基于3D生物打印技術的體外模擬腫瘤轉(zhuǎn)移模型研究

楊超 高嘉悅 許崇龍

摘要：腫瘤的易轉(zhuǎn)移性與死亡率密切相關，但目前對其轉(zhuǎn)移的確切機制研究較少，主要是因為當前常用的腫瘤體外模型不能充分模擬超微環(huán)境下腫瘤微環(huán)境的三維和異質(zhì)性特征。隨著3D打印技術和生物材料的發(fā)展，采用3D打印技術模擬出的腫瘤體外模型已基本接近體內(nèi)腫瘤微環(huán)境。本文主要綜述3D生物打印的材料的方法，及其構(gòu)建異質(zhì)腫瘤微環(huán)境的體外模型應用現(xiàn)狀，總結(jié)了3D生物打印技術在重建腫瘤微環(huán)境中的應用和局限性，旨在為臨床制定抗癌策略提供參考。

關鍵詞：3D生物打印;體外模型;腫瘤微環(huán)境;腫瘤轉(zhuǎn)移

中圖分類號：R730? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.20.009

文章編號：1006-1959（2020）20-0030-04

Research on in Vitro Simulated Tumor Metastasis Model Based on 3D Bioprinting Technology

YANG Chao1，GAO Jia-yue2，XU Chong-long3

（1.Liaoning National Normal College，Shenyang 110032，Liaoning，China;

2.Military Medical Sciences，Beijing 100853，China;

3.Qizhi Technology Shenyang Co.，Ltd.，Shenyang 110032，Liaoning，China）

Abstract：Tumor metastasis is closely related to mortality， but there are currently few studies on the exact mechanism of its metastasis， mainly because the commonly used tumor in vitro models cannot fully simulate the three-dimensional and heterogeneous characteristics of the tumor microenvironment in the ultramicro environment. With the development of 3D printing technology and biomaterials， the tumor in vitro model simulated by 3D printing technology has basically approximated the tumor microenvironment in vivo. This article mainly reviews the methods of 3D bioprinting materials and the application status of in vitro models for the construction of heterogeneous tumor microenvironment. It also summarizes the application and limitations of 3D bioprinting technology in reconstructing the tumor microenvironment， aiming to formulate anti-cancer for the clinic strategy provides reference.

Key words：3D bioprinting;In vitro model;Tumor microenvironment;Tumor metastasis

目前，全球范圍內(nèi)惡性腫瘤發(fā)病率逐年升高，并直接導致死亡率升高，2019年全球約有1808萬新發(fā)病例和956萬死亡病例[1]。腫瘤引起較高死亡率的原因為其起病隱匿、大部分患者就診時即確診為具有遠端轉(zhuǎn)移的晚期腫瘤，與5年生存期下降直接相關[2]。盡管2D模型對腫瘤的發(fā)生及發(fā)展帶來了許多重要的發(fā)現(xiàn)，但人們越來越認識到3D模型可以概括地模擬出腫瘤生物學的各個方面功能，幫助研究者更好地理解腫瘤細胞在疾病進展過程中所處的生物、物理和生化環(huán)境，包括細胞增殖、細胞3D遷移、營養(yǎng)和代謝廢物擴散動力學、新血管生成及血管內(nèi)外侵襲等[3，4]，更有助于闡明惡性腫瘤進展的潛在機制，從而提高對治療靶點的識別。據(jù)統(tǒng)計，未來20年內(nèi)腫瘤發(fā)病率將從2019年的1808萬上升到超過2200萬，死亡率亦將隨之增加[5]，極大地增加了醫(yī)療負擔，因此腫瘤治療策略的更新迫在眉睫。本文主要就幾種當前用于組織工程的3D打印技術在重建腫瘤微環(huán)境中的方法進行綜述，旨在為抗癌新策略的發(fā)現(xiàn)提供幫助。

