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    頸椎病實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的研究進(jìn)展

    2020-11-29 07:46:21蔡明媚傅玉雙林安陽修忠標(biāo)洪振豐趙紅佳
    福建中醫(yī)藥 2020年1期
    關(guān)鍵詞:脊髓型動(dòng)物模型椎動(dòng)脈

    蔡明媚,陳 斌,傅玉雙,林安陽,修忠標(biāo),洪振豐,趙紅佳

    (福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬人民醫(yī)院,福建 福州350004)

    頸椎病又稱頸椎綜合征, 是頸椎骨關(guān)節(jié)炎、增生性頸椎炎、頸神經(jīng)根綜合征、頸椎間盤脫出癥的總稱, 是一種以退行性病理改變?yōu)榛A(chǔ)的疾患[1]。長期的伏案工作、不良的坐姿或睡姿、不適當(dāng)?shù)捏w育鍛煉、頸椎的退行性變、長期勞損等都可以作為頸椎病的發(fā)病因素。 頸椎病可大致分為頸型頸椎病、神經(jīng)根型頸椎病、脊髓型頸椎病、交感神經(jīng)型頸椎病和椎動(dòng)脈型頸椎病等[2]。 近年來社會(huì)經(jīng)濟(jì)基礎(chǔ)的持續(xù)性發(fā)展、人類生活習(xí)慣的變化以及工作負(fù)擔(dān)的加重促使頸椎病的發(fā)生發(fā)展呈現(xiàn)年輕化的傾向,關(guān)于頸椎病的診治也在逐步引起重視。 許多專家學(xué)者為探討頸椎病的臨床治療療效,建立了大量的動(dòng)物模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,本文就近年來頸椎病相關(guān)實(shí)驗(yàn)常用的動(dòng)物模型綜述如下。

    1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

    為了建造模型擬合度良好且可行性較高的頸椎病動(dòng)物模型,以便于更準(zhǔn)確、有效地研究頸椎病,選擇動(dòng)物造模時(shí)常需符合以下條件: ①選用的造模動(dòng)物其生理結(jié)構(gòu)和功能應(yīng)盡量接近人類; ②對動(dòng)物進(jìn)行造模后引起的頸椎病病變應(yīng)盡可能滿足人體頸椎病發(fā)病的客觀規(guī)律;③造模方法經(jīng)濟(jì)有效,操作過程簡單易行;④模型的重復(fù)使用率好,存活率高。按親緣關(guān)系來探討,猿、猴等高等動(dòng)物與人類關(guān)系最近,其在結(jié)構(gòu)及功能層面上也是最理想的造模動(dòng)物,但是從飼養(yǎng)條件、倫理道德問題和相對較長的建模周期方面綜合考慮,一般較少用于實(shí)驗(yàn)研究;豬、羊、犬等動(dòng)物由于體型較大,有馴養(yǎng)場地、費(fèi)用等限制,無法進(jìn)行大樣本的實(shí)驗(yàn)研究,在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中較少使用;兔、鼠之類的小型動(dòng)物盡管不如大型動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)操作準(zhǔn)確、方便,但從實(shí)驗(yàn)材料、成本、場所及訓(xùn)養(yǎng)條件等角度綜合考慮,實(shí)驗(yàn)可行性更高,且有利于長期觀察。 因此目前最常用的頸椎病造模動(dòng)物是兔和鼠。

