正交試驗篩選榆黃蘑最佳工廠化袋栽模式*

林啟惠，楊紫威，段靜怡，陶永新，朱 堅

（福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院，福建 福州 350002）

榆黃蘑（Pleurotus citrinipileatus） 又名金頂側(cè)耳、玉皇蘑、黃金菇等，隸屬于擔(dān)子菌亞門（Basidiomycotina） 層菌綱 （Hymenomycetes） 傘菌目（Agaricales） 側(cè)耳屬 （Pleurotus）[1]。榆黃蘑既有味道鮮美、香味濃郁、營養(yǎng)豐富的食用價值，又有滋補(bǔ)強(qiáng)身的藥用價值，是珍貴的食藥兼用菌[2-4]。不但中國人喜愛，在國際市場上也較為搶手，生產(chǎn)量和效益均高于一般農(nóng)產(chǎn)品[2]。在榆黃蘑的栽培實踐中，前人總結(jié)出袋栽、床栽、塊栽和箱栽等多種模式[5]，其中生產(chǎn)中比較常用的是袋栽模式。裝袋模式包含對裝袋方式、裝料量及菌袋的選擇等，不同的裝袋模式影響著榆黃蘑的菌絲生長、原基形成、生長周期等工廠化生產(chǎn)的重要因素。以裝袋方式、裝袋高度、袋子對折口徑3個處理為試驗因素，采用3因素3水平正交試驗的方法研究裝袋模式對榆黃蘑的栽培周期和生物學(xué)效率的影響，篩選出適宜工廠化的袋栽模式最佳處理。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試菌株

榆黃蘑菌株P(guān).LC0008，來自福建省食用菌種質(zhì)資源保藏管理中心。

1.1.2 供試培養(yǎng)基配方

母種培養(yǎng)基配方：馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂 20 g、KH2PO42 g、MgSO42 g，水 1 000 mL，pH自然。

原種與栽培種培養(yǎng)基配方：木屑60%、棉籽殼22%、麩皮16%、石膏2%[6]，含水量64%。

1.1.3 塑料袋的選擇

選用的塑料袋必須厚薄均勻，扁寬一致、料面密度強(qiáng)、耐拉性好、無砂眼、無針孔，充氣后或灌水后手壓有一定強(qiáng)度。本試驗中使用聚丙烯（17 cm×33 cm） 和聚丙烯（18 cm×33 cm） 折角塑料袋。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗設(shè)計

以裝袋方式[8]（A）、裝袋高度（B）、袋子對折口徑（C） 為試驗因素，其中裝袋方式（A） 和裝袋高度（B）設(shè)3個水平，袋子口徑設(shè)2個水平，采用L9（33）正交表[7]，試驗設(shè)計見表1。

表1 正交因素水平表Tab.1 Orthogonal factor level table

如表1所示，一共9個處理，每個處理3個重復(fù)，每個重復(fù)20袋。需注意平面留氣室（A1）：緊實裝料到設(shè)計高度后壓平料面，圈套和料面之間留出約3 cm的距離；凸面留氣室（A2）：緊實裝料到設(shè)計高度使料面山包狀凸起，圈套與料面之間留出約3 cm的距離；平面無氣室（A3）：緊實裝料到設(shè)計高度后壓平料面，套上圈套使其緊扣料面，圈套與料面之間不留距離。

1.2.2 裝袋方式

拌完料后，采用多筒套高功能裝袋機(jī)裝袋，按固定的松緊度裝至試驗裝袋高度，采用頸圈和無棉蓋體封口。

1.2.3 接種方式

高壓滅菌3 h后，移至散熱室，待料溫降至28℃以下時，即可接種，采用接種室開放式接種。

1.2.4 發(fā)菌管理

將接種后的栽培袋移入25℃的走菌室層架上，室內(nèi)濕度60%～70%，及時通風(fēng)換氣，查看有無雜菌污染和其他發(fā)菌異常情況，發(fā)現(xiàn)問題及時處理。

1.2.5 出菇管理

待各個處理長滿菌袋后，移至菇房隨機(jī)插入網(wǎng)格內(nèi)。給予適當(dāng)?shù)纳⑸涔?，?dāng)菌袋口料面菌絲長滿并且相互扭結(jié)，連接成塊時，解開袋口，通過地面灑水和自動霧化加濕方法維持室內(nèi)空氣相對濕度85%～95%[9]。

1.2.6 適時采收

當(dāng)榆黃蘑的菌蓋長至2 cm～4 cm，菌蓋即將展開而略有卷邊時為采收適期[5]。適時采收，菌體色澤金黃、菌肉鮮嫩、產(chǎn)量高、品質(zhì)好，經(jīng)濟(jì)價值最高。

1.3 項目測定

1.3.1 發(fā)菌情況觀測

觀察每個處理菌絲的生長情況，判斷菌絲的長勢和顏色。

1.3.2 產(chǎn)量觀測

每個處理分別測定各重復(fù)前兩潮菇的產(chǎn)量，計算各個處理的生物學(xué)效率。生物學(xué)效率（E，%）計算公式為：

式中：M1為子實體鮮重（g）；M2為栽培料干重（g）。

1.3.3 栽培周期記錄

記錄原基形成時間、子實體采收時間等。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理菌絲生長速度比較

每個處理隨機(jī)挑選6個重復(fù)為1組，一共5組，記錄榆黃蘑菌絲的長速長勢，并對各處理的菌絲長速進(jìn)行Duncan多重比較分析，結(jié)果見表2。