1腫瘤微環(huán)境

細胞微環(huán)境是包圍所有真核細胞的一種普遍存在的結(jié)構(gòu)特征，其由多種分子組成，在細胞信號和組織結(jié)構(gòu)中起著不可或缺的作用。對于腫瘤細胞來說，腫瘤微環(huán)境不是靜態(tài)的，其不僅具有腫瘤組織特異性，并且顯著影響腫瘤細胞行為，如誘導腫瘤細胞的侵襲行為等[6]。腫瘤細胞受微環(huán)境的特征影響轉(zhuǎn)移的進程，包括腫瘤的機械刺激、細胞因子細胞-基質(zhì)之間相互作用、基質(zhì)中氧以及營養(yǎng)物質(zhì)濃度、代謝廢物和細胞組織結(jié)構(gòu)特征[7]。腫瘤細胞通過與內(nèi)皮細胞旁分泌信號傳導來分泌血管內(nèi)皮生長因子和其他促血管生成因子，通過已存在的及新生的血管網(wǎng)絡進行遠端轉(zhuǎn)移[8]。腫瘤細胞滲入血管后，循環(huán)腫瘤細胞會以某種方式滲入其他類型的組織，以建立腫瘤細胞的繼發(fā)性集落。因此，抑制新血管生成是體外研究腫瘤轉(zhuǎn)移及擴散的關鍵。

體外腫瘤模型需要模擬出實際腫瘤微環(huán)境的關鍵特征，由于腫瘤擴散（相關因素：細胞因子、營養(yǎng)素和代謝廢物）和遠端轉(zhuǎn)移（影響因素：腫瘤內(nèi)外侵襲、炎癥細胞募集）均是動態(tài)進行的，所以任何轉(zhuǎn)移的體外模型都應該是3D的。目前，動物模型和臨床試驗之間取得的一致性結(jié)果較低，平均僅8%，一致性仍是具有挑戰(zhàn)性的難題[9]，3D體外腫瘤模型將通過概括與疾病類型和階段相匹配的適當腫瘤細胞/基質(zhì)組成和特性，從而精確模擬患者體內(nèi)的腫瘤微環(huán)境，提供準確的機制研究以及個性化抗癌治療藥物篩選的工具。

2 3D 生物打印

3D打印輔以計算機設計技術不需要物理模具即可創(chuàng)建內(nèi)部架構(gòu)，因此可作為轉(zhuǎn)換工具，并具有較低的成本、更高的靈活性和效率，可以在微米級甚至納米級上創(chuàng)建復雜的3D結(jié)構(gòu)。3D 打印已經(jīng)成為一項革命性技術，其起源可追溯到1984年Charles W. Hull的專利申請[10]，其描述了一種用于通過可光聚合流體的二維截面的重復圖形化和疊加來構(gòu)建三維物體的系統(tǒng)。3D 打印應用程序現(xiàn)在涵蓋了廣泛的領域，包括藝術、商業(yè)產(chǎn)品設計、大規(guī)模工業(yè)制造和建筑，以及最近應用于生物醫(yī)學和生物應用程序等。

3D 打印技術是增材制造技術的一個子集，增材制造是通過將材料接合到3D模式中而形成物體的過程[11]。通常是通過2D的截面被增量地堆疊起來，形成一個3D圖案結(jié)構(gòu)。在過去的十年中，3D生物打印應用包括工程植入式組織支架[12]以及用于研究腫瘤干細胞、共培養(yǎng)組織模型和腫瘤微環(huán)境的體外組織支架[13]。對于所有的生物打印應用，其目標是控制細胞和生物材料進入組織樣結(jié)構(gòu)的模式。生物相容性是3D生物打印設計中最重要的考慮因素，這意味著材料、添加材料的方法以及材料的粘附機制（如熱冷卻和交聯(lián)）必須對細胞無毒、無害。許多研究團隊已經(jīng)研發(fā)出了完全經(jīng)人工組裝的體外腫瘤3D模型，因此，將其轉(zhuǎn)化為更具可重復性的增材生物制造平臺的時機已經(jīng)成熟[14]。用于3D打印生物材料和細胞的主要技術有三種：噴墨生物打印技術、擠壓生物打印技術和光輔助生物打印技術。