    2 頸椎病分型造模方法

    2.1 頸型頸椎病 頸型頸椎病是頸椎病發(fā)病初期的臨床類型,初起病情較輕,若遷延失治、誤治則容易進(jìn)一步加重,轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂衅髻|(zhì)性改變的頸椎病。WANG 等[3]根據(jù)頸型頸椎病發(fā)病的致病因素,將家兔分為輕、中、重度刺激組置于風(fēng)力6 級、溫度5 ℃左右、濕度100%的空間,模擬自然界風(fēng)、寒、濕刺激以制備風(fēng)寒濕痹型頸型頸椎病動(dòng)物模型,每日持續(xù)4 h,分別歷時(shí)32、64、128 h。張欣等[4]結(jié)合屈頸過度及風(fēng)、寒、濕致病因素建立無創(chuàng)兔頸型頸椎病模型,將大白兔固定于改良后的兔盒中迫使兔的頸部成45°低頭屈曲位,完全顯露兔頸部,剪除周圍毛發(fā),將保濕冰袋敷于其上,使吹風(fēng)機(jī)出風(fēng)口對準(zhǔn)兔頸部且保持風(fēng)力5 級,持續(xù)2 h,每日重復(fù)2 次,共造模28 d。 張圓芳等[5]按照張欣等建模方法將造模時(shí)間改良為每日1 次,持續(xù)造模5 h,總共歷時(shí)56 d 以建造寒濕型兔頸型頸椎病動(dòng)物模型,通過頸椎間盤組織形態(tài)學(xué)HE 染色觀察發(fā)現(xiàn)頸椎間盤髓核及纖維環(huán)發(fā)生改變且出現(xiàn)大量炎癥細(xì)胞。 唐學(xué)等[6]采用復(fù)合病因造模法即在張欣等造?;A(chǔ)上改兔的頸部成低頭屈曲位60°,并延長造模時(shí)間為10 周,光鏡下觀察發(fā)現(xiàn)軟骨細(xì)胞變性消失、膠原纖維結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞。 劉福水等[7]亦采用此法迫使家兔保持低頭屈曲45°,每次5 h,每日1 次,持續(xù)12 周來建立頸型頸椎病模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。 目前所采用的頸型頸椎病動(dòng)物造模方法多以白兔長時(shí)間低頭屈曲為基礎(chǔ)進(jìn)行改良,這類實(shí)驗(yàn)?zāi)7麻L期伏案工作、學(xué)習(xí)及長時(shí)間待在低溫空調(diào)房的人群, 通過檢測相關(guān)指標(biāo),證實(shí)坐臥姿勢不規(guī)范、生活習(xí)慣欠佳、機(jī)體持久勞損是頸型頸椎病發(fā)病的主要原因。

    2.2 神經(jīng)根型頸椎病 神經(jīng)根型頸椎病的臨床發(fā)病率在50%~60%,是最常見的頸椎病類型,該病主要是由于骨質(zhì)增生、頸椎間盤退行性改變造成頸神經(jīng)根壓迫,引發(fā)頸、肩部麻木疼痛及功能障礙[8]。構(gòu)建理想的動(dòng)物模型是研究該類頸椎病的前提,對臨床治療此類頸椎病有著重大意義。

    2.2.1 椎管插線法 SUN 等[9]采用椎管插線法對大鼠頸脊髓神經(jīng)根造成持續(xù)性的擠壓以建立大鼠神經(jīng)根型頸椎病模型,操作方法:大鼠麻醉、固定,剃凈頸部及背部周圍毛發(fā),常規(guī)消毒,在頸部C4~T1區(qū)作一約3.5 cm 的中線切口,逐層分離皮下組織及頸后部肌群以充分顯露C4~C6椎板,刮凈表面附著物,切除C5~C6及C6~C7的黃韌帶,去除C6椎板的骨膜,在C6椎板下植入長15 mm、直徑0.5 mm的尼龍漁線,逐層閉合、縫合傷口,預(yù)防感染。 粟勝勇等[10]亦采用此法,在充分顯露C6~T2椎弓板并清除周圍組織的基礎(chǔ)上,暴露脊髓,執(zhí)顯微外科鑷將滅菌漁線沿脊髓縱向插入至C6、C7、T1神經(jīng)根腋下。此造模方法造模后大鼠周圍神經(jīng)異常癥狀出現(xiàn)較快,但因尼龍漁線壓迫力度較弱,導(dǎo)致癥狀持續(xù)性差,故此法較適用于急性期神經(jīng)根型頸椎病的研究。

    2.2.2 單純機(jī)械性壓迫 張忠亮等[11]采用將消毒滅菌的硅膠片直接壓迫頸神經(jīng)根,成功建造神經(jīng)根型頸椎病動(dòng)物模型,操作方法:大鼠麻醉、固定,剃毛、消毒后沿C7棘突向上取頸部正中約4 cm 長切口,使C6椎板充分顯露,執(zhí)止血鉗咬除部分椎板及關(guān)節(jié)突,暴露神經(jīng)根,將消毒滅菌的硅膠片輕置于C6神經(jīng)根與硬膜囊交界處的下腋側(cè), 縫合包扎傷口,造模完畢。 SMITH 等[12]亦根據(jù)單純性機(jī)械刺激頸神經(jīng)根的造模方法, 通過剝離麻醉后大鼠C6、C7椎旁肌肉,咬除C6、C7部分椎板及關(guān)節(jié)突,充分顯露C7神經(jīng)根,后用10 gf 微血管夾壓迫神經(jīng)根15 min,術(shù)后采用測量大鼠同側(cè)前爪掌面對機(jī)械性刺激的痛覺敏感程度來評價(jià)該模型的可靠性。 LIU 等[13]則采用不銹鋼柱插入錐間孔中造成持續(xù)性壓迫來建立神經(jīng)根型頸椎病模型,從而探討其疼痛機(jī)制。

