金魚造血器官壞死病傳入風(fēng)險評估

任 彤，汪 琳，尹 羿，趙相鵬，蒲 靜，馬樹寶，高志強，張 偉，張利峰

（1.北京海關(guān)技術(shù)中心，北京 100026；2.北京海關(guān)，北京 100026）

金魚造血器官壞死?。╣oldfish haematopoietic necrosis，GFHN）是引起金（鯽）魚造血器官壞死的一種病毒病，在全球多個國家和地區(qū)流行、傳播。該病病原最初被命名為金魚造血器官壞死病病毒（goldfish haematopoietic necrosis virus，GFHNV），后被稱為鯉科皰疹病毒-2 型（Cyprinid herpesvirus2，CyHV-2），屬于皰疹病毒目異樣皰疹病毒科鯉科皰疹病毒屬[1-3]。在我國，該病于2012 年首次在江蘇省報道，隨后陸續(xù)擴散至其他地區(qū)[1，4-5]，對我國金魚及鯽魚養(yǎng)殖危害極大。為評估CyHV-2 隨水生動物及產(chǎn)品跨境傳入風(fēng)險，保障國內(nèi)觀賞魚養(yǎng)殖健康發(fā)展，維護(hù)正常國際貿(mào)易，按照國際動物衛(wèi)生組織（OIE）傳入風(fēng)險評估框架開展了本次傳入風(fēng)險評估。

1 危害識別

1.1 國內(nèi)外流行現(xiàn)狀

1992—1993 年日本西部養(yǎng)殖的金魚發(fā)生了GFHN 大流行，死亡率近乎100%，這是該病的首次報道[3]。觀賞魚國際貿(mào)易極大促進(jìn)了GFHN 的迅速傳播。澳大利亞、新西蘭等其他國家或地區(qū)陸續(xù)有該病暴發(fā)的報道[3]。2012 年我國江蘇省北部鯽主養(yǎng)區(qū)首次報道發(fā)現(xiàn)GFHN。目前，北京、湖北武漢、廣東廣州、湖北洪湖、安徽巢湖等地均有檢出CyHV-2 的報道[1，4-5]。

1.2 病原學(xué)

CyHV-2 核衣殼呈六角形或球形，為雙鏈DNA 病毒，有囊膜的病毒粒子呈橢圓形。CyHV-2對乙醚、碘脫氧尿苷和酸度都比較敏感：pH ≤3 時，病毒無法復(fù)制；在有乙醚的情況下，病毒無法感染FHM 細(xì)胞。CyHV-2 在-20℃以下可長期存活。目前CyHV-2 的部分基因序列已有報道，但其完整的基因組序列及圖譜未見報道，需進(jìn)一步完善[3]。

1.3 流行病學(xué)

CyHV-2 傳染性較高，但感染譜較窄，只感染鯽魚、金魚及其普通變種（如金魚和鯽魚的雜交體）。魚卵、幼魚和成魚都有可能被CyHV-2 感染，但幼魚比成魚更易感染，通常引起大量死亡的是小于1 齡的幼魚，成魚也有死亡的報道。與金魚種系相近的魚類即使在適宜溫度長期與病魚共養(yǎng)也不會發(fā)病。GFHN 受水溫影響較大，15～25 ℃易發(fā)病，故春秋季高發(fā)。Goodwin 等[6]證實CyHV-2 可垂直傳播。

1.4 臨床癥狀

典型臨床癥狀有，呼吸頻率增加、昏睡、食欲不佳或厭食，患病魚停留在水底部；解剖后能看到鰓蒼白、肝蒼白、腸道空，病魚鰓出血，鰾有瘀斑性出血，鰭有水泡狀膿皰；有些魚還會出現(xiàn)腹部膨大，眼球突出等癥狀[2-3]。

1.5 診斷

1.5.1 細(xì)胞培養(yǎng)分離 通常情況下，OIE 推薦的首選診斷方法是細(xì)胞培養(yǎng)分離。但研究發(fā)現(xiàn)，CyHV-2很難在魚類病毒分離常用的細(xì)胞系中增殖。

1.5.2 分子生物學(xué)診斷 Goodwin 等[6]針對CyHV-2 基因設(shè)計引物和探針，建立的實時熒光TaqMan PCR 方法，可以區(qū)分CyHV-2 與CyHV-1和CyHV-3，靈敏度可達(dá)到1 個拷貝數(shù)。張旻等[7]建立的熒光 PCR方法的檢測靈敏度為10個拷貝數(shù)，且不與其他錦鯉皰疹病毒屬病毒發(fā)生交叉反應(yīng)。目前，基于該方法研制的檢測試劑盒已獲國家發(fā)明專利。分子生物學(xué)檢測方法特別是熒光PCR 方法在CyHV-2 檢測中發(fā)展最為迅速。

1.5.3 其他 電鏡觀察是最直接的檢測方法。

2 風(fēng)險評估

基于CyHV-2 流行病學(xué)特征和病原學(xué)特性，從活魚、冰鮮魚和冷凍魚及其制品，以及運輸魚的水、包裝物、工具等方面，分別進(jìn)行傳入評估、發(fā)生評估及后果評估。

2.1 養(yǎng)殖用活易感魚類

因魚卵、幼魚、成魚均可感染CyHV-2，而我國觀賞魚等的活魚貿(mào)易較多，所以CyHV-2 隨活鯽魚、金魚及其普通變種傳入我國的風(fēng)險很高，進(jìn)入養(yǎng)殖業(yè)后可迅速傳播，因此綜合評估為高風(fēng)險。

