王震 張小鵬
(1 新疆喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院輸血科 新疆 喀什 844000)
(2 新疆喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院心電功能科 新疆 喀什 844000)
通常情況下,臨床有意義抗體指同種異型抗體,其會(huì)在37℃的溫度下反應(yīng),引發(fā)新生兒溶血病、溶血性輸血反應(yīng)或?qū)⒓t細(xì)胞輸入縮短了存活期。lgM 型抗體在天然的沒(méi)有顯著免疫刺激的情況下存在,能夠在臨床檢測(cè)鹽水介質(zhì)的過(guò)程中得到有效應(yīng)用,而lgG 型抗體通常在妊娠、輸血等免疫刺激下產(chǎn)生,能夠在臨床檢測(cè)非鹽水介質(zhì)的過(guò)程中得到有效應(yīng)用[1]。本研究探討了預(yù)輸血患者行全自動(dòng)血型分析儀IgG 不規(guī)則抗體檢測(cè)的意義。
隨機(jī)選取2019 年5 月—2020 年2 月我院收治的預(yù)輸血患者11250 例,所有患者均需要接受輸血治療,均知情同意。其中男性患者6250 例,女性患者5000 例,年齡在13 ~81 歲之間,平均年齡為(47.3±10.2)歲。在病史方面,6000 例患者有輸血史或妊娠史,5250 例患者無(wú)輸血史或妊娠史。本研究符合我院醫(yī)院倫理學(xué)管理規(guī)定。
在患者入院時(shí)將其4 ~5ml 靜脈血抽取出來(lái),對(duì)其進(jìn)行EDTA-K2 抗凝,然后對(duì)其進(jìn)行離心,離心速率和時(shí)長(zhǎng)分別為3000r/min 和5min。篩選lgG 不規(guī)則抗體,對(duì)lgG 不規(guī)則抗體進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)過(guò)程中運(yùn)用全自動(dòng)血型分析儀中的Capture-R Ready-screen 技術(shù)。在微孔中預(yù)先包被已知紅細(xì)胞抗原,然后將其加入到待檢樣本中,孵育,洗板,將Capture-R ReadyIndicator Red Cells(指示紅細(xì)胞)加入,該指示紅細(xì)胞包被有鼠單克隆抗人lgG,如果有相應(yīng)抗體存在于樣本中,離心后形成的抗抗體復(fù)合物均勻地鋪陳在微孔底部,則評(píng)定為陽(yáng)性;如果沒(méi)有相應(yīng)抗體存在于樣本中,離心后沒(méi)有被抗體結(jié)合的指示紅細(xì)胞在微孔底部密集聚集,則評(píng)定為陰性。有96 孔分別分布在每塊微孔板上,將陽(yáng)性和陰性對(duì)照孔各2 孔設(shè)立起來(lái),其能夠?qū)?2 個(gè)樣本進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)。條碼掃描樣本后,儀器將吸取、孵育、離心樣本及試劑的任務(wù)自動(dòng)完成,同時(shí)有效分析CCD 圖像,判讀結(jié)果,傳輸并保存數(shù)據(jù)。在檢測(cè)過(guò)程中,用吸樣針將100μl LISS 液、50μl 樣本血漿(Capture-R Positive Control serum<陽(yáng)性對(duì)照血清>或Capture-R Negative Control serum <陰性對(duì)照血清>)依次吸取出來(lái),45℃的溫度下進(jìn)行8min 的孵育,37℃的溫度下進(jìn)行20min 的孵育,洗板、50μl 指示紅細(xì)胞、離心后判讀結(jié)果。最后對(duì)lgG 不規(guī)則抗體篩選陽(yáng)性樣本的抗體特異性進(jìn)行鑒定。
用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包SPSS20.0 分析處理上述所有數(shù)據(jù),計(jì)數(shù)資料以(%)表示,用χ2檢驗(yàn),P <0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