    2.2.3 機(jī)械性壓迫與炎癥刺激協(xié)同 金哲峰等[14]通過采用持續(xù)性機(jī)械性壓迫和炎性刺激大鼠,模擬慢性頸椎間盤及關(guān)節(jié)的雙重退變,以此建立神經(jīng)根型頸椎病動(dòng)物模型,并通過行為學(xué)、影像學(xué)、電生理學(xué)等證實(shí)該模型建造的實(shí)驗(yàn)意義。 操作方法:大鼠麻醉、固定,剃除頸背部周圍毛發(fā),常規(guī)消毒,于頸正中線取一4 cm 長切口,逐層切開皮膚、皮下組織及脊柱旁肌肉,使兩側(cè)關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)充分顯露,用34號鈍圓針頭接通輸液泵以4 μL/min 的速度依次注入膠原蛋白酶(每個(gè)關(guān)節(jié)注入5 μL)至C5/C6、C6/C7關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié),注入完畢,切除頸骼肋肌與半頭棘肌,再依次切斷頸背部深肌群頸夾肌及頭、頸、寰最長肌及C2~C7棘上和棘間韌帶,無菌閉合傷口,予青霉素抗感染。田園等[15]用浸有甲醛的定量濾紙片壓迫并刺激大鼠C7神經(jīng)根,模仿炎癥性神經(jīng)根型頸椎病的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?zāi)P徒ㄔ臁?此類模型運(yùn)用了藥物介導(dǎo)與機(jī)械壓迫刺激手段進(jìn)行建立,手術(shù)操作過程簡單、安全,且造模成功的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物存活率較高。

    2.3 脊髓型頸椎病 脊髓型頸椎病是由于頸椎結(jié)構(gòu)的退行性改變導(dǎo)致椎管狹窄、脊髓慢性壓迫與功能障礙,進(jìn)而引發(fā)相應(yīng)的臨床癥狀,可使脊髓功能發(fā)生損傷,甚者導(dǎo)致肢體殘疾[16]。

    2.3.1 螺釘壓迫法 螺釘壓迫法是于頸前路或頸后路置入螺釘,進(jìn)行長時(shí)間壓迫動(dòng)物頸脊髓以建立脊髓型頸椎病動(dòng)物模型。 施立奇等[17]通過C2后路螺釘壓迫法建立脊髓損傷模型: 家兔常規(guī)消毒麻醉,取C2后側(cè)入路,于棘突正中執(zhí)咬骨鉗咬一“V”型骨缺損,先使用自攻螺釘于缺口處向椎板攻絲,然后改用平頭螺釘緩慢擰入造成壓迫。趙玲等[18]采用骨水泥壓迫釘置入頸前路C3椎體前方, 持續(xù)擠壓頸脊髓以模擬人脊髓型頸椎病發(fā)病機(jī)理。 此類造模方法操作過程相對簡單易行, 模型重復(fù)性良好,但是造模過程容易引發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡。

    2.3.2 球囊壓迫法 此法是在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物椎管內(nèi)置入可控壓力的球囊,隨壓力的逐漸增大對脊髓產(chǎn)生進(jìn)行性壓迫,進(jìn)而模擬脊髓型頸椎病患者的發(fā)病過程。 沈?qū)毩嫉龋?9]選用山羊?yàn)槟P蛣?dòng)物,使用球囊壓迫裝置經(jīng)頸椎前路手術(shù)將其固定在C3椎體內(nèi),術(shù)后通過外置注射器向球囊內(nèi)注入0.1 mL 碘海醇造影劑,1 周1 次,持續(xù)12 周,以此建立山羊脊髓型頸椎病模型。 此類造模方法多適用于犬、羊、豬等大型動(dòng)物,死亡率較低。