3 3D生物打印的材料及方法

3.1生物材料的選擇? 生物材料的選擇是開發(fā)模擬天然細胞外基質(zhì)的體外微環(huán)境模型的首要考慮因素之一。細胞與生物材料的相容性和聚合機制也影響生物材料的選擇，3D生物打印方法的相容性進一步限制了可使用的生物材料的類型。目前已經(jīng)開發(fā)了多種生物材料，包括為天然（膠原蛋白，明膠，透明質(zhì)酸等），合成（聚乙二醇、聚異丙基丙烯酰胺等）及天然/合成混合材料，其均可用于通過3D生物打印制造3D體外支架。細胞侵襲及遷移是所有多細胞生物的一個正常過程，體外培養(yǎng)的細胞模型越接近體內(nèi)微環(huán)境，越可以準確地模擬出腫瘤細胞的行為，但是合成基質(zhì)的機械性能可以極大地改變腫瘤細胞行為，包括腫瘤干細胞分化、侵襲及遷移[15]。 為了使3D打印平臺打印出的體外微環(huán)境與腫瘤細胞具有生物相容性，已對非生物材料中應用的打印系統(tǒng)和技術進行了修改，合成或改進天然材料的剛度可以通過控制聚合反應的條件來調(diào)節(jié)，使生物相容性材料最大程度地降低對細胞活力的任何潛在危害。

3.2基于噴墨和擠壓成型的3D生物打印? 生物打印系統(tǒng)的早期發(fā)展是通過噴墨打印機來打印細胞組件，這些組件可以在器官中模擬各自的結(jié)構(gòu)，這是通過修改市售的噴墨打印機來實現(xiàn)的，這些噴墨打印機經(jīng)過改良，可以輸出蛋白質(zhì)或細胞溶液，而不是墨水[16]。在過去的十年中，噴墨打印系統(tǒng)的進一步發(fā)展使其能夠?qū)τ啥喾N細胞類型組成的復雜且多元化的3D組織構(gòu)造進行生物打印[17]。

在擠壓和噴墨3D打印中，將生物材料、細胞和可溶性因子組成的生物墨水選擇性地模壓到表面形成3D支架。使用單一的生物墨水進行打印即可以生成具有建筑特色的結(jié)構(gòu)，例如空心通道。擴展到兩種或更多種生物墨水聯(lián)用可以在空間上對生物基質(zhì)材料和細胞進行圖案化，從而可以創(chuàng)建具有結(jié)構(gòu)特征性的體外模型。在典型材料擠壓成型技術的3D打印中，通過擠壓的方式迫使材料以受控的連續(xù)流方式通過噴嘴，將少量生物墨水沉積到平臺上。該物料分配系統(tǒng)可以在x和y方向上自由移動，以2D模式將生物墨水物料沉積到支撐平臺上，該平臺同樣還可以在z方向上移動，以設定的順序添加到2D模式基礎上，通過堆積的方式形成3D支架?；诖祟悢D壓的3D生物打印已被用于制造類似血管的結(jié)構(gòu)。

基于擠壓成型的生物打印系統(tǒng)也得到了廣泛的開發(fā)，以產(chǎn)生具有細胞樣的生物結(jié)構(gòu)。在首次將噴墨生物打印系統(tǒng)用于細胞應用之后，開發(fā)了一種帶有凝膠沉積工具的機器人實現(xiàn)自由成形加工平臺，以逐層沉積預種子海藻酸鈉-水凝膠，以生產(chǎn)具有任意幾何形狀的三維預種子活體植入物。目前基于噴墨和擠壓成型的生物打印已經(jīng)用于創(chuàng)建仿生耳朵、肝臟、軟骨和神經(jīng)組織構(gòu)造[18]。

噴墨和擠壓成型的3D生物打印技術在簡單性、靈活性和低成本方面具有獨特的優(yōu)勢。但是，這兩種方法也有局限性。首先，由于剪切應力和用于輸送生物墨水的噴嘴的孔口直徑小，存在細胞損傷和死亡以及細胞沉降和聚集。而且，打印分辨率受到噴嘴的物理條件限制，通常超過50 mm。此外，印刷結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)完整性是另一個障礙，尤其是在具有液滴和線條的界面上，由于生物材料的限制，特征的打印分辨率僅為200 μm[11，19]。

3.3基于光輔助的3D生物打印? 除了基于噴墨和擠壓成型的3D生物打印外，光輔助生物打印平臺也越來越多地用于細胞打印和組織工程應用。這些主要涉及生物材料的光聚合反應，并可以打印出具有良好細胞生存力的各種細胞類型。光輔助3D生物打印系統(tǒng)分為兩個子組：基于DLP的3D生物打印和基于激光的3D生物打印。

