重癥肺炎肺泡灌洗液中IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平與預(yù)后的相關(guān)性

劉國(guó)麗 尚 妍 郭瑞萍

作者單位：河南省新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院 呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科 453000

肺炎是一種常見(jiàn)的呼吸道感染性疾病，主要癥狀為咳嗽、咳痰、渾身乏力等。重癥肺炎患者可伴隨肝腎功能衰竭、意識(shí)障礙以及呼吸困難等癥狀［1］。目前針對(duì)重癥肺炎主要是采取抗生素抗感染治療，但是由于患者存在個(gè)體差異，因此預(yù)后也不同［2］。隨著病理生理學(xué)研究的深入，發(fā)現(xiàn)炎癥因子在引起肺炎病情加重中起到了重要作用［3］。有研究發(fā)現(xiàn)，重癥肺炎患者與其他呼吸道疾病患者相比，炎癥因子水平與患者炎癥程度和預(yù)后情況有密切的相關(guān)性，重癥肺炎患者的炎癥因子表達(dá)水平明顯升高［4，5］。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，旨在分析重癥肺炎肺泡灌洗液中白細(xì)胞介素8（IL-8）、白細(xì)胞介素10（IL-10）、高遷移率族蛋白B1（HMGB1）、Toll樣受體4（TLR4）水平與預(yù)后的相關(guān)性，報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年2月至2019年2月我院收治的45例重癥肺炎患者作為觀察組，其中男性26例，女性19例；年齡56～88歲，平均（67.3±4.3）歲；入選患者均符合重癥肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)。選取同時(shí)間段45例慢性支氣管炎患者作為對(duì)照組，其中男性25例，女性20例；年齡55～89歲，平均（68.6±4.7）歲。所有患者或家屬對(duì)本研究知情并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：長(zhǎng)期使用激素、合并惡性腫瘤、免疫性疾病以及肺泡灌洗禁忌證的患者。兩組患者在一般資料方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 方法 肺泡灌洗液采集方法：行支氣管肺泡灌洗，取右肺中葉或左肺舌葉為灌洗部位并采集灌洗液。按照肺泡灌洗標(biāo)準(zhǔn)操作，使用150ml無(wú)菌生理鹽水分3次通過(guò)纖維支氣管鏡插入灌洗導(dǎo)管灌入肺泡，然后負(fù)壓回吸，回收液回收率＞40%即可。

1.3 觀察指標(biāo) ①兩組患者均行肺泡灌洗并采集灌洗液檢測(cè)IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平。采用ELISA 法檢測(cè)IL-8、IL-10、HMGB1水平，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作；TLR4采用熒光定量PCR分析儀測(cè)定，按照默認(rèn)反應(yīng)程序進(jìn)行反應(yīng)。②根據(jù)觀察組患者的預(yù)后情況分為好轉(zhuǎn)組（38例）與惡化組（7例），分析上述觀察指標(biāo)與重癥肺炎患者預(yù)后的相關(guān)性。③預(yù)后判斷標(biāo)準(zhǔn)：好轉(zhuǎn)：經(jīng)治療后患者的臨床癥狀、體征以及實(shí)驗(yàn)室檢查均恢復(fù)正?；蚝棉D(zhuǎn)；惡化：經(jīng)治療后病情無(wú)明顯變化甚至加重。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用（）表示，組間差異采用獨(dú)立樣本t值檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析，P＜0.05時(shí)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 兩組患者肺泡灌洗液IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平差異 觀察組肺泡灌洗液IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組患者肺泡灌洗液IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平差異

2.2 好轉(zhuǎn)組與惡化組肺泡灌洗液IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平差異 好轉(zhuǎn)組肺泡灌洗液IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平均明顯低于惡化組（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 好轉(zhuǎn)組與惡化組肺泡灌洗液IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平差異

2.3 IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平與重癥肺炎患者預(yù)后的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平與重癥肺炎患者的預(yù)后均呈顯著正相關(guān)（P＜0.01），見(jiàn)表3。

表3 IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平與重癥肺炎患者的預(yù)后的相關(guān)性分析

