510130）

楊 燁 烏魯木齊海關(guān)新疆國際旅行保健中心（烏魯木齊，新疆，830011）

百日咳是由鮑氏百日咳桿菌引起的呼吸道傳染病，傳染性強(qiáng)，人群普遍易感，主要危及嬰幼兒生命［1］。 近年來監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)的“百日咳再現(xiàn)”、發(fā)病率低估、年長兒童及成人病例增多、傳播模式改變等等新情況，大大地引起了人們的關(guān)注［2］。識(shí)別不典型病例、提高監(jiān)測(cè)手段、疫苗接種后保護(hù)力快速消退等等被認(rèn)為是 “百日咳再現(xiàn)” 的重要原因［1-2］。 我國2013-2018 年由報(bào)告病例數(shù)計(jì)算出來的報(bào)告發(fā)病率由1.3/10 萬人逐年增加到1.5/10 萬［3-4］，而且國內(nèi)多地的研究顯示，通過癥狀監(jiān)測(cè)得到的發(fā)病率和血清學(xué)監(jiān)測(cè)估算百日咳感染率比報(bào)告發(fā)病率高得多，甚至高達(dá)萬倍［5-7］。本文將分析廣州口岸出境的中國人中的百日咳毒素特異性IgG 抗體（PT-IgG）陽性情況并估算感染率。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

2019 年1 月至12 月在廣州口岸出境的中國國籍人員中用隨機(jī)數(shù)字表法抽樣772 人進(jìn)入研究。 所有受試人員進(jìn)入研究前均已簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 一般信息和既往百日咳感染調(diào)查

工作人員用統(tǒng)一的調(diào)查問卷詢問受試人員的一般信息、既往百日咳診治情況、既往及目前有無“百日咳癥候群”的表現(xiàn)、百日咳疫苗接種情況等。

1.2.2 百日咳毒素特異性IgG 抗體檢測(cè)

所有受試人員都被抽取靜脈血3-5mL。 血樣在離心分離血清后置-20℃保存待統(tǒng)一檢測(cè)。

檢測(cè)方法采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）方法，試劑盒來自德國維潤賽潤公司（批號(hào)SEI.DV）且在有效期內(nèi)， 儀器為Uranus AE150 酶聯(lián)免疫反應(yīng)儀，操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。 抗體滴度通過軟件SERION easy ANALYZE 進(jìn)行計(jì)算而得。

1.3 結(jié)果判定

使用試劑盒說明書的轉(zhuǎn)化公式計(jì)算抗體滴度，陽性界限值采用試劑盒的40-100IU/mL。

1.4 感染率估算方法

參考文獻(xiàn)［5-6，8］，利用PT-IgG 抗體在人體內(nèi)的衰減規(guī)律， 通過公式計(jì)算在標(biāo)本采集前1 年時(shí)間內(nèi)感染情況，估算感染率=（365.25/297.6）×PT-IgG 抗體陽性率。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

使用SPSS 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用卡方檢驗(yàn)，假設(shè)檢驗(yàn)采用雙側(cè)檢驗(yàn)（α=0.05），P＜0.05 為有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

總共772 例納入研究分析， 其中男364 人，女408 人；年齡范圍在3 歲至87 歲（中位年齡43 歲），30～59 歲占59.59%（460 人），詳見表1。

2.2 癥狀監(jiān)測(cè)情況

全部無報(bào)告既往百日咳的診療病史或典型癥狀歷史。

2.3 疫苗接種情況

查實(shí)有百日咳疫苗 （包括所有各種聯(lián)合疫苗）接種歷史記錄的為124 人， 其中91.9%（114 人）的最后一次百日咳疫苗接種至少在3 年以前。

2.4 PT-IgG 抗體陽性情況

抗體滴度大于40 IU/mL 的有24 人， 大于100 IU/mL 的有4 人， 總體陽性率為分別為3.11%和0.52%， 估算感染率分別為3 800/10 萬人和3 240/10 萬人。 其中陽性率最高人群為3～7 歲年齡段，其次分別為60～69 歲和70～79 歲年齡段，明顯高于其他年齡段的陽性率（P＜0.05），詳見表1。