基于DLP的3D生物打印機是應用動態(tài)光學投影立體光刻（DOPsL）平臺-利用由大約一百萬個微鏡組成的數(shù)字微鏡器件芯片，并通過調(diào)制紫外光投射指定的光學圖案到光聚合物溶液。該打印機的分辨率取決于每個微鏡發(fā)出的光束的焦距，該焦距為微米級。與噴基于噴墨和擠壓成型的3D生物打印相比，DLP打印機通過將光學圖案的整個平面投影到光敏聚合物溶液上來并行3D打印，從而顯著減少了制造所需的時間[20]。通過不斷刷新的光學圖形投影，并隨著打印對象移動界面，可以打印出光滑的3D物體，并且通過消除界面?zhèn)斡?，可以大大提高打印?D對象的機械完整性。由于這些優(yōu)點，DOPsL系統(tǒng)已被用來創(chuàng)建各種復雜的3D結(jié)構(gòu)，比如脈管系統(tǒng)網(wǎng)絡和神經(jīng)元導管[21]。

基于激光的3D生物打印的原理為其中激光束通過高倍物鏡聚焦，在樣品玻片上引發(fā)聚合或材料轉(zhuǎn)移[22]。并結(jié)合樣品臺的三維運動，可以在亞微米分辨率下制備出復雜的3D結(jié)構(gòu)，如用成纖維細胞和角質(zhì)形成細胞替代的全細胞化的皮膚。

盡管光輔助3D生物打印具有許多優(yōu)點，例如良好的生物相容性，高分辨率和高效率，但仍然存在一些需要解決的問題。首先，光輔助印刷的材料選擇僅限于光敏聚合物，這會限制許多生物材料的使用，并且需要進行其他的化學修飾才能使材料光聚合。另外，由于沒有噴嘴（用于噴墨打印機和擠出打印機）將材料輸送到所需的制造區(qū)域，通常將光敏聚合物填充到整個容器中，在該容器中打印該3D對象，從而增加了浪費材料和增加成本的擔憂。

4 3D生物打印在重建腫瘤微環(huán)境中的應用

如前所述，3D生物打印具有強大的改善體外模型的能力。3D打印應用使生物學家能夠快速制作定制設計的3D支架原型，以在異質(zhì)微環(huán)境中培養(yǎng)腫瘤細胞。而且人們逐漸地意識到，腫瘤微環(huán)境的異質(zhì)性是推進體外癌癥建模發(fā)展的關鍵。此外，細胞外基質(zhì)的機械和化學成分的作用以及癌細胞和鄰近基質(zhì)細胞之間的相互作用為疾病進展和治療靶點提供了新的視角[23]。3D生物打印可以在不同程度上解決所有這些問題，基于光輔助的3D生物打印可以繪制機械剛度的梯度圖，可以用來檢測細胞外基質(zhì)對癌細胞局部侵襲的機械作用?；趪娔蛿D壓成型的3D生物打印可以構(gòu)建具有微米級分辨率的3D支架，而多光子發(fā)射技術將該范圍擴展到納米級特征圖案化。多材料聯(lián)合3D打印技術的發(fā)展，通過將細胞外基質(zhì)樣的生物材料、可溶性信號因子和細胞組成等多個生物墨水進行構(gòu)圖，此能力用來復制腫瘤微環(huán)境。這些生物墨水可用于形成可溶性或束縛生物活性分子的梯度，形成具有可控空間排列的細胞共培養(yǎng)模型以及具有復雜細胞外微環(huán)境組成的3D支架。

在體外環(huán)境中建立模型的確切特征上必須是離散的，這些細節(jié)也有助于指示或推薦3D生物打印方法，幫助人們實現(xiàn)所需的組織結(jié)構(gòu)。通過為特定的研究定義最簡單的3D模型系統(tǒng)，通過標準的假設驅(qū)動的研究將很容易發(fā)現(xiàn)癌癥細胞的關鍵環(huán)境成因或調(diào)節(jié)因子?？紤]到快速成型和控制支架生物活性信號特性的潛力，3D生物打印可用于實現(xiàn)這一目標。每一個變量都可以在高周轉(zhuǎn)時間下進行操作和測試，以確定個體或組合對癌癥細胞行為的影響。3D生物打印可重現(xiàn)中等到高通量的復雜體外模型，從而提高了篩選有助于轉(zhuǎn)移性疾病發(fā)展的腫瘤微環(huán)境方面的能力。在腫瘤為轉(zhuǎn)移性疾病的背景下，已知癌細胞會隨著時間的推移明顯改變行為，表現(xiàn)為腫瘤細胞侵入血液或淋巴管以及在繼發(fā)性腫瘤部位進行定植和增殖。3D打印模型可以對變量進行4D操作，這非常重要，因為癌癥是隨時間和空間發(fā)展的疾病。3D打印模型可以控制4D模型，例如模式化的機械硬化或軟化，生長因子從周圍基質(zhì)的定時和局部釋放以及受控的灌注曲線向脈管系統(tǒng)的控制。所以，3D打印模型通過其模擬體內(nèi)自然微環(huán)境的能力，并可以進一步促進人們了解腫瘤轉(zhuǎn)移的機制。

