外周血TLR2及IL-6表達與早產(chǎn)兒腦損傷的相關(guān)性①

邢 偉,王顯鶴,常 璐,張曉波,李 蕊

(1.佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院兒內(nèi)一科，黑龍江 佳木斯 154003；2.佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理解剖教研室，黑龍江 佳木斯 154007)

目前，隨著我國二胎政策全面放開，以及各項生命支持技術(shù)在新生兒重癥醫(yī)學(xué)專業(yè)的廣泛應(yīng)用，早產(chǎn)兒、尤其極早早產(chǎn)兒和非常早產(chǎn)兒的存活率有了明顯提高，伴隨而來早產(chǎn)兒腦損傷發(fā)病率呈井噴式遞增[1,2]。隨之而來早產(chǎn)兒腦損傷及其神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥如腦癱等發(fā)病率呈上升趨勢。目前早產(chǎn)兒腦損傷的發(fā)病機制是國內(nèi)外研究的熱點及難點。本研究旨在探究外周血TLR2及IL-6表達與早產(chǎn)兒腦損傷發(fā)生的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017-10～2018-10在佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院的新生兒90例。研究對象選入標(biāo)準(zhǔn)：1)出生2h內(nèi)；2)胎齡28～41周；3) 出生時無發(fā)育畸形的胎兒；無傳染性疾病、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育異常、壞死性小腸結(jié)腸炎等嚴(yán)重合并癥者；4) 產(chǎn)前母親無影響妊娠結(jié)局的嚴(yán)重復(fù)雜疾病。根據(jù)胎齡分為足月組及早產(chǎn)兒組。早產(chǎn)兒組納入標(biāo)準(zhǔn)：按照2012年中國醫(yī)師協(xié)會新生兒專業(yè)委員會提出的早產(chǎn)兒腦損傷診斷與防治專家共識的標(biāo)準(zhǔn)納入[1]，早產(chǎn)兒組分為胎膜早破早產(chǎn)組(胎膜早破時間>12h的早產(chǎn)兒)和特發(fā)性早產(chǎn)組(即自然臨產(chǎn)及妊高癥等分娩的早產(chǎn)兒)。3組間性別、孕周比較均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究征求新生兒監(jiān)護人同意并簽署知情同意書。

1.2 方法

分別于早產(chǎn)兒出生30min內(nèi)采靜脈血2mL，4℃下靜置15min后，離心機3500r/min離心15min，取血清，于-80℃冰箱保存樣品待測。采用酶聯(lián)免疫吸附法，嚴(yán)格按照說明書上步驟分別測定血清中TIR2及IL-6水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 3組新生兒血清TLR2及IL-6水平比較

兩組早產(chǎn)兒腦損傷患兒血清TLR2及IL-6高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P﹤0.05)。見表1。

表1 3組新生兒血清TLR2及IL-6水平比較

2.2 兩組早產(chǎn)兒腦損傷血清TLR2及IL-6水平相關(guān)性比較

胎膜早破組血清TLR2及IL-6水平呈正相關(guān)(r=0.758，P﹤0.05)；特發(fā)性早產(chǎn)組血清TLR2及IL-6水平呈正相關(guān)(r=0.604，P﹤0.05)。

3 討論

據(jù)統(tǒng)計從2005～2010年，全球早產(chǎn)兒發(fā)生率由9.6%升至11.1%[1]。<32周早產(chǎn)兒的發(fā)生率由1996年的0.87%增至2008年的1.1%[2]。其伴隨而來的早產(chǎn)兒腦損傷的發(fā)病率有增無減，其中新生兒缺血缺氧性腦病是危及新生兒期生命的重要原因之一[3]。我國早產(chǎn)兒腦損傷界定為是指由多種或一種病理因素最終導(dǎo)致早產(chǎn)兒的大腦產(chǎn)生不同程度的缺血性或/和出血性的腦損害，其中主要包括腦室周圍腦白質(zhì)的軟化、顱內(nèi)出血等病理改變[4]。

