耐藥MTB分離株對不同組合抗結(jié)核藥品體外藥物敏感性試驗的結(jié)果分析

應(yīng)若嫣 黃曉辰 王潔 劉一典 沙巍 楊華

結(jié)核病是由MTB引起的慢性傳染性疾病，療程長，易耐藥，嚴(yán)重危害人類的身體健康，是全球重大公共衛(wèi)生問題。2010年全國第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查報告[1]指出，復(fù)治患者分離菌株對4種一線抗結(jié)核藥品和11種二線抗結(jié)核藥品的任一耐藥率分別為35.9%和38.5%，可見復(fù)治結(jié)核病已成為耐藥結(jié)核病的主要來源，如果未積極治療極易發(fā)展成為耐多藥結(jié)核病(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)，甚至廣泛耐藥結(jié)核病(extensively drug-resisitant tuberculosis,XDR-TB)，遷延不愈[2]。為研究針對首次復(fù)治肺結(jié)核患者更快速更有效的治療方案[3]，同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院承擔(dān)了“十一五”“十二五”“十三五”傳染病重大專項——復(fù)治肺結(jié)核化學(xué)治療新方案的研究。經(jīng)“十一五”研究驗證，推出了復(fù)治肺結(jié)核超短程治療方案[4]，將原標(biāo)準(zhǔn)方案(H-R-Z-E)中的利福平(R)、異煙肼(H)替換為含莫西沙星(Mfx)、對氨基水楊酸異煙肼(Pa)、利福布汀(Rfb)或利福噴丁(Rft)的2種新方案，即Mfx-Pa-Rfb-E-Z或Mfx-Pa-Rft-E-Z(其中E：乙胺丁醇；Z：吡嗪酰胺)，并在臨床開展應(yīng)用。為了更準(zhǔn)確地評估新方案的有效性，本研究選取入組“十二五”項目的首次復(fù)治肺結(jié)核患者分離培養(yǎng)的92株耐藥菌株為研究對象，優(yōu)化了組合藥品藥物敏感性試驗(簡稱“藥敏試驗”)檢測方法[5]，通過計算新方案對各菌株的抑菌濃度指數(shù)(fractional inhibitory concentration index，F(xiàn)ICI)，對比分析標(biāo)準(zhǔn)方案和新方案體外組合藥品的抑菌效果，進(jìn)一步評估優(yōu)化抗結(jié)核新方案對首次復(fù)治肺結(jié)核患者的應(yīng)用價值。

資料和方法

一、材料

1．菌株：搜集同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院“十二五”國家科技重大專項入組的148例首次復(fù)治肺結(jié)核患者，通過對患者痰標(biāo)本進(jìn)行BACTEC MGIT 960和改良羅氏法培養(yǎng)[包括H、R、E、Z、Pa、Mfx、Rfb、Rft]獲取167株MTB分離株，將75例患者經(jīng)上述兩種方法進(jìn)行藥敏試驗結(jié)果均為陽性的92株耐藥菌株(包括36株MDR-MTB、54株XDR-MTB和2株單耐H菌株)作為研究對象，并保存于-20 ℃甘油中。MTB標(biāo)準(zhǔn)株(H37Rv，編號：ATCC27294)購自國家菌種保存中心，作為實驗對照。本研究項目獲得醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會批準(zhǔn)，批號：k19-008。

2．抗結(jié)核藥品：H、R、Pa、Rfb和Rft干粉均購自美國Sigma-Aldrich(上海)貿(mào)易有限公司，Mfx原粉購自美國MCE公司。藥品配置：所有藥品均稱量10 mg，Pa干粉用1 ml 4%NaOH配置成10 mg/ml，H干粉用1 ml 18.2 MΩ.cm的超純水配置成10 mg/ml，R、Rfb、Rft干粉用1 ml二甲基甲酰胺溶解配置成10 mg/ml，Mfx干粉用1 ml二甲基亞砜溶解配置成10 mg/ml，所有備用藥品溶液均用0.22 μm無菌濾器過濾除菌，分裝保存于-80 ℃下。

