HSP70 TNF-α IL-4 與妊娠期高血壓患者體液免疫的關(guān)系研究

王 影， 洪海漫， 孟 斐

(沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院產(chǎn)科, 遼寧 沈陽(yáng) 110024)

妊娠期高血壓是指妊娠期出現(xiàn)的高血壓，主要表現(xiàn)為蛋白尿、水腫以及多器官損傷，且多數(shù)患者可在分娩后血壓恢復(fù)正常，該病存在一定的地區(qū)差異，國(guó)外報(bào)道發(fā)生率為7～10%，而我國(guó)內(nèi)陸地區(qū)為9%，高原地區(qū)為20%[1]。該病對(duì)母嬰健康安全造成了較大的影響，是造成孕產(chǎn)婦和圍產(chǎn)兒死亡的重要原因[2]。據(jù)WHO調(diào)查指出，妊娠期高血壓在孕產(chǎn)婦死亡中的比重為15%。目前臨床仍未明確該病的發(fā)生機(jī)制，但是多數(shù)學(xué)者認(rèn)為遺傳因素、免疫反應(yīng)、氧化應(yīng)激反應(yīng)以及胰島素抵抗在該病的發(fā)生中起到了重要的作用[3]。熱休克蛋白70(HSP70)是熱休克蛋白家族中含量最多且表達(dá)水平最高的應(yīng)激蛋白，當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)感染、損傷以及缺血缺氧等情況時(shí)都可引起HSP70表達(dá)水平的升高。腫瘤壞死因子(TNF)是一種能夠殺傷腫瘤細(xì)胞且對(duì)正常細(xì)胞無(wú)影響的細(xì)胞因子，是目前臨床醫(yī)學(xué)中發(fā)現(xiàn)腫瘤殺傷效果最強(qiáng)的生物活性因子之一，最常見(jiàn)的為T(mén)NF-α和TNF-β這兩種類型[4]。TNF-α主要是由巨噬細(xì)胞分泌，起到調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的效果，可引起細(xì)胞凋亡，阻礙腫瘤生長(zhǎng)和病毒復(fù)制[5]。白細(xì)胞介素-4(IL-4)是由活化T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，對(duì)于B細(xì)胞、T細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞具有免疫調(diào)節(jié)的作用。本研究選取2016年12月至2019年6月108例醫(yī)院收治妊娠期高血壓患者和108例正常妊娠孕婦，分析HSP70、TNF-α、IL-4與妊娠期高血壓患者體液免疫的關(guān)系，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料:選取2016年12月至2019年6月108例醫(yī)院收治妊娠期高血壓患者作為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合《婦產(chǎn)科學(xué)》中關(guān)于妊娠期高血壓的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②均知情同意；③既往無(wú)糖尿病、高血壓病史；④年齡均>20歲；⑤溝通、交流能力正常；⑥意思清醒，可配合研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①高血壓家族遺傳史；②嚴(yán)重肝腎功能異常；③合并心血管疾??；④合并自身免疫性疾病；⑤合并惡性腫瘤；⑥一般狀況較差者。觀察組患者年齡為22～35歲，平均為(28.6±3.5)歲；孕周為20～36周，平均為(32.6±2.6)周。另外選取同時(shí)期108例正常妊娠孕婦作為對(duì)照組，年齡為21～34歲，平均為(28.3±4.1)歲；孕周為21～37周，平均為(33.1±2.4)周，本組所有孕婦經(jīng)產(chǎn)檢身體各項(xiàng)指標(biāo)均正常且無(wú)家族遺傳病史。本次研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。兩組在一般資料方面的比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2方法:體液免疫指標(biāo)檢查方法:兩組均空腹采集3mL肘靜脈血于真空采血管，分離血清后3h內(nèi)使用免疫比濁法進(jìn)行檢測(cè)，采用全自動(dòng)生化分析儀以及配套試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，均嚴(yán)格按照儀器及試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。HSP、TNF-α、IL-4檢測(cè)方法:清晨空腹采集3mL靜脈血，1000r/min速率離心5min，放置-80℃冰庫(kù)保存。然后采用PCR法和ELISA法測(cè)量，使用多功能酶標(biāo)儀、全自動(dòng)生化分析儀以及配套試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，均嚴(yán)格按照儀器及試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.3觀察指標(biāo):觀察兩組患者體液免疫指標(biāo)以及血清HSP70、TNF-α、IL-4差異，并分析HSP70、TNF-α、IL-4與妊娠期高血壓患者體液免疫的相關(guān)性。

2 結(jié) 果

2.1兩組體液免疫指標(biāo)差異:觀察組C3、C4、IgA、IgG、IgM均明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組體液免疫指標(biāo)差異