目前盡管腫瘤治療常用的化學治療與放射治療有一定的療效，但目前很多研究表明化學治療可能會誘導癌細胞發(fā)生突變釋放，以及在細胞微環(huán)境中釋放具有轉(zhuǎn)移能力的細胞外囊泡來促進耐藥性和轉(zhuǎn)移行[24，25]。所以對于腫瘤治療策略及新藥篩選，在腫瘤干細胞影響的侵襲及遷移腫瘤模型中，篩選出可控制腫瘤微環(huán)境得新型抗癌藥可能會有效治愈和縮小腫瘤[26]。而這一切的基礎為先用3D生物打印模擬出最接近體內(nèi)環(huán)境的腫瘤微環(huán)境，并制定成功的可持續(xù)發(fā)展的抗癌策略。

總之，3D生物打印具有動態(tài)模擬體內(nèi)自然微環(huán)境的能力，3D打印模型可以進一步促進人們了解腫瘤轉(zhuǎn)移的機制，可輔助體外篩選新型抗癌藥;同時，個體化3D打印模型可輔助制定抗癌治療策略。

5機遇與挑戰(zhàn)

3D生物打印技術來確定腫瘤微環(huán)境及轉(zhuǎn)移能力仍然存在局限性。首先，體外模型的主要困難之一是通常很難將體外細胞行為與體內(nèi)細胞行為聯(lián)系起來，這也是所有體外檢測方法中的一個主要問題，3D生物打印確實提供了一種能力，能夠較快速地提供多種具有變異性的支架。而且，為了更好地控制微體系結(jié)構(gòu)的異質(zhì)分布，對于大多數(shù)現(xiàn)有的生物打印機，需要將分辨率提高到亞細胞或分子水平（納米級）。另外，由于生物材料充當與細胞的直接接觸界面，需要擴展生物打印機與多種生物材料的生物相容性[27]。此外，缺乏商業(yè)合作資源使得非專業(yè)工程師難以采用3D生物打印來制作體外模型，非專業(yè)人士將來采用3D生物打印還會因難以學會并應用程序的標準化打印機而受到阻礙，加大了使用的限制。所以成功地將3D生物打印技術應用于主流臨床工作需要工程師和癌癥生物學家之間的跨學科研究。

6總結(jié)

3D生物打印技術已經(jīng)為組織工程帶來了驚人的成果，可能同樣會改變對惡性腫瘤轉(zhuǎn)移及復發(fā)的理解。3D生物打印技術能夠大大提高構(gòu)建復雜且可重現(xiàn)的體外腫瘤模型的能力，從而使腫瘤生物學家可以闡明目前尚不清楚的腫瘤微環(huán)境如何影響轉(zhuǎn)移性疾病中的關鍵步驟?？傊瑢δ[瘤微環(huán)境進行3D生物打印仍然需要來自多個領域的合作的努力，包括制造學、材料科學、生物學以及臨床醫(yī)學來應對機遇與挑戰(zhàn)。

參考文獻：

[1]Bray F，F(xiàn)erlay J，Soerjomataram I，et al.Global cancer statistics 2018：GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries[J].CA：A Cancer Journal for Clinicians，2018，68（6）：394-424.

[2]Siegel RL，Miller KD，Jemal A.Cancer statistics，2015[J].CA：a Cancer Journal for Clinicians，2015，65（1）：5-29.

[3]Griffith LG，Swartz MA.Capturing complex 3D tissue physiology in vitro[J].Nature Reviews Molecular Cell Biology，2006，7（3）：211.

[4]Yamada KM，Cukierman E.Modeling tissue morphogenesis and cancer in 3D[J].Cell，2007，130（4）：601-610.

[5]Zhang YS，Duchamp M，Oklu R，et al.Bioprinting the Cancer Microenvironment[J].ACS Biomater Sci Eng，2016，2（10）：1710-1721.