3．儀器與試劑：96孔無菌U形板購自浙江拱東醫(yī)療科技有限公司(原浙江拱東醫(yī)用塑料廠)，61010A-1型比濁儀、Middlebrook 7H9培養(yǎng)基干粉、營養(yǎng)添加劑(OADC)均購白美國BD公司。應(yīng)用液為含10%營養(yǎng)添加劑的Middlebrook 7H9液體培養(yǎng)基，包被液為70%的18.2 MΩ.cm的超純水+30%無水乙醇+5%蔗糖。

二、研究方法

采用最低抑菌濃度(MIC)三維棋盤法[6]分別進(jìn)行92株菌株和1株標(biāo)準(zhǔn)菌株(H37Rv)對H-R、Mfx-Pa、Mfx-Pa-Rfb、Mfx-Pa-Rft 4種藥品組合方案的體外藥敏試驗，分別以FICI≤0.5(2種藥品組合)或FICl≤0.75(3種藥品組合)作為是否具有協(xié)同作用的判斷界值，評估不同藥品的組合作用。

1.配置96孔板檢測濃度：92株菌株和1株標(biāo)準(zhǔn)菌株(H37Rv)，每株菌對應(yīng)12塊96孔板，分別為H+R、Mfx+Pa、Mfx-Pa+Rfb(0.125 mg/L)、Mfx-Pa+Rfb(0.25 mg/L)、Mfx-Pa+Rfb(0.5 mg/L)、Mfx-Pa+Rfb(1 mg/L)、Mfx-Pa+Rfb(2 mg/L)、Mfx-Pa+Rft(1 mg/L)、Mfx-Pa+Rft(2 mg/L)、 Mfx-Pa+Rft(4 mg/L)、Mfx-Pa+Rft(8 mg/L)、Mfx-Pa+Rft(16 mg/L)藥敏試驗檢測板。依據(jù)文獻(xiàn)[4] 配置96孔板藥品組合(從上至下依次為A至H行，從左到右依次為1至12列，如表1所示)，并進(jìn)行如下改動：

1)H-R組合及H、R單藥MIC濃度測定微孔板配置范圍：首先將A1孔和H12孔設(shè)為對照孔，各加入20 μl無藥培養(yǎng)基，再在第一行1～12和第一列A～H每孔各加入10 μl 電阻率為18.2 MΩ.cm的超純水，繼而沿96孔板Y軸從B行至H行每孔添加10 μl初始配置濃度為2.5、5、10、20、40、80、160 mg/L 的H(濃度由小到大)、沿96孔板X軸向2～12列每孔添加10 μl初始配置濃度為0.6、1.25、2.5、5、10、20、40、80、160、320、640 mg/L的R(濃度由小到大)，則每孔混合后含液量均為20 μl，最終配置成含H的終濃度為1.25～80 mg/L和R的0.3～320 mg/L的單藥或兩藥混合的96孔板培養(yǎng)基。實驗前將每孔鋪滿20 μl含藥培養(yǎng)基的96孔U形板放在無菌超凈臺中風(fēng)干后制成含藥干板待用。使每孔在加入200 μl菌液后的H終濃度為0.125～8 mg/L，R為0.03～32 mg/L(表1)，為初始配置時濃度的1/20。

2)Pa-Mfx組合及Pa、Mfx單藥MIC濃度測定微孔板配置范圍：配置方法同H+R，其中Pa的初始配置濃度為0.15、0.3、0.6、1.2、2.5、5、10、20、40、80、160 mg/L，Mfx為0.6、1.2、2.5、5、10、20、40 mg/L。使每孔在加入200 μl菌液后的Mfx終濃度為0.03～2 mg/L，Pa為0.0075～4 mg/L，均為初始配置時濃度的1/20。

3)Pa-Mfx-Rfb或Pa-Mfx-Rft組合及Rfb或Rft單藥MIC濃度測定微孔板配置范圍：將預(yù)先配置好的Rfb或Rft的5個初始濃度梯度溶液(Rfb為1.25、2.5、5、10、20 mg/L，Rft為10、20、40、80、160 mg/L)，分別加至含Pa和Mfx的5個96微孔板除A1外的所有孔中，再加入200 μl菌液，使Rfb的終濃度為0.125、0.25、0.5、1、2 mg/L，Rft為1、2、4、8、16 mg/L，H12為單藥Rfb/Rft的5個不同濃度的MIC值。