2.2兩組患者血清HSP70、TNF-α、IL-4水平差異:觀察組患者血清HSP70、TNF-α明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，且IL-4水平均明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表2。

2.3HSP70、TNF-α、IL-4與妊娠期高血壓患者體液免疫的相關(guān)性分析：分析發(fā)現(xiàn)，HSP70、TNF-α、IL-4與妊娠期高血壓患者體液免疫存在正相關(guān)性(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表2 兩組患者血清HSP70 TNF-α IL-4水平差異

表3 HSP70 TNF-α IL-4 與妊娠期高血壓患者體液免疫的相關(guān)性分析

3 討 論

妊娠期高血壓是妊娠期常見(jiàn)的并發(fā)癥，主要以妊娠期出現(xiàn)高血壓及蛋白尿?yàn)橹饕憩F(xiàn)，多數(shù)患者分娩后高血壓癥狀自行緩解。但是該病對(duì)母嬰健康造成了較大的威脅，可導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩以及孕產(chǎn)婦和圍產(chǎn)兒死亡等不良妊娠結(jié)局。因此，引起了婦產(chǎn)科學(xué)的關(guān)注，近些年來(lái)隨著臨床研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)遺傳因素、免疫失調(diào)、氧化應(yīng)激反應(yīng)以及胰島素抵抗與該病的發(fā)生有密切的相關(guān)性。遺傳因素在妊娠期高血壓發(fā)生中具有重要的作用，其具有母系遺傳的特點(diǎn)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)指出，母親存在妊娠期高血壓病史的孕婦其妊娠期高血壓發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)要明顯高于母親無(wú)妊娠期高血壓病史的孕婦[6]。

妊娠是一個(gè)特殊的生理過(guò)程，從最早的免疫排斥到免疫耐受到最后發(fā)展為免疫應(yīng)答平衡。有研究[7]發(fā)現(xiàn)，妊娠期高血壓患者胎盤(pán)的蛻膜、絨毛膜、絨毛間質(zhì)以及血管內(nèi)皮下存在末端補(bǔ)體復(fù)合物異常表達(dá)的情況，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)子宮蛻膜淋巴細(xì)胞補(bǔ)體表達(dá)水平升高的情況，這說(shuō)明免疫機(jī)制在妊娠期高血壓發(fā)生中起到了重要的作用。妊娠期高血壓患者的補(bǔ)體系統(tǒng)被激活，從而導(dǎo)致補(bǔ)體裂解產(chǎn)物也產(chǎn)生相應(yīng)升高趨勢(shì)，同時(shí)會(huì)導(dǎo)致血清補(bǔ)體C3、C5水平下降，這與本次研究結(jié)果一致。血清免疫球蛋白以及補(bǔ)體水平反應(yīng)了人體體液免疫狀況，在健康孕婦中，母體與胎兒處于免疫應(yīng)答平衡的狀態(tài)，而妊娠期高血壓患者可能由于免疫應(yīng)答失調(diào)，從而引發(fā)了該病。本次研究中，觀察組C3、C4、IgA、IgG、IgM均明顯低于對(duì)照組，這說(shuō)明妊娠期高血壓患者與健康孕婦相比，體液免疫存在失調(diào)的情況，表現(xiàn)為各免疫指標(biāo)表達(dá)水平下降。妊娠期高血壓血清免疫球蛋白復(fù)合物增多可引起腎小球功能損傷，因此需要引起臨床醫(yī)學(xué)的關(guān)注。

HSP70是一種具有協(xié)同免疫作用的蛋白質(zhì)，是熱休克蛋白家族中的重要成員，在所有生物應(yīng)激細(xì)胞中均有高度誘導(dǎo)的特征，具有保護(hù)機(jī)體和細(xì)胞的作用。HSP70在正常情況下血清含量較低，當(dāng)人體出現(xiàn)應(yīng)激狀態(tài)下時(shí)出現(xiàn)異常升高趨勢(shì)。目前臨床對(duì)于熱休克蛋白研究中最多的就是HSP70，正常情況下HSP70主要分布在胞漿中，當(dāng)熱休克刺激時(shí)核內(nèi)HSP70明顯升高，當(dāng)細(xì)胞處于恢復(fù)狀態(tài)時(shí)，核內(nèi)HSP70完全消失，但細(xì)胞漿內(nèi)仍存在HSP70。HSP70在細(xì)胞中執(zhí)行的是最基礎(chǔ)的生理功能，例如蛋白質(zhì)折疊、伸展、運(yùn)轉(zhuǎn)、寡聚體形成等，維持細(xì)胞的生存和功能，當(dāng)應(yīng)激反應(yīng)發(fā)生后，能夠起到提高細(xì)胞抵抗力，從而達(dá)到應(yīng)急保護(hù)的效果。有研究[8]通過(guò)對(duì)比輕度妊娠期高血壓患者、中度妊娠期高血壓患者、重度妊娠期高血壓患者的血清HSP70發(fā)現(xiàn)，隨著病情嚴(yán)重程度的增加，HSP70呈升高趨勢(shì)，且與患者的病情程度呈正相關(guān)性。本次研究中觀察組患者血清HSP70明顯高于對(duì)照組，這說(shuō)明妊娠期高血壓患者存在高HSP70表達(dá)的特征，而健康孕婦血清HSP70水平較低，證實(shí)了妊娠期高血壓的形成與應(yīng)激反應(yīng)有密切的相關(guān)性。由此可見(jiàn)，在妊高癥發(fā)生過(guò)程中氧化應(yīng)激反應(yīng)與起到了重要的作用。

