奶牛乳房炎診斷技術(shù)淺析

張紅秋

（遼寧省朝陽市凌源市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所遼寧朝陽 122500）

奶牛乳房炎又稱乳腺炎，這種炎癥的發(fā)病率比較高，并且發(fā)病范圍也比較廣，是一種由化學(xué)、物理或者微生物等刺激所產(chǎn)生的一種炎癥，給奶牛業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。防治乳房炎受到各國的普遍重視，有效控制奶牛乳房炎，對(duì)提高奶牛生產(chǎn)性能、減少經(jīng)濟(jì)損失及促進(jìn)奶業(yè)健康持續(xù)發(fā)展具有極其重要的意義。

1 奶牛乳房炎的主要致病菌

90%以上的奶?；既榉垦锥际怯捎诖竽c桿菌、鏈球菌以及金黃色葡萄球菌引起的。尤其是金黃色葡萄球菌對(duì)于奶牛乳房炎的影響最為強(qiáng)烈，普遍存在于全國各地的奶牛養(yǎng)殖場。金黃色葡萄球菌具有很強(qiáng)的免疫抑制力，通常在奶牛乳房炎發(fā)病的高峰期感染奶牛，被感染的個(gè)體大多數(shù)情況下發(fā)病較慢，并且具有復(fù)發(fā)率高以及治愈困難的特點(diǎn)，給奶牛的養(yǎng)殖企業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

真菌、細(xì)菌以及病毒等都是奶牛乳房炎的致病菌，其中細(xì)菌是最為主要的致病菌。根據(jù)相關(guān)報(bào)道，在奶牛乳房炎的病例中檢測(cè)出了除金黃葡萄球菌外的130 多種微生物，與奶牛乳房炎的發(fā)病有關(guān)的細(xì)菌可以被分為兩種類型：傳染型和環(huán)境型。傳染型細(xì)菌以化膿性假單胞菌、金黃的葡萄球菌、支原體以及無乳鏈球菌為主。環(huán)境型細(xì)菌主要是克雷伯氏菌、大腸桿菌以及綠膿桿菌。在奶牛養(yǎng)殖的過程中，為了獲得最大的經(jīng)濟(jì)效益，要對(duì)奶牛的乳房炎疾病進(jìn)行嚴(yán)格的防控，所以了解并鑒定其致病病原體是非常重要的一項(xiàng)工作，需要給予足夠的重視。

2 奶牛乳房炎相關(guān)診斷辦法

2.1 乳房炎相關(guān)診斷辦法概況

奶牛的乳房炎目前主要有兩種類型，分別是亞臨床型乳房炎和臨床型乳房炎，其中亞臨床型乳房炎也稱作隱性乳房炎。在奶牛的實(shí)際養(yǎng)殖過程中，臨床型的乳房炎是比較容易通過肉眼的觀察來實(shí)現(xiàn)診斷的，所以對(duì)于亞臨床乳房炎的診斷是研究的主要課題。目前，亞臨床型乳房炎檢測(cè)方式通常存在耗時(shí)較長、假陰性結(jié)果多并且靈敏度不高的特點(diǎn)。在實(shí)際投入應(yīng)用的鑒定方式中，微生物培養(yǎng)是一項(xiàng)黃金標(biāo)準(zhǔn)，盡管抗生素對(duì)于生物體具有很多的優(yōu)勢(shì)，但是對(duì)病原菌的鑒定并不穩(wěn)定，這種方法具有較大的變異性，所以在培養(yǎng)乳房以及乳汁等樣品中，微生物培養(yǎng)的鑒定方式出現(xiàn)了25%～55%的假陰性。