    2.3.3 植入法 楊宇等[20]采用大鼠自體骨植入法建造脊髓型頸椎病動(dòng)物模型:暴露大鼠頸椎骨面,自C7基底部離斷棘突,取出并清除表面組織置于一旁備用;咬除C5或C6部分椎板,繼而取備好的、大小相應(yīng)的骨塊植入椎間隙,向椎管內(nèi)盡量嵌壓直到大鼠上肢出現(xiàn)反射性抽動(dòng),術(shù)畢肌注青霉素預(yù)防感 染。 YOSHIZUMI 等[21]在 其 慢 性 頸 脊 髓 壓 迫 模 型中通過在大鼠的C5~C6椎板下植入聚氨酯薄板,使其通過吸水逐漸膨脹以實(shí)現(xiàn)遲發(fā)性壓迫性脊髓型頸椎病的發(fā)生。 除上述植入物外,還有采用植入硅膠顆粒[22]、緩 慢 膨 脹 型 橡 膠[23]、聚 乙 烯 醇 丙 烯 酰 胺互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠[24]等進(jìn)行脊髓型頸椎病的造模。

    2.3.4 注射法 戎利民等[25]在X 線指引下經(jīng)短毛豚鼠頸椎前路于C4~C5或C5~C6間隙距離椎體后緣5 mm 處插入4 號空針, 深度約2~3 mm, 注入0.1 mL 重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(rhBMP-2)/載體(PVP)復(fù)合物,對頸脊髓造成慢性持續(xù)性壓迫,術(shù)后8 周觀察發(fā)現(xiàn)短毛豚鼠頸脊髓受壓變形符合脊髓型頸椎病的椎體改變。楊家祥等[26]亦采用類似的造模方法,在大鼠頸椎間隙后緣注入重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白與載體的復(fù)合制劑, 持續(xù)性擠壓頸段脊髓,使椎間盤逐漸發(fā)生退變。

    2.3.5 體外遙控壓迫裝置 李梓赫等[27]認(rèn)為傳統(tǒng)的慢性脊髓壓迫模型存在手術(shù)創(chuàng)傷、感染風(fēng)險(xiǎn)大及可控性差等問題,為此,他們采用一種通過體外藍(lán)牙調(diào)控體內(nèi)椎間壓力的裝置來建立慢性頸脊髓壓迫模型。 將成年小尾寒羊麻醉固定后,經(jīng)其頸前路在X 線確認(rèn)下切除C2/C3椎間盤直至椎體后緣,刮除椎體兩側(cè)終板, 該缺損與壓迫裝置大致等同,于椎間隙缺損處置入壓迫裝置,固定并將推桿頭部置于椎體后緣,之后將體內(nèi)控制模塊埋入皮下,術(shù)后每2 天推進(jìn)壓迫裝置一次,每次推進(jìn)0.1 mm,定期觀察發(fā)現(xiàn)成年小尾寒羊的頸脊髓發(fā)生損壞。 體外遙控壓迫裝置是脊髓型頸椎病造模的一種新嘗試,具有可控性好、可重復(fù)性高的優(yōu)點(diǎn),且建模過程只需手術(shù)操作1 次,造模費(fèi)用低,可大范圍推廣應(yīng)用。

    2.4 椎動(dòng)脈型頸椎病 椎動(dòng)脈型頸椎病是由于頸椎發(fā)生退行性改變,導(dǎo)致椎動(dòng)脈血流障礙,進(jìn)而引起腦供血不足的一種頸椎病類型,臨床上約70%的頸椎病發(fā)病伴有椎動(dòng)脈受累的表現(xiàn)[28]。因此對該類頸椎病的治療研究同樣至關(guān)緊要,而良好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立必不可少。

    2.4.1 注射組織硬化劑法 WANG 等[29]使用10 mL硬化劑消痔靈注射于家兔左側(cè)C3~C5頸椎橫突側(cè)面,第2 周和第4 周各重復(fù)1 次。 造模結(jié)束后用激光多普勒測量儀測定家兔頸椎動(dòng)脈血流量,結(jié)果顯示造模家兔的椎動(dòng)脈血流量明顯減少,說明該模型成立。 此項(xiàng)造模方法簡單、有效,是現(xiàn)今椎動(dòng)脈型頸椎病應(yīng)用相對廣泛的模型構(gòu)建方法。

