SPE-GC-MS/MS同時測定烏牛早茶葉中13種農(nóng)藥殘留

雷海燕

摘要：選取浙江云和縣茶葉烏牛早50份，經(jīng)乙腈提取， 旋轉蒸發(fā)，用Cleanert TPT固相萃取柱凈化，濃縮，內標法定量，采用GC-MS/MS測定13種農(nóng)藥殘留。結果表明，50份樣品中均未檢出13種農(nóng)藥殘留，說明該地山區(qū)氣候優(yōu)勢，烏牛早農(nóng)殘檢測率低，為該地茶葉產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供一定的基礎理論。

關鍵詞：氣相色譜-串聯(lián)質譜法（GC-MS/MS）;固相萃?。⊿PE）;茶葉;烏牛早;農(nóng)藥殘留

中圖分類號：O657.7+1;S571.1 ? ? ? ? 文獻標識碼：A

文章編號：0439-8114（2020）17-0142-03

Abstract： To simultaneously determine 13 pesticides in 50 samples of local tea Wuniuzao. The samples extracted by acetonitrile and dried by rotated， purified by Cleanert TPT column，then subjected to GC-MS/MS using internal standard method. The treated samples pesticide residues were not detected. The results showed that the Wuniuzao of the local mountain area were very low. This paper provides some basic theory for the development of local tea industry.

Key words： GC-MS/MS; SPE; tea; Wuniuzao; pesticide residues

烏牛早比洞庭碧螺春、西湖龍井早上市一個月，在國內早茶市場獨占鰲頭。中國是茶葉主要的生產(chǎn)、消費和出口國。茶葉農(nóng)藥殘留限量值日趨嚴格，截至2016年12月31日，歐盟對茶葉中農(nóng)殘限量要求已達493項，對未涉及的農(nóng)殘則依據(jù)默認標準（0.01 mg/kg） 進行判定[1]。GB 2763—2016 《食品中農(nóng)藥殘留限量標準》[2]中茶葉的檢測項目也增加至48項，最大殘留限量值都有大幅降低。

目前，國內外對茶葉中 OCPs（有機氯農(nóng)藥）殘留的檢測方法主要采用氣相色譜法（Gas chromatography，GC）[3-5]、氣相色譜-質譜法（Gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）[6，7]、氣相色譜-串聯(lián)質譜法（Gas chromatography-tandem mass spectrometry，GC-MS/MS）[8-12] 等。氣相色譜-三重四級桿串聯(lián)質譜（Gas chromatography-triple quadrupole tandem mass spectrometry，GC-QqQ-MS/MS）具有選擇性好、特異性好、靈敏度高、抗干擾能力強和定量準確等優(yōu)點， 大大提高了化合物定性和定量的準確性[13]。

本試驗采用固相萃取-氣相色譜-串聯(lián)質譜法（SPE-GC-MS/MS）測定早茶烏牛早中13種農(nóng)藥殘留，為浙江云和縣茶葉產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供一定的理論基礎。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

烏牛早為市售干制茶，粉碎研磨后備用。

TSQ8000 Evo氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質譜，配電子轟擊離子源，賽默飛世爾科技公司;全自動固相萃取儀、全自動平衡濃縮儀;高速離心機，賽默飛世爾科技公司;電子天平，瑞士METTLER TOLEDO公司;超純水儀，美國 Millipore公司;渦旋振蕩器，江蘇其林貝爾公司。

13種農(nóng)藥標品;順式環(huán)氧七氯內標，99.36%，德國Dr Ehrenstorfer公司。乙腈、正己烷、丙酮、甲苯均為色譜純，美國Fisher Chemical公司;Cleanert TPT固相萃取柱，2 g/12 mL，天津博納艾杰爾科技;無水硫酸鈉 （Na2SO4）。