表1 96孔微孔板藥敏試驗檢測H和R的藥品濃度(mg/L)

以Mfx-Pa-Rfb(0.125 mg/L)添加方法為例：(1)準(zhǔn)備18支5 ml離心管，分別與96孔板對應(yīng)標(biāo)號，為2～12和B～H。取0.0125 ml預(yù)先配置好的10 mg/ml的Rfb備用溶液，加入100 ml包被液，制成1.25 mg/L的Rfb溶液，分別加入上述5 ml離心管中，從左2至右11分別加入2.5 ml，右12管加入5 ml；從上B至下G分別加入2.5 ml，下H管加入5 ml。(2)取0.08 ml預(yù)先配置好的Pa備用液(10 mg/ml)加入到配置好的12管Rfb溶液(1.25 mg/L，5 ml)中，形成含160 mg/L的Pa和含1.25 mg/L的Rfb的溶液Ⅰ，混勻后取2.5 ml溶液Ⅰ依次從右11號管往左到2號管加入到上述Rfb溶液(1.25 mg/L，2.5 ml)中進(jìn)行梯度稀釋。(3)取0.02 ml預(yù)先配置好的Mfx備用液(10 mg/ml)加入到配置好的H管Rfb溶液(1.25 mg/L，5 ml)中，形成含40 mg/L的Mfx和含1.25 mg/L的Rfb的溶液Ⅱ?；靹蚝笕?.5 ml溶液Ⅱ依次從下G號管往上到B號管加入到上述Rfb溶液(1.25 mg/L，2.5 ml)中進(jìn)行梯度稀釋。(4)除A1孔外，第1行和第1列每孔各加入10 μl含1.25 mg/L的Rfb溶液，最終形成第一行和第一列的梯度濃度；H12孔加入20 μl含1.25 mg/L的Rfb溶液作為單藥對照。繼而將配置好的梯度溶液Ⅰ沿著Y軸從左2至右12每孔依次添加10 μl，將配置好的梯度溶液Ⅱ沿著X軸從上B至下H每孔依次添加10 μl，每孔混合后含液量均為20 μl，添加200 μl菌液后最終形成Mfx終濃度為0.03～2 mg/L，Pa為0.0075～8 mg/L，均為初始配置時濃度的1/20；Rfb為0.125 mg/L，為初始配置時濃度的1/10。

2.組合藥品藥敏試驗：取適量7H9液體培養(yǎng)基內(nèi)生長至對數(shù)期的標(biāo)準(zhǔn)菌株(H37Rv)菌液，磨菌比濁至1個麥?zhǔn)蠁挝籟約107菌落形成單位(CFU)/ml]，用7H9液體培養(yǎng)基以1∶100稀釋，使菌液濃度為105CFU/ml。取稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)菌株菌液(200 μl/孔)加入12個不同含藥微孔板中，同時設(shè)置100%菌量生長對照孔加至A1孔和H12孔中，由于對照孔均位于邊緣，為防止干板情況同時設(shè)置復(fù)孔。以此對比在無抗培養(yǎng)情況下的菌株生長情況；封板后37 ℃培養(yǎng)，分別于7、10、14 d后將96孔板放置于配套用的倒置放大鏡上觀察并記錄結(jié)果，以孔底出現(xiàn)肉眼可見的白色菌體沉淀為陽性。標(biāo)準(zhǔn)菌株用以檢測12塊組合藥敏板效價，不計入92株研究菌株。以標(biāo)準(zhǔn)菌株為例，其余92株菌添加方法均以此為準(zhǔn)。

3.相關(guān)定義：

1)H、R、Pa、Mfx、Rfb、Rft的單藥MIC定義為：A2～A12或B1～H1孔底菌體沉淀<100%菌量對照孔1(A1)或?qū)φ湛?(H12)所對應(yīng)單藥的MIC值，MIC值越小表明抑菌效果越好。

2)兩藥聯(lián)合檢測的FICI定義為：組合96孔板陣列中除A1～A12和A1～H1外各孔底菌體沉淀<100%菌量對照孔所對應(yīng)的2種藥品的濃度值與之前測得的兩種單藥MIC值之比的和，即：兩藥組合FICI=組合MIC[A]/單藥MIC[A]+組合MIC[B]/單藥MIC[B]，以FICI≤0.5為協(xié)同作用，0.54為拮抗。此處以H+R為例說明兩藥FICI的判定方法(圖1)。