3.討論

肺炎通常是由細(xì)菌或病毒感染引起的肺部炎癥反應(yīng)，具有較高的發(fā)生率，在急性下呼吸道感染中的發(fā)生率位居首位，因此主要是采取抗感染治療［6］。重癥肺炎患者的臨床癥狀嚴(yán)重，常伴隨多器官功能障礙綜合征，采用單純抗生素治療雖然有一定的效果，但是部分患者仍出現(xiàn)死亡結(jié)局，有統(tǒng)計(jì)學(xué)指出重癥肺炎的死亡率超過(guò)50%，對(duì)患者的健康和生命造成了巨大威脅［7］。因此需要進(jìn)一步探討影響重癥肺炎預(yù)后的相關(guān)因素。

感染發(fā)生后會(huì)激發(fā)促炎因子表達(dá)，例如白細(xì)胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等，能夠有效清除微生物，加速組織修復(fù)，同時(shí)也會(huì)釋放白細(xì)胞介素-10（IL-10）等抑炎因子，能夠緩解炎癥反應(yīng)［8］。若促炎因子與抑炎因子平衡，能夠維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定性，反之可引起全身炎癥反應(yīng)或抗炎綜合征。從生理學(xué)角度來(lái)看，這是機(jī)體預(yù)防機(jī)制過(guò)度激活引起的，而不是病毒或細(xì)菌引發(fā)的結(jié)果［9］。臨床研究［10］發(fā)現(xiàn)，促炎因子IL-6與抑炎因子IL-10的表達(dá)水平與肺炎患者的預(yù)后有密切的相關(guān)性，肺炎患者與健康對(duì)照組相比，血清IL-6、IL-10的表達(dá)水平明顯更高（P＜0.05），說(shuō)明肺炎患者與健康人相比體內(nèi)存在強(qiáng)烈的促炎反應(yīng)和抑炎反應(yīng)。重癥肺炎患者由于肺部感染嚴(yán)重程度更高，引起全身性炎癥反應(yīng)。

IL-6主要是由激活的巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞以及上皮細(xì)胞分泌，其在急性炎癥反應(yīng)中主要表現(xiàn)為促炎作用，能夠誘導(dǎo)肝組織產(chǎn)生急性反應(yīng)蛋白，在膿毒血癥臨床診斷和治療中具有較好的應(yīng)用效果，能夠有效評(píng)估患者的預(yù)后［11］。IL-10主要是由B細(xì)胞刺激激活的一種抑炎因子，能夠抑制免疫應(yīng)答反應(yīng)，抑制多種細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子的合成，例如IL-1和TNF等，通過(guò)T輔助細(xì)胞降低炎癥反應(yīng)，抑制IL-6以及TNF-α的過(guò)度表達(dá)，減輕炎癥瀑布反應(yīng)對(duì)機(jī)體造成的損傷［12］。肺部IL-10下降會(huì)導(dǎo)致TNF表達(dá)水平升高，有助于細(xì)菌清除。本研究中兩組肺泡灌洗液中IL-8分別為（579.66±135.64）pg／ml和（330.42 ± 86.53）pg／ml，IL-10 分別為（5.61±1.64）pg／ml和（4.23 ± 1.13）pg／ml，說(shuō)明重癥肺炎患者肺部的促炎反應(yīng)與抑炎反應(yīng)要明顯高于慢性支氣管炎患者；好轉(zhuǎn)組與惡化組肺泡灌洗液中IL-8分別為（452.01±105.56）pg／ml和（635.24 ±176.57）pg／ml，IL-10 分別為（4.01 ±1.06）pg／ml和（6.38 ±1.59）pg／ml，這說(shuō)明好轉(zhuǎn)組肺部促炎反應(yīng)和抑炎反應(yīng)要明顯低于惡化組，證實(shí)了肺部促炎反應(yīng)與抑炎反應(yīng)與重癥肺炎患者的預(yù)后有密切的相關(guān)性，當(dāng)肺部促炎反應(yīng)與抑炎反應(yīng)異常升高時(shí)，患者的預(yù)后也更差。