    2.4.2 植骨壓迫法 宋敏等[30]將大鼠經(jīng)腹腔麻醉后,于其頸背部取一正中縱形切口,充分開放右側(cè)頸部肌肉,暴露C5、C6椎體及橫突,切除橫突骨翼,緩慢分離椎動(dòng)脈內(nèi)側(cè)骨膜直到椎體后方,后將骨塊植入骨膜下間隙,逐層縫合,止血包扎。 最終通過檢測大鼠焦慮抑郁度、神經(jīng)精神緊張度以及學(xué)習(xí)記憶能力等驗(yàn)證植骨壓迫法建造椎動(dòng)脈型頸椎病的模型具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2.4.3 瘀血阻絡(luò)法 該法是直接取同種異體動(dòng)物的血液制成瘀血直接注入模型動(dòng)物的頸夾肌及頭夾肌內(nèi),使其瘀血阻絡(luò),引發(fā)一系列椎動(dòng)脈型頸椎病的癥狀表現(xiàn)。 LIU 等[31]在前人研究的基礎(chǔ)上使用直接誘發(fā)造模法復(fù)制椎動(dòng)脈型頸椎病動(dòng)物模型,取25%的生理鹽水與同種屬異體家兔的耳正中動(dòng)脈血等比混合,往家兔一側(cè)頸夾肌、橫突間肌及橫突棘肌的肌內(nèi)與肌間隙分別注入,共注射9 mL,在注射前及注射后2 周進(jìn)行彩色超色檢測,發(fā)現(xiàn)該側(cè)椎動(dòng)脈血流速度明顯減小,表明造模有效。

    2.4.4 力學(xué)平衡失調(diào) 在模擬椎間盤病變造成的椎動(dòng)脈型頸椎病時(shí),SUN 等[32]根據(jù)動(dòng)靜力平衡失調(diào)原理,將麻醉大鼠固定、消毒,于頸背部正中取一切口,依次切斷頸闊肌、頭頸寰最長肌、頸髂肋肌及頭半棘肌,并同時(shí)剪斷C2~C7椎體棘上韌帶和棘間韌帶,造成頸椎力學(xué)平衡失調(diào)。 逐層縫合傷口,3 個(gè)月后處死大鼠取其C4/C5、C5/C6椎間盤,經(jīng)蘇木精和伊紅染色制成切片在光鏡下觀察發(fā)現(xiàn)造模后大鼠頸椎間盤形態(tài)發(fā)生改變,出現(xiàn)纖維環(huán)紊亂、髓核萎縮,說明此造模方法具有實(shí)驗(yàn)意義。 YIN 等[33]亦采用此法來建立大鼠動(dòng)靜力失衡的椎動(dòng)脈型頸椎病模型, 其造模方法中除切斷上述肌群及韌帶外,還同時(shí)切斷頸斜方肌、菱形肌、淺層及深部肌肉,且分別切除1.5 cm 以防止愈合,數(shù)月后通過免疫組織化學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)大鼠頸椎間盤出現(xiàn)退行性改變,說明模型成立。

    2.4.5 椎動(dòng)脈結(jié)扎法 此法是指通過對一側(cè)椎動(dòng)脈進(jìn)行離斷、夾閉或結(jié)扎使該側(cè)椎動(dòng)脈供血不足,最終形成椎動(dòng)脈型頸椎病。郭帥等[34]在家兔胸骨頸靜脈切跡上方作一橫型切口,尋找并分離右側(cè)臂叢神經(jīng),進(jìn)而找到右側(cè)椎動(dòng)脈第一段,將其分離,按照先近心端、后遠(yuǎn)心端的順序進(jìn)行縫線結(jié)扎,然后在結(jié)扎部位離斷椎動(dòng)脈,縫合包扎。 通過免疫組織化學(xué)染色觀察及qRT-PCR 結(jié)果分析此種方法造模成功率達(dá)93%以上。