目前，國內(nèi)外一些學(xué)者針對(duì)傳統(tǒng)鑒定方法的缺點(diǎn)進(jìn)行了許多深入研究，以期望實(shí)現(xiàn)對(duì)奶牛乳房炎進(jìn)行更好的防控。比如大量關(guān)于納米技術(shù)、生物傳感技術(shù)以及紅外技術(shù)的研究相繼開展，并且陸續(xù)在該領(lǐng)域內(nèi)應(yīng)用。但是目前的檢測(cè)技術(shù)仍然存在缺點(diǎn)，需要更深入的研究與實(shí)踐才可以更好地在奶牛乳房炎的實(shí)際防控工作中發(fā)揮作用。在一些新興技術(shù)中，被獸醫(yī)以及人醫(yī)領(lǐng)域都受到重視的是實(shí)時(shí)熒光多重PCR 技術(shù)，該技術(shù)是目前診斷奶牛乳房炎最合適的替代方式，具有準(zhǔn)確、快速、高靈敏度以及高特異的特點(diǎn)。

2.2 紅外技術(shù)診斷奶牛乳房炎

根據(jù)相關(guān)研究，證實(shí)了致病因子的毒力對(duì)乳房炎的炎癥反應(yīng)具有一定的影響，但需要通過更深入的研究才能確定乳腺炎與相關(guān)促炎因子的具體作用原理。由相關(guān)報(bào)道可知基于對(duì)生物體DNA 識(shí)別，將已知物種的光譜與參考數(shù)據(jù)庫進(jìn)行對(duì)照，可以將關(guān)系相近的物種區(qū)分開。除此之外，大量研究證明，傅里葉變換紅外光譜技術(shù)是調(diào)查流行病與污染源追蹤的一個(gè)有力手段。基于該系統(tǒng)的技術(shù)一旦被建立，就可以使用最低的成本準(zhǔn)確地實(shí)現(xiàn)乳腺病原體的檢測(cè)，以此來實(shí)現(xiàn)對(duì)乳房炎進(jìn)行及時(shí)的診斷。

2.3 生物傳感技術(shù)診斷奶牛乳房炎

奶牛在發(fā)病與治療前的行為變化也是診斷必不可少的關(guān)注因素，研究發(fā)現(xiàn)奶牛的總體活動(dòng)與采食量在出現(xiàn)癥狀的前幾天會(huì)發(fā)生明顯的變化，所以可以將這些變化作為檢測(cè)的指標(biāo)。目前有學(xué)者研發(fā)了一個(gè)自動(dòng)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，這種系統(tǒng)可以記錄反芻動(dòng)物的自身健康與活動(dòng)。另有一批學(xué)者也發(fā)明了一種智能監(jiān)控方面的監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，這種系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)在發(fā)病前幾天對(duì)奶牛的診斷，但是要大量應(yīng)用于實(shí)際還需進(jìn)一步提高其敏感性與特異性。

2.4 分子診斷技術(shù)檢測(cè)奶牛乳房炎

使用常規(guī)的檢測(cè)方法不能達(dá)到良好的效果時(shí)可以使用分子診斷技術(shù)，分子診斷技術(shù)包括PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）和LAMP（環(huán)介導(dǎo)）等技術(shù)，這些技術(shù)都是基于檢測(cè)核酸以及病原體的基因組序列。PCR可以檢測(cè)病毒與霉菌，并且可以檢測(cè)出抗性基因。多重實(shí)時(shí)的PCR技術(shù)可以對(duì)DNA 進(jìn)行定量分析，用50℃去污染3min，95℃預(yù)變性3min，95℃11s 擴(kuò)增并且65℃42s 退火等進(jìn)行40 多個(gè)循環(huán)。LAMP可以在一定溫度下將靶基因擴(kuò)增，可以實(shí)現(xiàn)65min 內(nèi)準(zhǔn)確有效地檢測(cè)出病原體，特別適用于快速檢測(cè)金黃色葡萄球菌。

3 總結(jié)

近年來隨著奶牛養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，奶牛乳房炎的問題也在很大程度上給養(yǎng)殖企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益造成了損失。在診斷奶牛乳房炎方面，許多學(xué)者進(jìn)行了大量的研究，特別在蛋白重組與基因?qū)W方面取得了很大的進(jìn)步。目前多重實(shí)時(shí)PCR 檢測(cè)是比較有效的檢測(cè)方式，但是對(duì)其推廣不夠，因此，有必要將這些有效技術(shù)進(jìn)行推廣應(yīng)用，以實(shí)現(xiàn)奶牛乳房炎的有效診斷。