重癥肺炎具有進(jìn)展速度快、病情危重的特點(diǎn)，患者可在發(fā)病后短時(shí)間內(nèi)發(fā)生呼吸衰竭、肝腎衰竭等并發(fā)癥，增加了患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)。除了與致病微生物產(chǎn)生的毒素以及代謝產(chǎn)物有關(guān)之外，免疫機(jī)制引起的二次損傷也在重癥肺炎患者病情進(jìn)展中起到了重要作用［13］。免疫機(jī)制的過(guò)度激活導(dǎo)致炎癥因子表達(dá)水平過(guò)高，從而引起全身炎癥反應(yīng)以及多器官功能障礙等并發(fā)癥，其中HMGB1起到了重要作用，與患者的預(yù)后密切相關(guān)。高遷移率族蛋白B1（HMGB1）是一種高度保守的核蛋白，一般情況存在于細(xì)胞核中，當(dāng)細(xì)胞壞死之后HMGB1機(jī)會(huì)逸出并形成炎性刺激因子，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞分泌促炎因子，而這些促炎因子會(huì)作用于HMGB1，使HMGB1表達(dá)水平進(jìn)一步升高，形成惡性循環(huán)，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)不斷加重。有研究指出，在重癥肺炎的發(fā)展中HMGB1的異常升高可加重肺部損傷嚴(yán)重程度［14］。TLR是病原相關(guān)分子的模式受體，其中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的成員有10個(gè)，與肺炎相關(guān)成員主要為TLR2和TLR4。脂肪酶與靶細(xì)胞經(jīng)TLR4作用后，可導(dǎo)致細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑激活轉(zhuǎn)錄因子，引起免疫反應(yīng)清除病原微生物。同時(shí)在脂肪酶的作用下，炎癥因子表達(dá)水平升高。本次研究中兩組肺泡灌洗液中HMGB1分別為（3.62 ±1.06）μg／ml和（2.85 ±0.76）μg／ml，TLR4 分別為（1.65 ± 0.18）ng／ml 和（1.10 ±0.15）ng／ml，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這說(shuō)明重癥肺炎患者肺部炎癥反應(yīng)明顯高于慢性支氣管炎患者；好轉(zhuǎn)組與惡化組肺泡灌洗液中HMGB1 分別為（3.15 ±0.89）μg／ml和（4.73 ±1.13）μg／ml，TLR4 分別為（1.36 ± 0.13）ng／ml和（1.71 ±0.16）ng／ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明隨著HMGB1、TLR4 表達(dá)水平的升高，患者炎癥反應(yīng)加重，從而影響了患者的預(yù)后。

臨床醫(yī)學(xué)發(fā)現(xiàn)，大量中性粒細(xì)胞肺內(nèi)聚集是引起肺炎患者急性肺損傷的主要原因，且各種促炎因子和抑炎因子表達(dá)水平升高，導(dǎo)致免疫機(jī)制引起的二次損傷加重，是導(dǎo)致肺炎患者病情加重的重要因素，因此通過(guò)觀察患者的炎癥因子水平能夠有效評(píng)估重癥肺炎患者的預(yù)后［15］。通過(guò)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4 水平與重癥肺炎患者的預(yù)后均呈顯著正相關(guān)，這說(shuō)明重癥肺炎患者的肺部炎癥反應(yīng)程度與患者的預(yù)后有密切相關(guān)性，促炎因子過(guò)度表達(dá)引起抑炎因子表達(dá)水平升高，但過(guò)度抗炎又會(huì)引起免疫機(jī)制的二次損傷，從而對(duì)患者的預(yù)后造成影響。因此在臨床治療中需要密切觀察患者肺部炎癥反應(yīng)情況，盡早采取有針對(duì)性的干預(yù)措施，改善患者的炎癥因子水平，有助于改善患者的預(yù)后，降低重癥肺炎患者的死亡率。

綜上所述，重癥肺炎肺泡灌洗液中IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平與患者的預(yù)后有密切的相關(guān)性，IL-8、IL-10、HMGB1、TLR4水平越高，重癥肺炎患者的預(yù)后越差，因此需要加強(qiáng)臨床觀察，采取積極的治療措施，改善患者的預(yù)后。