3)3種藥品組合檢測的FICI定義為：藥品組合作用板陣列中除第1行和第1列外的孔底菌體沉淀<100%菌量對照孔所對應(yīng)的3種藥品濃度值與之前測得的3種單藥MIC值之比的和，即：三藥組合FICI=組合MIC[A]/單藥MIC[A]+組合MIC[B]/單藥MIC[B]+組合MIC[C]/單藥MIC[C]。以FICI≤0.75為協(xié)同，0.754為拮抗[3]。

協(xié)同率=兩或三種組合藥品表現(xiàn)為協(xié)同作用的菌株數(shù)/總菌株數(shù)。

三、統(tǒng)計學(xué)處理

采用GraphPad Prism 8.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的錄入和分析，考慮到樣本量較小，對計量資料采用中位數(shù)(四分位數(shù)) [M(Q1，Q3)]描述其離散趨勢，計量資料的比較采用Wilcoxon配對檢驗；計數(shù)資料以百分比(%)表示，采用χ2檢驗或Fisher精確概率法檢驗。均以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

圖1 96孔藥敏試驗板對H和R檢測 14 d后的菌株生長情況

結(jié) 果

一、不同藥品組合前后MIC檢測結(jié)果分析

單藥藥敏試驗結(jié)果顯示，H和R對大部分菌株的MIC值已經(jīng)整體升高，中位數(shù)分別為4和24 mg/L，但仍有少部分菌株對單藥MIC值較敏感，均≤1 mg/L；而Mfx和Rfb的MIC中位數(shù)均為0.5 mg/L，抑菌效果較好。

單藥H或R與組合后的R或H、Rfb或Rft與其組合Mfx-Pa后的Rfb或Rft，以及Pa與其組合Mfx、Mfx-Rfb或Mfx-Rft后的MIC值差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值均<0.001)，且組合后的MIC值明顯低于組合前，Mfx與其組合Pa后的MIC值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P值<0.05)；但Mfx與其組合Pa-Rfb 或Pa-Rft后的MIC值差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(表2)。

二、組合藥品的藥敏試驗檢測結(jié)果分析

H-R、Mfx-Pa、Mf-xPa-Rfb、Mfx-Pa-Rft藥品組合對92株菌的FICI數(shù)值范圍分別為0.06～4、0.14～4、0.09～4.75、0.15～6.5，各組合藥品表現(xiàn)為協(xié)同作用、不相關(guān)、拮抗的菌株分布株數(shù)見表3。

采用χ2檢驗或Fisher精確概率法檢驗分布情況，顯示H-R與Mfx-Pa、Mfx-Pa-Rfb與Mfx-Pa-Rft藥品組合的分布差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(Fisher精確概率法，P=0.190；χ2=1.645，P=0.439)，而H-R和Mfx-Pa與Mfx-Pa-Rfb、Mfx-Pa-Rft的分布差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=12.670，P=0.002；χ2=19.420，P<0.001；χ2=18.640，P<0.001；χ2=28.500，P<0.001)。

三、4種組合藥品的藥敏檢測結(jié)果的分層分析

1.不同耐藥菌株對4種組合藥品的FICI值：92株不同耐藥菌株對4種組合藥品的FICI值見表4。

表2 不同藥品組合前后MIC對比結(jié)果

表3 92株菌株不同F(xiàn)ICI值在4種組合藥品中的分布情況

表4 不同組合藥品對不同耐藥MTB菌株的FICI值[M(Q1，Q3)]

表5 不同耐藥菌株藥品間作用情況在4種組合藥品中的分布

1)MDR-MTB分布情況：H-R與Mfx-Pa、Mfx-Pa-Rfb組合藥品的分布差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(Fisher精確概率法，P=0.674；χ2=0.084，P=0.772)，與Mfx-Pa-Rft的分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=9.550，P=0.008)；Mfx-Pa與Mfx-Pa-Rfb和Mfx-Pa-Rft的分布差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.872，P=0.350；χ2=13.300，P=0.001)；Mfx-Pa-Rfb與Mfx-Pa-Rft的分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=2.306，P=0.316)。