    2.4.6 混合法 混合法即是上述2 種或多種造模方法結(jié)合形成,目前應(yīng)用造模效果良好。 如李清林等[35]在其實(shí)驗(yàn)研究中將一側(cè)力學(xué)平衡失調(diào)法與對側(cè)骨膜下植骨壓迫法相結(jié)合,通過切除大鼠左側(cè)頸闊肌、頸斜方肌、頸部夾肌、頭頸菱形肌、最長肌、頸髂肋肌、半棘肌,以及切斷頸闊肌、頭頸寰最長肌等造成大鼠左側(cè)肌力失衡, 同時(shí)分離對側(cè)C5、C6椎體前頸長肌,將骨塊植入已經(jīng)分離的椎動(dòng)脈骨膜下間隙,造成持續(xù)壓迫,造模結(jié)束后通過曠場實(shí)驗(yàn)觀察造模后大鼠站立次數(shù)、運(yùn)動(dòng)距離、修飾次數(shù)等均顯著減少,表明造模成功。 賈力莉等[36]在研究芪葛止眩顆粒對椎動(dòng)脈型頸椎病的療效時(shí),采用動(dòng)力平衡失調(diào)法合并注射硬化劑法來復(fù)制模型,在常規(guī)切除頸部部分肌肉組織造成左側(cè)頸部動(dòng)力失衡的基礎(chǔ)上,于術(shù)后第2 周、第4 周在左橫突側(cè)面分別注入消痔靈注射液2 mL、1 mL,通過拍攝頸椎X 線片及檢測椎基底動(dòng)脈血流、血液流變學(xué)驗(yàn)證椎動(dòng)脈型頸椎病模型是否成模。 現(xiàn)如今對椎動(dòng)脈型頸椎病的研究與時(shí)俱進(jìn),造模方法也日益成熟,混合造模法的模型復(fù)制成功率也逐漸升高。

    3 總 結(jié)

    現(xiàn)今面臨著時(shí)代進(jìn)步帶來的壓力和挑戰(zhàn),人類罹患頸椎病的年齡逐漸趨向年輕化,對于頸椎病治療的研究顯得越發(fā)重要。 出于倫理道德方面的考慮, 實(shí)驗(yàn)通常建立動(dòng)物模型來模擬人頸椎病的發(fā)生、發(fā)展,探討該病的預(yù)防與治療。 當(dāng)前采用實(shí)驗(yàn)性誘發(fā)、復(fù)制頸椎病動(dòng)物模型的方法多種多樣,已經(jīng)能基本模擬各種類型頸椎病的病因及發(fā)病機(jī)制,滿足實(shí)驗(yàn)要求,但總結(jié)當(dāng)前已經(jīng)報(bào)道的各種頸椎病動(dòng)物模型,仍可發(fā)現(xiàn)尚具有以下不足:①造模方法單一,缺乏綜合模擬模型:目前實(shí)驗(yàn)中的造模方式多以單一動(dòng)物或單一操作方法為主,雖然造模過程較為簡單易行,但尚不能實(shí)現(xiàn)頸椎病發(fā)展過程中呈現(xiàn)的復(fù)雜性、全面性及不可控性;②造模時(shí)間較長:總結(jié)發(fā)現(xiàn)近年報(bào)道的頸椎病動(dòng)物造模時(shí)間多為每天4~6 h,持續(xù)2~3 月,造模周期仍較長;③動(dòng)物存活率偏低:手術(shù)創(chuàng)傷、術(shù)后感染、造模動(dòng)物焦躁不安等因素仍持續(xù)影響造模動(dòng)物的存活率;④缺乏頸椎病中醫(yī)證候動(dòng)物模型的制備:現(xiàn)階段中醫(yī)對頸椎病的治療療效顯著,中醫(yī)治療得到患者的滿意與推崇,但實(shí)驗(yàn)對研究中醫(yī)證候分型方面的頸椎病模型制備方法仍較缺乏,不能為中醫(yī)藥治療頸椎病提供充分有效的科學(xué)研究依據(jù)。 因此,對頸椎病動(dòng)物模型的創(chuàng)立可向更深、更全面的層次發(fā)展,從頸椎病多種復(fù)雜病因、發(fā)病機(jī)制、生理病理結(jié)構(gòu)擴(kuò)展到研究分子生物學(xué)、力學(xué)及中醫(yī)證候表現(xiàn)等方面,建立公認(rèn)的可行性佳、重復(fù)率高、綜合模擬性高的頸椎病動(dòng)物模型,充分研究和發(fā)揮中醫(yī)藥與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)相結(jié)合的優(yōu)勢與展望。

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