11250 例患者中,不規(guī)則抗體陽(yáng)性55 例,陰性11195 例,陽(yáng)性率和陰性率分別為0.50%和99.50%。其中有輸血史或妊娠史組患者的不規(guī)則抗體陽(yáng)性率0.72%(42/6000)顯著高于無(wú)輸血史或妊娠史組0.25%(13/5250)(P <0.05),陰性率99.30%(5958/6000)顯著低于無(wú)輸血史或妊娠史組99.75%(5237/5250)(P <0.05),見表1。
表1 11250 例患者不規(guī)則抗體篩選結(jié)果[n(%)]
55 例lgG 不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者中,沒(méi)有確定抗體類型或非特異性抗體35 例,特異性抗體20 例,在涉及的血型系統(tǒng)方面,8 例患者為MNSs 系統(tǒng),包括抗M 和抗S;11 例患者為Rh 系統(tǒng),包括抗E 和抗Ec;1 例患者為Kidd 系統(tǒng),為抗Jkb,分別占總數(shù)的40.00%、55.00%、5.00%,見表2。
表2 20 例特異性抗體鑒定結(jié)果[n(%)]
相關(guān)醫(yī)學(xué)學(xué)者研究表明[2],正常人群具有0.3%~2%的不規(guī)則抗體檢出率。本研究結(jié)果表明,16250 例患者中,不規(guī)則抗體陽(yáng)性80 例,陰性16170 例,陽(yáng)性率和陰性率分別為0.49%和99.51%,和相關(guān)醫(yī)學(xué)結(jié)果一致。本研究結(jié)果還表明,11250 例患者中,不規(guī)則抗體陽(yáng)性55 例,陽(yáng)性率為0.49%。其中有輸血史或妊娠史組患者的不規(guī)則抗體陽(yáng)性率0.72%(42/6000)顯著高于無(wú)輸血史或妊娠史組0.25%(13/5250)(P <0.05),說(shuō)明輸血或妊娠等免疫刺激引發(fā)了lgG 不規(guī)則抗體。
《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》規(guī)定,輸血科一方面應(yīng)該對(duì)患者進(jìn)行急診搶救和緊急輸血,另一方面還應(yīng)該對(duì)其Th(D)血型進(jìn)行常規(guī)檢查,在人們的日益廣泛而充分的重視下,妊娠、輸血引發(fā)的抗D 幾率在極大程度上降低[3]。而通常情況下,由于E 抗原的免疫性比D 抗原弱,因此我們對(duì)其進(jìn)行關(guān)注的前提為再次輸血過(guò)程中沒(méi)有將不規(guī)則抗體檢測(cè)出來(lái)。由于E抗原有52%左右的陽(yáng)性頻率,Ce 基因型占東方人Rh 系統(tǒng)的72%,因此通常情況下,在有抗E 產(chǎn)生時(shí)抗c 也會(huì)產(chǎn)生,抗E、抗Ec 產(chǎn)生的幾率會(huì)在多次輸血或妊娠的情況下得到極大程度的提升。本研究結(jié)果和相關(guān)醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致[4]。MNSs系統(tǒng)抗體中抗M 的檢出類似于抗E。并不是所有l(wèi)gG 不規(guī)則抗體篩選陽(yáng)性的樣本均能將抗體的性質(zhì)鑒定出來(lái),發(fā)生這一現(xiàn)象的原因可能是在鑒定抗體特異性的過(guò)程中所采用的譜細(xì)胞抗原譜具有一定的局限性,同時(shí)樣本中樣本也具有復(fù)雜性,比如,多種同種抗體、同種抗體和自身抗體并存,有藥物抗體存在,但是相應(yīng)藥物致敏細(xì)胞則缺乏等[5]。如果患者需要異體輸血,需要將紅細(xì)胞上缺乏該抗原的血液選取出來(lái),選取過(guò)程中依據(jù)鑒定出的抗體特異性,但是抗體特異性不確定,則應(yīng)該盡可能地對(duì)異體輸血進(jìn)行有效的避免;如果患者和自身輸血條件相符,且不規(guī)則抗體篩選陽(yáng)性,則應(yīng)該給予其積極的自體輸血。
綜上所述,預(yù)輸血患者行全自動(dòng)血型分析儀IgG 不規(guī)則抗體檢測(cè)能夠保證臨床安全。