2)XDR-MTB分布情況：H-R組合藥品與Mfx-Pa 的分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Fisher精確概率法，P=0.489)，與Mfx-Pa-Rfb和Mfx-Pa-Rft的分布差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=10.020，P=0.007；χ2=10.710，P=0.005)；Mfx-Pa與Mfx-Pa-Rfb和Mfx-Pa-Rft的分布差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=13.230，P=0.001；χ2=14.360，P=0.001)；Mfx-Pa-Rfb與Mfx-Pa-Rft的分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.066，P=0.967)。

2.分層分析不同方案對不同耐藥菌株的協(xié)同作用：對不同耐藥菌株的分層分析結(jié)果見表5。

討 論

我國現(xiàn)行的復(fù)治結(jié)核病標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)治療方案，是一線抗結(jié)核藥品的再組合及疊加，已不適合應(yīng)對目前復(fù)治結(jié)核病高耐藥率的現(xiàn)狀，極易導(dǎo)致治愈率下降、不良反應(yīng)加重、療程延長、中斷治療，是造成MDR-TB發(fā)生的重要原因，不利于我國“三病兩率”的控制[7]，亟需研究新的更有效的治療組合方案，而體外聯(lián)合藥敏試驗可以準(zhǔn)確評估不同藥品組合對不同耐藥性MTB的抑制活性，為臨床制定治療方案提供有效依據(jù)。

本研究通過對92株首次復(fù)治肺結(jié)核患者痰標(biāo)本分離的耐藥MTB行聯(lián)合藥敏檢測，評價標(biāo)準(zhǔn)方案和新方案體外聯(lián)合藥敏試驗的檢測效果。由于既往對敏感菌株進(jìn)行組合藥品藥敏檢測時，發(fā)現(xiàn)每種藥品的MIC值遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于該藥品單藥的正常檢測范圍，為進(jìn)一步準(zhǔn)確判斷FICI值，本研究通過檢測不同組合藥品對耐藥菌株的作用，為臨床選擇合適的抗結(jié)核化學(xué)治療方案，尤其是針對耐藥結(jié)核病患者提供了治療方案的依據(jù)。而且，本研究當(dāng)結(jié)果統(tǒng)計中出現(xiàn)單藥孔最高濃度中菌落長滿的情況時，會升高兩個濃度重復(fù)實驗；當(dāng)出現(xiàn)單藥孔最低濃度菌落不生長的情況時，會下降兩個濃度重復(fù)實驗，以確保結(jié)果的可靠性。

H和R是標(biāo)準(zhǔn)方案的核心藥品，但實際上很多復(fù)治患者均已經(jīng)對其中1種甚至2種藥品產(chǎn)生耐藥，再用來治療并不合理，效果較差。在本研究的組合藥品中，引入了Mfx、Pa和Rfb、Rft，考慮Mfx是氟喹諾酮類中殺菌效果較好的藥品，單藥MIC值低(本研究中的單藥MIC值為0.5 mg/L)，且具有不良反應(yīng)輕微、生物利用度高、組織滲透性強(qiáng)、消除半衰期長、與其他抗菌藥品無交叉耐藥性等特點(diǎn)[8]；Pa是一種復(fù)合制劑，是由異煙肼和對氨基水楊酸組成的分子化合物，對部分耐異煙肼或?qū)Π被畻钏岬木耆悦舾衃9]，可使與Mfx、Mfx+Rfb或Mfx+Rft組合后單藥的MIC值明顯下降(P值均<0.001)；而Rfb和Rft均為R的衍生物，三者具有高度的交叉耐藥性，但有研究表明Rfb和Rft對低耐R的菌株仍保留一定的殺菌活性，尤以Rfb的效果顯著[10-11]，與本研究Rfb的單藥MIC值明顯低于Rft的單藥MIC值的結(jié)果一致。