2.2 食用的活易感魚類

對CyHV-2 敏感的食用魚為鯽魚，如果其帶有CyHV-2，則傳入風(fēng)險很高。但因為食用用途，進(jìn)入養(yǎng)殖水域而引發(fā)傳播的可能比較小，評估為低風(fēng)險；傳入后引起嚴(yán)重后果的可能性也不大。綜合認(rèn)為，食用易感魚類攜帶CyHV-2 傳入我國的風(fēng)險很高，但發(fā)生風(fēng)險較低，因此總體屬于中等風(fēng)險。

2.3 冰凍和冰鮮的易感魚類

由于CyHV-2 低溫下可長期存活，因此病原隨冰凍和冰鮮的易感魚類傳入的風(fēng)險很高。但因其一般用于食用或加工，不太可能進(jìn)入養(yǎng)殖水域，因此發(fā)生風(fēng)險低，傳入后引起嚴(yán)重后果的可能性不大，因此總體評估為中等風(fēng)險。

2.4 用做餌料的活魚

用做餌料的活魚可能包含對CyHV-2 易感的魚類，因此如果來自疫區(qū)，則攜帶病毒傳入的風(fēng)險較高，而來自非疫區(qū)則是風(fēng)險較低的。綜合來看，傳入風(fēng)險評估為中等。如果用做餌料的活魚攜帶病毒，就有可能在投喂時傳播病毒，但因?qū)yHV-2 易感的魚類少，所以發(fā)生風(fēng)險為中等。投喂活魚餌料的主要后果是將CyHV-2 傳入養(yǎng)殖水域，因此總體評估為中等風(fēng)險。

2.5 易感魚加工產(chǎn)品

產(chǎn)品加工包括熟制、殺菌、烘干等處理過程，一般來說達(dá)到了滅活病毒的條件，因此總體評估為低風(fēng)險。

2.6 非易感魚類

非易感魚類體內(nèi)不會攜帶CyHV-2，但其可機械攜帶病毒，因此需要對運輸魚的水進(jìn)行消毒。而冰鮮非易感魚類及其產(chǎn)品一般用于食用，因此總體評估為低風(fēng)險。

2.7 運輸活魚的水、包裝物、工具等

運輸活魚的水、包裝物、工具等傳播CyHV-2的傳入風(fēng)險主要取決于是否來自疫區(qū)，但消毒后的發(fā)生和后果評估均為低風(fēng)險。

2.8 小結(jié)

通過對上述不同情況分別進(jìn)行風(fēng)險評估后，得出養(yǎng)殖用活易感魚類的風(fēng)險預(yù)測為高，而食用的、冰凍和冰鮮的以及用做餌料的易感魚類風(fēng)險預(yù)測為中，運輸活魚的水、包裝、工具風(fēng)險不確定，取決于是否來自疫區(qū)。其余風(fēng)險評估為低（表1）。

3 風(fēng)險管理

3.1 養(yǎng)殖用活易感魚類

建議只從非疫區(qū)進(jìn)口。在春秋季節(jié)對出口的養(yǎng)殖場進(jìn)行不短于2 年的連續(xù)監(jiān)測，特別要求出口國重點檢測自然死亡和瀕死的魚。對出口國要求進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測，并在進(jìn)口后對魚及養(yǎng)殖水進(jìn)行嚴(yán)格檢疫。建議不要在流行季節(jié)進(jìn)口，并且盡量進(jìn)口魚卵，同時對魚卵進(jìn)行消毒處理，不要進(jìn)口活魚，特別是1 齡以下的魚苗。

表1 風(fēng)險評估結(jié)論

3.2 其他易感魚類及其產(chǎn)品

對于用于食用的活易感魚類，建議避免從疫區(qū)進(jìn)口，并對養(yǎng)殖水進(jìn)行處理后排放；對于冰凍和冰鮮的易感魚類，建議只從非疫區(qū)進(jìn)口，并在進(jìn)口后取樣進(jìn)行常規(guī)檢疫；對于用做鮮活餌料的易感魚類，建議不要用做鮮活餌料，改用經(jīng)過加工處理后的野雜魚；對于易感魚類加工產(chǎn)品，屬低風(fēng)險，可以自由貿(mào)易。

3.3 非易感魚類

需要了解出口漁場的位置，如果是從疫區(qū)來的活魚，則需要對魚帶水進(jìn)行常規(guī)消毒處理，同時對水和包裝物等進(jìn)行適當(dāng)處理。來自非疫區(qū)的，可以自由貿(mào)易。

3.4 運輸活魚的水、包裝、運輸工具和用具等

由于水、包裝等是否來自疫區(qū)不確定，而且攜帶病毒數(shù)量通常很少，難以檢測，因此建議對運輸用水和包裝等采取常規(guī)消毒的強制措施。

4 結(jié)論

風(fēng)險評估認(rèn)為，傳入CyHV-2 的主要威脅是來自疫區(qū)的養(yǎng)殖用活的鯽魚、金魚及其普通變種，其次是用于食用的易感魚類以及冰凍和冰鮮的易感魚類。建議對進(jìn)口的活易感魚類（金魚、鯽魚及其普通變種），嚴(yán)格采取相應(yīng)的風(fēng)險管理措施，要求出口漁場進(jìn)行2 年以上的監(jiān)測。對食用的、冰凍和冰鮮的易感魚類避免從疫區(qū)進(jìn)口，用做餌料的易感魚類改用經(jīng)過加工處理后的野雜魚；而加工后的魚制品及非易感魚類，可允許自由貿(mào)易。對運輸活魚的水、包裝等進(jìn)行強制常規(guī)消毒。