[6]Shen YI，Abaci HE，Krupski Y，et al.Hyaluronic acid hydrogel stiffness and oxygen tension affect cancer cell fate and endothelial sprouting[J].Biomaterials Science，2014，2（5）：655-665.

[7]Albritton JL，Miller JS.3D bioprinting：improving in vitro models of metastasis with heterogeneous tumor microenvironments[J].Disease Models&Mechanisms，2017，10（1）：3-14.

[8]Chaffer CL，Weinberg RA.A perspective on cancer cell metastasis[J].Science，2011，331（6024）：1559-1564.

[9]Mak IWY，Evaniew N，Ghert M.Lost in translation： animal models and clinical trials in cancer treatment[J].American Journal of Translational Research，2014，6（2）：114.

[10]Hull CW.Apparatus for production of three-dimensional objects by stereolithography：U.S.Patent 4，575，330[P].1986-3-11.

[11]Miller JS.The billion cell construct：will three-dimensional printing get us there[J]. PLoS Biology，2014，12（6）：e1001882.

[12]Sooppan R，Paulsen SJ，Han J，et al.In vivo anastomosis and perfusion of a three-dimensionally-printed construct containing microchannel networks[J].Tissue Engineering Part C：Methods，2015，22（1）：1-7.

[13]Kang HW，Lee SJ，Ko IK，et al.A 3D bioprinting system to produce human-scale tissue constructs with structural integrity[J].Nature Biotechnology，2016，34（3）：312.

[14]Loessner D，Meinert C，Kaemmerer E，et al.Functionalization，preparation and use of cell-laden gelatin methacryloyl-based hydrogels as modular tissue culture platforms[J].Nature Protocols，2016，11（4）：727.

[15]Chaudhuri O，Gu L，Darnell M，et al.Substrate stress relaxation regulates cell spreading[J].Nature communications，2015（6）：6365.

[16]Wilson JrWC，Boland T.Cell and organ printing 1：protein and cell printers[J].The Anatomical Record Part A，2003，272（2）：491-496.

[17]Xu T，Zhao W，Zhu J M，et al.Complex heterogeneous tissue constructs containing multiple cell types prepared by inkjet printing technology[J].Biomaterials，2013，34（1）：130-139.

[18]Pati F，Jang J，Ha DH，et al.Printing three-dimensional tissue analogues with decellularized extracellular matrix bioink[J].Nature Communications，2014（5）：3935.

[19]Bhushan B，Caspers M.An overview of additive manufacturing（3D printing）for microfabrication[J].Microsystem Technologies，2017，23（4）：1117-1124.

[20]Zhang AP，Qu X，Soman P，et al.Rapid fabrication of complex 3D extracellular microenvironments by dynamic optical projection stereolithography[J].Advanced Materials，2012，24（31）：4266-4270.

[21]Zhu W，Ma X，Gou M，et al.3D printing of functional biomaterials for tissue engineering[J].Current Opinion In Biotechnology，2016（40）：103-112.

[22]Hribar KC，Soman P，Warner J，et al.Light-assisted direct-write of 3D functional biomaterials[J].Lab on a Chip，2014，14（2）：268-275.

[23]Schuessler TK，Chan XY，Chen HJ，et al.Biomimetic tissue-engineered systems for advancing cancer research：NCI strategic workshop report[J].Cancer Res，2014，74（19）：5359-5363.

[24]Keklikoglou I，Cianciaruso C，Gü？ E，et al.Chemotherapy elicits pro-metastatic extracellular vesicles in breast cancer models[J].Nat Cell Biol，2019，21（2）：190-202.

[25]Dzobo K.Taking a Full Snapshot of Cancer Biology：Deciphering the Tumor Microenvironment for Effective Cancer Therapy in the Oncology Clinic[J].OMICS，2020，24（4）：175-179.

[26]Dzobo K，Senthebane DA，Thomford NE，et al.Not Everyone Fits the Mold： Intratumor and Intertumor Heterogeneity and Innovative Cancer Drug Design and Developmen[J].OMICS，2018，22（1）：17-34.

[27]Malda J，Visser J，Melchels FP，et al.25th anniversary article：engineering hydrogels for biofabrication[J].Advanced Materials，2013，25（36）：5011-5028.

收稿日期：2020-07-02;修回日期：2020-07-16

編輯/成森