表1 各年齡段占比及各自陽性（PT-IgG 抗體滴度＞40 IU/ml）比例

3 討論

百日咳的監(jiān)測(cè)通常有被動(dòng)病例報(bào)告監(jiān)測(cè)、主動(dòng)監(jiān)測(cè)（包括癥狀監(jiān)測(cè)和血清免疫學(xué)監(jiān)測(cè)等）［9］。 由于百日咳疫苗的廣泛應(yīng)用但其保護(hù)效果不持久，目前已發(fā)現(xiàn)越來越多年長兒童和成人百日咳病例。 這些病例通常缺乏典型的“百日咳癥候群”表現(xiàn)，所以容易被誤診、漏診［1，3，5，10］。 因此報(bào)告病例監(jiān)測(cè)和癥狀監(jiān)測(cè)對(duì)病情較輕者都存在比較嚴(yán)重的低估［3，5，9-11］。 本組人群全部無報(bào)告既往百日咳的診療病史或典型癥狀歷史。 因而報(bào)告病例監(jiān)測(cè)和癥狀監(jiān)測(cè)這兩種監(jiān)測(cè)手段不適合于此類人群。

百日咳毒素是鮑氏百日咳桿菌獨(dú)有的蛋白，與絲狀血凝素等其他細(xì)菌成分的抗體相比，毒素抗體對(duì)提示百日咳感染有較高的特異性［12］。 由于在人群中普遍存在百日咳感染，每隔一段時(shí)間有一次小流行， 而且疫苗接種的覆蓋率高， 因此通過檢測(cè)PTIgG 水平來診斷百日咳感染時(shí)， 可以根據(jù)雙份血清檢測(cè)抗體滴度變化，也可以根據(jù)無免疫接種者的單份血清的高滴度抗體水平或免疫接種1 年后的單份血清的高滴度抗體水平［1，12］。 其中對(duì)單份血清診斷百日咳新近感染的可行性及其判斷值劃分已有較多的研究［8，12］。 歐盟推薦65-125 IU/mL 作為陽性界限值［12］。 國內(nèi)對(duì)PT-IgG 的陽性界限值尚未統(tǒng)一，使用不同試劑用不同的界限值，同一種試劑在不同研究中的陽性界限值也不一致［13］。 然而，已經(jīng)證實(shí)即使采用不同的陽性界限值， 利用PT-IgG 在體內(nèi)有固定的衰變規(guī)律計(jì)算出的估算感染率也大致相仿［5，6，8］。本研究采用試劑盒本身的推薦值40～100 IU/mL 為陽性判斷值。 大于40 IU/mL 的陽性率為3.1%，大于100 IU/mL 的陽性率為0.52%，估算感染率分別為3 800/10 萬人和3 240/10 萬人，兩者無明顯差異，均高于全國平均水平（2018 年全國報(bào)告發(fā)病率為1.5/10 萬人）［4］，但大大低于廣東（2011 年估算感染率為9 395/10 萬人）［6］、天津（2010-2012 年估算感染率10 852/10 萬人）［5］， 與隨州的從業(yè)人員中估算感染率4 345/10 萬人相仿［14］。 所以對(duì)于出境人群，報(bào)告病例監(jiān)測(cè)和癥狀監(jiān)測(cè)均存在百日咳發(fā)病率低估的情況，合理應(yīng)用血清學(xué)檢測(cè)手段進(jìn)行監(jiān)測(cè)可能更適合。

在百日咳疫苗廣覆蓋時(shí)代，百日咳仍然嚴(yán)重威脅嬰幼兒的生命，2012 年估算全球百日咳致出生后1 年內(nèi)死亡率為400 例每10 萬位新生兒［16］。百日咳傳播模式的改變、家庭聚集發(fā)病等發(fā)現(xiàn)更引起了人們的重視［10，15-16］。 本研究中3～7 歲人群的抗體滴度可能受預(yù)防接種的影響， 其他的陽性人員集中在60-79 歲，都已婚有家庭，而作為家庭中堅(jiān)的40-49歲人群的陽性率也達(dá)3.74%， 而且全組人群中83.9%無百日咳疫苗接種歷史記錄， 有接種歷史記錄者91.9%的最后一次接種在至少3 年以前。 因此在對(duì)這些人群加強(qiáng)監(jiān)測(cè)的同時(shí)，有必要對(duì)其進(jìn)行健康宣教、必要的免疫保護(hù)水平檢測(cè)，或推薦對(duì)弱免疫保護(hù)的特定人員強(qiáng)化接種、 實(shí)施家庭內(nèi)孕母的“蠶繭保護(hù)”策略等［1］。