植物甾醇作為一種新資源食品,有較高的應(yīng)用價值。植物甾醇主要存在于植物油不皂化物中,隨著現(xiàn)代提取技術(shù)的發(fā)展,植物甾醇提取方法也更加多樣化,本文概述了植物甾醇提取分離方法。
植物甾醇(phytosterol)是植物中的一種有益的活性營養(yǎng)成分。甾醇按照其來源可分為:植物甾醇、動物甾醇和菌類甾醇。其中β-谷甾醇(β-sitosterol)、豆甾醇(stigmasterol)和菜油甾醇(campesterol)等屬于植物甾醇[1]。其中植物甾醇結(jié)構(gòu)因側(cè)鏈上的結(jié)構(gòu)不同使其具有的生理功能不同。
溶劑結(jié)晶法溶劑結(jié)晶法分為單溶劑和多溶劑的重結(jié)晶法。結(jié)晶是指蒸汽或溶液中的某些或某種成分以晶體狀析出的現(xiàn)象。在工廠和實驗室等機構(gòu)分離提純該物質(zhì)常用該法。馮文歡[2]等對98%混合植物甾醇進(jìn)行純化,經(jīng)2 次重結(jié)晶,最終豆甾醇的純度可達(dá)99.36%。
層析法層析法包括柱層析、半制備液相色譜法等。極性較小的物質(zhì)一般用柱層析的方法分離,甾醇的極性較低,可根據(jù)相似相溶原理通過石油醚或甲醇等低極性溶劑將甾醇從混合物中分離,制備型液相色譜可大量地對混合物進(jìn)行分離。許帥[3]通過對蓮心的丙酮提取物使用柱層析進(jìn)行分離,甾醇酯的純度為95.56±1.32%,回收率為95.70±3.05%。
皂化法皂化法是用熟石灰或生石灰在60℃~90℃將溶劑提取物皂化,將游離脂肪酸酯化成溶于水的鹽,經(jīng)萃取除去游離脂肪酸,得到不皂化物。項發(fā)暉[4]等通過對鮑魚性腺無水乙醇提取物皂化得到鮑魚性腺甾醇純度達(dá)14.08%,相較于鮑魚性腺粗甾醇純度8.62%顯著提高。
蒸餾法蒸餾法包括分子蒸餾和常規(guī)蒸餾。分子蒸餾是一種液-液分離技術(shù),原理為在0.1 ~10Pa(帕斯卡)的高真空條件下,不同物質(zhì)分子運動的平均自由程差異來進(jìn)行分離;常規(guī)蒸餾則是一種氣-液分離技術(shù),在常壓條件下進(jìn)行分離[5]。黃妙玲[6]等利用二次蒸餾法純化米糠油中的植物甾醇,米糠油中甾醇的含量由3.15%提高到了61.37%。
超臨界流體萃取法超臨界流體萃取法具有提取無污染、效率高、熱敏性成分和天然活性成分不易被破壞,可選擇性分離等優(yōu)點,適合提取植物甾醇,此法缺點為設(shè)備價格昂貴、維修保養(yǎng)費用高。馬永芹[7]釆用超臨界萃取法提取穩(wěn)定化處理的米糠,米糠油中甾醇含量為2.274%,此法提取的甾醇含量高于溶劑法。
由于植物甾醇的多重功效逐漸受到人們關(guān)注,對植物甾醇的研究也越來越深入和多樣化。為提高植物甾醇的高效性和針對性,高效率、高純度、低成本的分離技術(shù)逐步被開發(fā)和應(yīng)用起來,與國外的植物甾醇在食品、醫(yī)療和化妝品等行業(yè)的應(yīng)用相比,我國植物甾醇的應(yīng)用還有很大的市場發(fā)展空間,因此探索植物甾醇混合物提取及其甾醇單體的分離具有重要意義。