表2 不同處理菌絲生長情況Tab.2 Different treatment of mycelial growth

由表2可知，隨著裝袋高度和袋子對折口徑的增加，菌絲的生長速度變慢，菌絲的生長情況整體長勢良好，差異較小，處理1的生長速度最快為1.59 cm·d-1，顯著大于其他處理。處理2、處理4、處理5、處理7的生長速度較快，但均顯著小于處理1。處理3、處理6、處理8、處理9的生長速度較慢，其中處理3的生長速度最慢為1.49 cm·d-1，顯著小于其他處理。

2.2 不同處理對栽培周期的影響

在榆黃蘑的生長發(fā)育過程中，觀察其發(fā)育情況并記錄原基形成時間和子實體采收時間等，對各處理進(jìn)行Duncan多重比較分析?？傇耘嘀芷跒椴墒諆沙钡臅r間，結(jié)果見表3。

表3 不同處理的栽培周期Tab.3 Cultivation cycles of different treatments

如表3所示，不同處理間，接種到原基形成天數(shù)、原基形成到采收天數(shù)、總栽培周期存在顯著性差異。接種到原基形成天數(shù)中，處理1顯著小于其他處理，時間最短為22.4 d；處理6顯著長于其他處理，為25.6 d。原基形成到采收天數(shù)中，處理7顯著小于其他處理，時間最短為4.4 d，其次為處理8和處理9，分別為4.7 d和5.0 d?？傇耘嘀芷谥校幚?顯著短于其他處理，為37.1 d，其次為處理1、處理8之間無顯著性差異，分別為39.5 d和39.4 d，其他處理均長于前二者。

2.3 正交試驗結(jié)果的處理優(yōu)化組合

各因素試驗方差分析見表4。

表4 各因子試驗方差分析Tab.4 Analysis of test difference for each factor

由表4可知，裝袋方式（A） 和裝袋高度（B）對榆黃蘑生物學(xué)效率都有顯著影響，袋子對折口徑（C）對生物學(xué)效率未有顯著影響，各因素之間交互作用不顯著。對3個因素的生物學(xué)效率進(jìn)行Duncan多重比較分析，結(jié)果見表5。

表5 各水平試驗方差分析Tab.5 Analysis of test differences at different levels

從表5可知，裝袋方式（A）中，平面無氣室的生物學(xué)效率為67.51%，顯著高于其他方式，即平面無氣室的生物學(xué)效率高于平面留氣室和凸面留氣室；裝袋高度（B） 中，裝袋高度為15.0 cm和16.5 cm的生物學(xué)效率極顯著于裝袋高度18.0 cm；裝袋高度15.0 cm的生物學(xué)效率顯著高于16.5 cm；袋子對折口徑（C） 對榆黃蘑生物學(xué)效率的影響無顯著性差異，且對折口徑17 cm、18 cm的生物學(xué)效率相近。

30個重復(fù)隨機(jī)分成3組，記錄產(chǎn)量，并計算其生物學(xué)效率。正交試驗結(jié)果直觀分析與SSR多重比較結(jié)果見表6。

表6 正交試驗結(jié)果直觀分析與SSR多重比較Tab.6 Visual analysis of orthogonal test results and multiple comparison of SSR

從表6可以看出，裝袋方式、裝袋高度、袋子對折口徑對生物學(xué)效率的影響依次為裝袋高度（B）＞裝袋方式（A） ＞袋子對折口徑（C），說明裝袋高度是影響生物學(xué)效率的主要因素，袋子對折口徑對生物學(xué)效率無顯著影響。9個處理組合中對榆黃蘑生物學(xué)效率影響最佳的組合為處理7，即A3B1C1。

3 結(jié)論

采用3因素3水平正交試驗，比較裝袋方式、裝袋高度、袋子對折口徑3個因素對生物學(xué)效率的影響；影響因素依次為袋高度（B） ＞裝袋方式（A）＞袋子對折口徑（C）。3個因素中，袋子對折口徑對榆黃蘑生物學(xué)效率無顯著影響，裝袋高度是影響榆黃蘑生物學(xué)效率的主要因素。裝袋方式、裝袋高度2個因素的各水平間均存在顯著差異，袋子對折口徑的2個水平無顯著差異。實際生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)，留氣室的走菌速度整體快于無氣室，可能與榆黃蘑為好氧菌類有關(guān)，留氣室內(nèi)部的氧氣促進(jìn)了菌絲的生長。但是在出菇期間，作為出菇口的套環(huán)容易傾斜，子實體容易生長在菌袋內(nèi)部，輕則出菇延遲，重則子實體污染甚至腐爛[10]。而采用平面無氣室，恰好彌補(bǔ)了留氣室的不足，且袋口處較緊，菌袋不易變形，方便后期的搬運(yùn)與接種。

當(dāng)菌袋裝料高度達(dá)18.0 cm時，生物學(xué)效率顯著降低。松緊度一致情況下，隨著裝料高度增加，栽培料的重量也增加；在一定的栽培周期內(nèi)，菌絲對栽培料的降解速度有限。裝袋高度越高，栽培料的利用率越低，生物學(xué)效率也越低。

袋子對折口徑對榆黃蘑的生物學(xué)效率無顯著影響，在實際生產(chǎn)中對折口徑17.0 cm比18.0 cm袋子節(jié)省栽培料，所以選擇17 cm×33 cm的聚丙烯折角塑料袋。