TNF-α作為一種炎性因子，具有介導(dǎo)細(xì)胞分化、增殖與凋亡的效果，過(guò)度表達(dá)將引起疾病的出現(xiàn)。TNF-α與多種免疫性疾病的發(fā)生有密切的相關(guān)性，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、惡性腫瘤以及胃炎等[9]。妊娠期高血壓孕婦存在高TNF-α表達(dá)的特點(diǎn)，可能是由于基因突變導(dǎo)致患者TNF-α表達(dá)水平升高，從而引起了該病的發(fā)生，本次研究結(jié)果中，在妊娠期高血壓患者胎盤(pán)中TNF-α表達(dá)水平明顯高于正常孕婦。本次研究中觀察組患者血清TNF-α明顯高于對(duì)照組，這說(shuō)明妊娠期高血壓患者存在TNF-α異常表達(dá)的特征。TNF-α主要是由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，參與炎癥、細(xì)胞凋亡以及血管生成過(guò)程，其可根據(jù)受體的不同而發(fā)揮不同的作用。TNF-α在免疫過(guò)程中可導(dǎo)致免疫失衡，引起大量毒性因子表達(dá)，從而導(dǎo)致胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡，加重胎盤(pán)供血不足，并進(jìn)一步加重TNF-α異常表達(dá)，引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，導(dǎo)致ET表達(dá)水平升高，NO表達(dá)水平下降，促使血管收縮，加重了外周血管阻力，從而引起該病的發(fā)生。

IL-4能夠刺激B細(xì)胞增殖，可有效提高B細(xì)胞產(chǎn)生抗原能力，促使免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗原刺激發(fā)生免疫應(yīng)當(dāng)，同時(shí)與B細(xì)胞促進(jìn)IgE產(chǎn)生有密切的相關(guān)性。同時(shí)其對(duì)于Th2細(xì)胞具有維持增殖的效果，與IL-1存在協(xié)同作用的效果，可維持活化T細(xì)胞增殖。IL-4還能夠提高巨噬細(xì)胞產(chǎn)生抗原以及殺傷腫瘤細(xì)胞的功能，能夠提高中性粒細(xì)胞介導(dǎo)的吞噬和殺傷效果，能夠抑制TNF以及IL-6的表達(dá)。此外，IL-4還可刺激肥大細(xì)胞增殖，與IL-3有協(xié)同作用效果。本次觀察組IL-4水平明顯低于對(duì)照組，這說(shuō)明妊娠期高血壓患者血清IL-4表達(dá)水平較低。

為了更好的篩查妊娠期高血壓孕婦，從而盡早的進(jìn)行干預(yù)和治療，因此需要通過(guò)有效的觀察指標(biāo)進(jìn)行檢查。本次通過(guò)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，HSP70、TNF-α、IL-4與妊娠期高血壓患者體液免疫存在密切的相關(guān)性，這說(shuō)明HSP70、TNF-α、IL-4反應(yīng)了妊娠期高血壓患者體液免疫水平，可以作為臨床篩查指標(biāo)，從而盡早發(fā)現(xiàn)妊娠期高血壓患者，盡早采取有效的干預(yù)措施。雖然大部分妊娠期高血壓患者在分娩結(jié)束后血壓會(huì)恢復(fù)正常水平，但是妊娠期高血壓可引起多種不良妊娠結(jié)局，例如宮內(nèi)發(fā)育遲緩、產(chǎn)后大出血以及圍產(chǎn)兒死亡等，因此需要對(duì)于血壓過(guò)高的患者采取降壓治療措施，避免不良妊娠結(jié)局的出現(xiàn)。

綜上所述，妊娠期高血壓患者體液免疫水平與HSP70、TNF-α、IL-4存在正相關(guān)性，可以通過(guò)HSP70、TNF-α、IL-4檢查篩查高危孕婦，從而盡早給予有效的干預(yù)措施，保護(hù)母嬰健康安全。