1.2 方法

1.2.1 標準溶液配制 準確吸取1 mL各混合標品于10 mL容量瓶中，用正己烷∶丙酮（1∶1，V∶V）定容，得到濃度為10 mg/L的混合標準儲備溶液，儲存于-18 ℃?zhèn)溆?。準確稱取25.0 mg（精確至0.1 mg） 的順式環(huán)氧七氯標準品，用正己烷稀釋定容至25 mL，得到濃度為1 000 mg/L 的標準儲備液;用正己烷稀釋標準儲備液，配制成20 mg/L的標準中間液，儲存于-18 ℃?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 樣品前處理 準確稱取烏牛早樣品 2.50 g（精確至0.01 g），置于50 mL聚乙烯離心管中，加入 20 mL 乙腈超聲30 min;加入無水硫酸鈉 2 g置于旋轉蒸發(fā)器上振蕩提取5 min，離心3 min（5 000 r/min），吸取上清液，轉入雞心瓶，殘渣用20 mL乙腈再提取1次，合并提取液，在40 ℃ 水浴下旋轉濃縮至約1 mL，待凈化。加入20 mg/L順式環(huán)氧七氯內標溶液0.1 mL。

1.2.3 儀器條件 色譜柱為 Agilent HP-5MS （30 m×0.25 mm，0.25 μm）;恒流模式，流速為1.2 mL/min;進樣口溫度250 ℃;載氣為氦氣（He），純度99.999%;初始柱溫 50 ℃;進樣量 1 μL;溶劑延遲 3 min。EI 離子源溫度 230 ℃;EI 源能量為 79 eV;燈絲電流為 35 μA;輔助加熱器 280 ℃;四級桿溫度150 ℃;淬滅氣體（He）流量 2.3 mL/min，碰撞氣體N2流量 1.2 mL/min。

用3 mL丙酮、6 mL正己烷依次淋洗弗羅里硅土固相萃取柱，棄去淋洗液，然后用6 mL丙酮-正己烷洗脫，收集全部洗脫液于10 mL試管中，45 ℃氮吹至近干，用丙酮溶解定容至0.5 mL，供上機測定。

2 結果與分析

2.1 各化合物質譜條件優(yōu)化

該方法檢測代謝組分中有同分異構體，碎片分離13 種組分進行全掃描，確定目標農(nóng)藥組分豐度高且質量數(shù)較大的離子作母離子，選擇SRM模式對待測組分進行掃描（表1）。

2.2 各化合物標準色譜圖

按表1確定的各農(nóng)藥質譜參數(shù)， 13種農(nóng)藥的標準GC-MS/MS的總離子流色譜見圖1。

2.3 各化合物標準曲線

按照 “1.2.3”和“2.1”確定的儀器色譜、質譜條件進行測定，以各農(nóng)藥峰面積相對應的溶液濃度繪制標準曲線。13種農(nóng)藥回歸方程及相關系數(shù)見表2 。由表2可以看出，13種農(nóng)藥在質量濃度 0.01～1.00 μg/mL線性關系良好，且相關系數(shù)均大于0.996 0。

3 結論

采用該方法檢測早茶烏牛早樣品50 份，未檢出13種農(nóng)藥殘留。近年來，云和縣形成了以食用菌、云和雪梨、茶葉、板栗等為代表的主導產(chǎn)業(yè)，茶葉是該縣發(fā)展的一項新興產(chǎn)業(yè)。據(jù)統(tǒng)計，茶園面積 ? ? ? ?2 017.8 hm2，其中采摘茶園1 540 hm2，總產(chǎn)量 660 t，產(chǎn)值4 765萬元[14]。

烏牛早在云和縣引種成功，當?shù)胤N植戶充分利用山區(qū)光、熱、水、氣不同的生態(tài)環(huán)境特點，發(fā)展形成了以石塘鎮(zhèn)朱村、梅源村為主的茶葉主要種植區(qū)域。近年來，政府加大政策支持，2009 年云和縣出臺了《中共云和縣委云和縣人民政府關于加快推進農(nóng)村改革發(fā)展的實施意見》，為大力發(fā)展高效生態(tài)農(nóng)業(yè)，進一步提升農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化經(jīng)營水平，提高云和農(nóng)業(yè)效益和農(nóng)產(chǎn)品市場競爭力，制定了一系列政策。

烏牛早的種植在一定程度上解決了當?shù)剞r(nóng)戶就業(yè)問題，帶來了增收，但茶產(chǎn)業(yè)如何更好地推動一二三產(chǎn)業(yè)融合，形成完善的農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)鏈，需要在提高茶葉的品質和檔次方面加強引導，重視農(nóng)產(chǎn)品質量和不斷提高加工技術。

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