本研究不僅分析Mfx-Pa與H-R的藥敏試驗效果，也在Mfx和Pa兩藥組合的基礎(chǔ)上分析Rfb或Rft與二者組合使用時對耐藥MTB的作用效果，并與標(biāo)準(zhǔn)方案中H和R的組合藥敏效果進(jìn)行對比，進(jìn)一步分析H-R、Mfx-Pa、Mfx-Pa-Rfb、Mfx-Pa-Rft 4種藥品方案的組合作用。通過兩藥組合比較可以看到，H和R在組合后MIC值下降幅度均比較大，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，說明H和R兩藥組合有較好的協(xié)同作用；而Mfx和Pa組合后，Mfx本身的MIC值無變化，但Pa的MIC值從原來的中位數(shù)8 mg/L下降至0.0075 mg/L(P<0.001)，表明Mfx可促進(jìn)Pa的抑菌作用；但Mfx和Pa組合后的協(xié)同率(5.4%)低于H-R組合(12.0%)，F(xiàn)ICI值(1.5)高于H-R組合(1.25)，提示Mfx-Pa較H-R不能實現(xiàn)更好的抑菌效果，必須再引入第三種藥品，如利福平類藥物[12-13]。而Rfb或Rft分別與Mfx-Pa組合后，是否會優(yōu)于H-R組合，是下一步需研究解決的問題。

進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，3藥組合后的協(xié)同率明顯高于兩藥組合，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，Mfx-Pa-Rfb或Mfx-Pa-Rft組合藥品的協(xié)同率(17.4%和23.9%)明顯高于H-R、Mfx-Pa，與我們前期研究結(jié)果一致[4]。而Mfx-Pa-Rfb的協(xié)同率雖低于Mfx-Pa-Rft，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (χ2=1.645，P=0.439)，與我們前期的研究結(jié)論“Mfx-Pa-Rft組合藥品的協(xié)同作用明顯高于Mfx-Pa-Rfb”[4]有所不同。考慮到本次研究樣本量是前期研究的2.3倍，XDR-MTB菌株的數(shù)量顯著增多，且均來源于臨床首次復(fù)治肺結(jié)核患者，應(yīng)該更具有代表性，結(jié)果更可靠。

進(jìn)一步分層分析發(fā)現(xiàn)， Mfx-Pa-Rft對單耐H、MDR-MTB、XDR-MTB的協(xié)同率均比Mfx-Pa-Rfb高，F(xiàn)ICI值均低于Mfx-Pa-Rfb，提示Mfx-Pa-Rft方案更有效。XDR-MTB和MDR-MTB菌株在H-R、Mfx-Pa方案中的協(xié)同率和不相關(guān)率均相同，均無拮抗。而在兩種三藥組合中XDR-MTB的協(xié)同率(16.7%和18.5%)均低于MDR-MTB(19.4%和30.6%)，拮抗率(14.8%和14.8%)均高于MDR-MTB(5.6%和11.1%)，提示XDR-MTB菌株不僅耐單藥數(shù)量多，也極易對三藥組合產(chǎn)生拮抗，提示制訂XDR-TB患者治療方案時，不僅要關(guān)注單藥的耐藥性，也要明確治療方案對不同耐藥菌的組合作用效果，應(yīng)通過組合藥品的藥敏檢測，選擇協(xié)同率更高的藥品組合。

綜上所述，本課題在“十二五”研究基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化藥敏試驗方法、增加樣本量，驗證了新方案中Mfx-Pa-Rfb或Mfx-Pa-Rft組合藥品的協(xié)同效果。Rfb的單藥抑菌效果好于Rft，但在Mfx-Pa-Rfb和Mfx-Pa-Rft中，Rfb的協(xié)同效果卻低于Rft的協(xié)同效果，且XDR-MTB菌株不僅對耐單藥種類多，也易對組合的藥品產(chǎn)生拮抗作用，提示針對不同耐藥患者選擇藥品時，不僅應(yīng)關(guān)注單藥的抑菌效果，也要考慮藥品間組合使用的互相影響。后續(xù)我們將結(jié)合臨床治療結(jié)果對比復(fù)治患者不同方案治療前后FICI值、MIC值的變化，分析研究組合藥品藥敏檢測在治療療效評估中的應(yīng)用價值。

志謝復(fù)旦大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院王偉炳教授對本研究統(tǒng)計學(xué)處理進(jìn)行了指導(dǎo)和幫助。