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    銀屑病小鼠抑郁樣行為學(xué)檢測與分析

    2020-12-03 01:50:42陳麗莉陸海濤吳景良秦樹存李保強段昕所
    實用皮膚病學(xué)雜志 2020年5期
    關(guān)鍵詞:小鼠實驗模型

    何 磊,陳麗莉,陳 軍,陸海濤,王 皓,郭 建,吳景良,秦樹存,李保強,段昕所

    銀屑病是一種常見的慢性炎癥性皮膚病,可累及心血管等多個系統(tǒng)[1]。銀屑病嚴重影響著患者的身心健康,甚至可以出現(xiàn)抑郁等精神癥狀[2],增加了社會和家庭的經(jīng)濟負擔(dān)。最新的研究表明10%以上的銀屑病患者患有臨床抑郁癥[3],其較正常人群更容易出現(xiàn)抑郁癥狀[4]。雖然銀屑病與心肌梗死、腦卒中和心血管死亡有關(guān),但是患銀屑病抑郁的患者患這些疾病的風(fēng)險更高[5]。因此,本研究擬使用體重變化率、糖水偏好實驗、懸尾實驗系統(tǒng)評估銀屑病小鼠模型抑郁行為學(xué)改變,從而探討銀屑病對心理健康的影響。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 實驗動物 健康SPF 級雄性 C57BL /6J 小鼠20 只,10 月齡,體重18 ~25 g [北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司,實驗動物使用許可證號:SYXK(京)2016-0006]。實驗期間喂養(yǎng)于泰山醫(yī)學(xué)院動脈粥樣硬化研究所實驗動物中心。動物飼養(yǎng)于標(biāo)準(zhǔn)動物房:12 h 晝夜交替,室溫(24±2)℃,空氣濕度50%±10%,除造模及必要的斷水?dāng)嗍惩?,小鼠均可自由進水進食。實驗前動物先適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周。本實驗遵循實驗動物3R 原則。

    1.1.2 主要試劑與儀器 5%咪喹莫特(四川明欣藥業(yè)有限公司),凡士林(河北蘭煉飛天石化有限公司),小鼠水迷宮實時測試系統(tǒng)(TopScan 美國CSI)。

    1.2 方法

    1.2.1 銀屑病小鼠模型制備 參考 van der Fits 等[6]銀屑病樣動物模型制備方法。將小鼠通過腹腔注射4%水合氯醛(0.1 ml /kg)進行麻醉,并將其背部約 2 cm × 2 cm 毛發(fā)剃除。 C57BL/6J 小鼠20 只按體重分成2 組:正常對照組10 只, 外用凡士林;銀屑病模型組 10 只,背部脫毛后給予5%咪喹莫特62.5 mg每日1 次外涂,為期1 周。

    1.2.2 體重變化率 于造模前及造模后第7天上午9:00 測量小鼠體重,計算體重變化率,體重變化率(%)=(造模后測量體重-造模前體重)÷造模前體重×100%。

    1.2.3 糖水偏好實驗[7]實驗前禁水 24 h,進行基礎(chǔ)糖水/純水消耗試驗,給予每只小鼠 1 瓶純水及 1 瓶1% 蔗糖水,12 h 后調(diào)換一次糖水和自來水的位置,24 h 后進行稱重,計錄小鼠總液體消耗量、糖水消耗量。糖水偏愛率=糖水消耗量÷總液體消耗量×100%。

    1.2.4 懸尾實驗[8]將小鼠尾部( 距尾尖約 1.5 cm)用醫(yī)用膠布固定在水平木板上, 小鼠頭部距離實驗臺10 cm 左右,小鼠保持倒懸狀態(tài) 2 min 后, 連續(xù)觀察 4 min 內(nèi)實驗小鼠倒懸活動狀態(tài), 記錄小鼠身體下垂、完全不動的總時間。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

    實驗結(jié)果均采用 SPSS 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理。實驗數(shù)據(jù)均選用t檢驗。實驗結(jié)果均以平均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差(xˉ±s)表示,P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    觀察體重變化率顯示,銀屑病模型組小鼠體重明顯下降,而正常對照組小鼠體重升高(P<0.001)(圖1),提示銀屑病小鼠存在抑郁樣表現(xiàn)。

    圖1 銀屑病對小鼠體重的影響

    圖2 銀屑病對小鼠糖水偏好實驗及懸尾實驗的影響

    糖水實驗結(jié)果顯示,銀屑病模型組小鼠總進水量減少,糖水飲水量減少,消耗率明顯下降(P<0.001)(圖2A-2C),提示銀屑病小鼠存在抑郁樣表現(xiàn)。

    懸尾實驗結(jié)果顯示,銀屑病模型組小鼠懸尾不動時間延長(P<0.05)(圖2D),提示銀屑病小鼠存在抑郁樣表現(xiàn)。

    3 討論

    銀屑病與心理疾病密切相關(guān)[9]。國內(nèi)外研究表明,銀屑病患者具有較高的抑郁患病率,我國的發(fā)病率高達13.9%[10],嚴重影響患者的生活質(zhì)量[11]??旄腥狈?、自主行為學(xué)和體重變化都是臨床中評定診斷抑郁癥的漢密爾頓抑郁量表中的觀察項目[12]??旄腥笔侵阁w驗快樂的能力下降,是抑郁癥的核心癥狀,也是重要的診斷指標(biāo)之一。體重變化率是評價小鼠抑郁癥模型常用的指標(biāo),由于快感缺失等原因,導(dǎo)致抑郁小鼠進食量減少,從而出現(xiàn)體重下降。糖水偏好實驗,是抑郁癥模型行為學(xué)評價的經(jīng)典實驗,實驗的原理是通過抑郁患者所表現(xiàn)出的快感缺失。糖水消耗實驗通過比較一定時間內(nèi)小鼠飲用糖水量的改變,反應(yīng)快感缺失的程度。抑郁小鼠快感缺失的程度增加,則對糖水的興趣降低,從而導(dǎo)致糖水消耗率降低。本研究采用糖水偏好實驗、懸尾實驗系統(tǒng)評價銀屑病對小鼠行為學(xué)的影響。這兩種經(jīng)典的方法被廣泛應(yīng)用于小鼠抑郁行為的評價,包括抑郁行為機制的研究,如小清蛋白神經(jīng)元對抑郁樣行為的調(diào)控[13];不同疾病對抑郁行為的影響,如分析黃褐斑小鼠模型在肝郁證的行為學(xué)變化[14],先天性白內(nèi)障對小鼠行為學(xué)影響[15];抗抑郁藥物的篩選,如沃頓膠改善小鼠腦損傷后的抑郁情緒[16]。本研究表明,銀屑病模型組體重明顯下降,銀屑病模型組小鼠糖水消耗明顯減少,懸尾實驗中銀屑病模型組小鼠懸尾不動時間延長,表明銀屑病小鼠存在抑郁癥狀,也從動物實驗的角度再次證實了銀屑病對心理健康的影響。綜上所述,銀屑病小鼠存在抑郁樣行為表現(xiàn),提示臨床上需進一步觀察銀屑病患者心理狀態(tài),同時為進一步探討銀屑病伴隨心理疾病的研究提供新的理論依據(jù)。

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