TLR 2是腦天然性免疫反應(yīng)系統(tǒng)中的重要組成成員，主要表達于小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)元和內(nèi)皮細(xì)胞。這些細(xì)胞既能分泌一些炎癥因子，并能促進炎癥產(chǎn)生。相關(guān)實驗室研究證實在小鼠的大腦皮質(zhì)中存在TLR2的表達，當(dāng)小鼠大腦模型產(chǎn)生缺血性的再灌注損傷時，損傷的大腦皮質(zhì)中的TLR2水平表達明顯升高，并與其相對的TLR2基因已敲除的小鼠大腦皮質(zhì)細(xì)胞中當(dāng)受到的缺血性再灌注損傷時TLI2水平升高不明顯，從而該實驗說明TLR2的活化會加重小鼠的缺血性腦損傷[5,6]。Sunabori等[7]國外研究證實TLR2在初級海馬神經(jīng)元和新生兒海馬中均有表達；TLR2缺乏的新生兒小鼠表現(xiàn)出對缺血缺氧性腦損傷的耐受性。本實驗研究發(fā)現(xiàn)，早產(chǎn)兒腦損傷2組血清TIR2較對照組顯著升高，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P﹤0.01)，提示TIR2與早產(chǎn)兒腦損傷發(fā)生有密切關(guān)系。

人體中的IL-6是一種非常典型的細(xì)胞因子，在免疫系統(tǒng)存在多效性及多功能性,其由血管內(nèi)皮細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等細(xì)胞生成，參與及介導(dǎo)多種疾病的發(fā)生與發(fā)展[8]。相關(guān)臨床研究表明[9]，腦損傷早產(chǎn)兒即出生1周內(nèi)血中IL-6水平明顯高于無腦損傷早產(chǎn)兒，表明患兒腦損傷發(fā)生后可刺激腦細(xì)胞中IL-6呈爆發(fā)式升高，在腦白質(zhì)損傷區(qū)域IL-6過度表達會產(chǎn)生局部炎性反應(yīng)加重，增加患兒腦損傷病情。Armstrong-Wells等[10]研究結(jié)果顯示，其母胎膜早破出生新生兒其臍血中IL-6等炎癥細(xì)胞因子水平明顯增高，提示在宮內(nèi)感染所致腦損傷中，IL-6等細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)起著重要作用。美國新生兒學(xué)家Romero等[11]有關(guān)新生兒羊水中測定IL-6等細(xì)胞因子水平研究提示，羊水中炎癥細(xì)胞因子( IL-6等) 水平的增高與早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷、腦癱關(guān)系密切。本實驗結(jié)果與之相符，早產(chǎn)兒腦損傷2組患兒血清IL-6水平較正常新生兒升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P﹤0.05)提示患兒血清中IL-6參與早產(chǎn)兒腦損傷產(chǎn)生。

本實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)早產(chǎn)兒腦損傷2組血清中TLR2及IL-6水平均呈正相關(guān)。我們可推測出當(dāng)機體受到感染或損傷時TLR2可作為上游因子，可誘導(dǎo)IL-6等炎癥細(xì)胞因子產(chǎn)生。當(dāng)損傷的大腦皮質(zhì)在缺血、缺氧的條件下IL-6自身也可調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥反應(yīng)，即IL-6可通過增強外周血及周圍中中性粒細(xì)胞膜的通透性，從而致其細(xì)胞的破壞來增加毒性作用，促進內(nèi)皮細(xì)胞表達細(xì)胞間黏附分子，經(jīng)趨化作用最終致炎性細(xì)胞轉(zhuǎn)移到病灶部位，進一步加重炎癥反應(yīng)[12]，從而加重腦損傷。由此我們可推斷出TIR2及IL-6可增加早產(chǎn)發(fā)生，并與早產(chǎn)兒腦損傷的發(fā)生密切相關(guān)。

綜上所述，早產(chǎn)兒血清中TIR2及IL-6水平升高與早產(chǎn)兒腦損傷密切相關(guān)，可能成為早期診斷早產(chǎn)兒腦損傷的標(biāo)志物。對早產(chǎn)兒腦損傷患兒進行早期干預(yù)從而減少或避免腦癱等神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥發(fā)生。