不同廠家EB 病毒血清抗體試劑盒對鼻咽癌檢測的效果比較

蔡秀萍 蔡偉鵬

(1 廣州中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院檢驗科 廣東 廣州 510378)

(2 中山大學(xué)孫逸仙紀念醫(yī)院檢驗科 廣東 廣州 510120)

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）是我國南方地區(qū)，特別是廣東地區(qū)高發(fā)的頭頸部惡性腫瘤。由于其發(fā)作隱匿，表現(xiàn)不典型，發(fā)現(xiàn)時患者大多已經(jīng)處于晚期或末期。而在鼻咽癌的早期，5 年生存率可高達95%[1]。EB 病毒（Epstein-Barr virus，EBV）的感染已被證實與鼻咽癌的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，EBV 相關(guān)抗體已成為鼻咽癌重要的無創(chuàng)性血清標志物，常規(guī)用于高危人群篩查，國內(nèi)上市的 EBV 血清抗體檢測試劑盒以酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)為主。然而，市場上的檢測試劑盒品種眾多，每個類別有多個廠家的產(chǎn)品可供選擇。因此，本文對來自于不同廠家的EBV 血清抗體EAIgA、VCA-IgA 檢測試劑盒診斷鼻咽癌的準確度、診斷價值進行了評價和比較，以期為相關(guān)試劑盒在臨床使用選擇和性能改進提供相關(guān)的依據(jù)。

1.資料與方法

1.1 一般資料

收集來自中山大學(xué)孫逸仙紀念醫(yī)院2017 年4 月—2017 年12 月在門診和住院部經(jīng)病理檢查確診為鼻咽癌的患者血清標本56例，本院同期健康體檢者的血清標本20例，年齡為25～65歲，其中男性51 例，女性25 例。

1.2 試劑和儀器

A、B、C 廠家的EB 病毒抗體EA-IgA、VCA-IgA 試劑；D、E廠家的EB 病毒抗體VCA-IgA 試劑。所有廠家的試劑均在有效期內(nèi)使用。檢測方法均為ELISA。檢測儀器為MULTISKAN MK3 酶標儀(芬蘭雷勃)，HHB 型電熱恒溫溫育箱(廣州)。

1.3 檢測方法

實驗操作嚴格按照說明書進行，常規(guī)條件下進行測定。以病理活檢診斷結(jié)果作為金標準進行判斷，如果病理檢測結(jié)果為鼻咽癌陽性，實驗試劑檢測也為陽性時則判為真陽性，如果病理檢測為陽性，而試劑檢驗為陰性，則判斷為假陰性；如果病理檢測結(jié)果為陰性，該試劑檢測也為陰性，則判為真陰性，如病理檢測為陰性，而該試劑檢驗為陽性，則判斷為假陽性。靈敏度=真陽性/病理陽性×100%，特異度=真陰性/病理陰性×100%，準確度=（真陽性+真陰性）/檢測數(shù)×100%。隨機選擇20%血清樣品（16 個樣品）重復(fù)實驗。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

使用 Microsoft Excel 整理數(shù)據(jù)，計算檢測結(jié)果的準確度。應(yīng)用MedCalc 和GraphPad Prism 6.0 軟件進行ROC 曲線分析，并進行統(tǒng)計學(xué)檢驗（準確度為卡方檢驗，AUC為z檢驗）。P ＜0.05定義為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 EB 病毒抗體檢測試劑盒檢測結(jié)果與臨床病理活檢結(jié)果比較

A、B、C 三廠家EA-IgA 檢測試劑盒診斷NPC 的陽性率分別為71.429%，53.571%，80.357%，準確度分別為78.947%，65.789%，84.211%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.023），C 試劑盒準確度最高，A 次之，B 最差。5 家VCA-IgA 檢測試劑盒產(chǎn)品間的準確度差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.163），對診斷NPC 的陽性率分別為92.857%，92.857%，87.500%，89.286%，78.571%，準確度分別為92.105%，93.421%，86.842%，88.158%，81.579%，五家產(chǎn)品對診斷NPC 的準確度均高于80%，見表1。

2.2 EB 病毒抗體檢測試劑盒診斷的準確性

各廠家試劑盒對NPC 的診斷價值各有不同。EA-IgA 三家廠家的檢測試劑盒AUC 均大于0.9，均具有較好的診斷價值，三家試劑盒兩兩間AUC 差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05）。VCA-IgA 五家試劑盒兩兩間AUC 差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05），見表2。

表1 EB 病毒抗體檢測試劑盒血清學(xué)診斷鼻咽癌的檢測結(jié)果[n（%）]

表2 EB 病毒抗體檢測試劑盒診斷鼻咽癌的ROC 參數(shù)

3.討論

鼻咽癌（NPC）是一種起源于鼻咽部上皮細胞的惡性腫瘤，地理分布獨特，在大部分地區(qū)是一種較為罕見的癌癥，但在東南亞和中國南方，其發(fā)病率特別高[2]。目前認為，它的致病原因主要包括環(huán)境因素、遺傳易感以及EB 病毒感染。而EB 病毒感染是主要的原因，它在逃避宿主免疫監(jiān)視中，能夠通過獲得抗逆性表型而在體內(nèi)具有選擇性生長的能力[3]。Ji 等[4]在一項長達15 年的大規(guī)模隨訪研究中發(fā)現(xiàn)，在鼻咽癌臨床發(fā)現(xiàn)的前幾年，EB 病毒IgA 抗體的水平就持續(xù)升高，可以作為血清標志物，利于NPC 早期檢測。另一項研究也同樣發(fā)現(xiàn)，針對EB 病毒的IgA 抗體可以識別高危人群，并且可以有效篩查早期無癥狀的NPC 患者[5]。EB 病毒血清抗體的檢測包括IgG 和IgA 抗體，而IgG 抗體是一種較為豐富的全身性抗體，主要反映患者長期暴露于高度流行的EB 病毒病原體下，而不能很好的區(qū)分鼻咽癌和非鼻咽癌；IgA 抗體是近期的病原體暴露在粘膜表面而產(chǎn)生的壽命較短的抗體，為一線鼻咽癌風(fēng)險評估的有利血清學(xué)標志物，故我們的研究主要針對IgA 抗體試劑盒的比較。目前，改善NPC 流行地區(qū)患者整體預(yù)后的最主要方法是通過大規(guī)模人群篩查，提早發(fā)現(xiàn)，及時治療。而血清學(xué)抗體檢查具有無創(chuàng)、方便、經(jīng)濟、快速、重復(fù)性好等特點，不同品牌試劑盒性能難免存在差異，需對不同品牌試劑進行比對分析和評估，以免影響鼻咽癌篩查和診斷的準確性。

本研究通過對市面上常用的幾家不同廠家的EA-IgA、VCAIgA 試劑盒的診斷性能進行分析，發(fā)現(xiàn)各廠家試劑盒AUC 均大于0.8，具有較好的診斷性能。但在準確度、靈敏度和特異度上有所差異，在實際臨床應(yīng)用中應(yīng)根據(jù)實際需要進行選擇，或是通過項目組套方式，避免漏檢。