血清同型半胱氨酸和氫過(guò)氧化物檢測(cè)在AD和VAD中的應(yīng)用

李均銳,張 敏

廣西壯族自治區(qū)南寧市社會(huì)福利醫(yī)院，廣西南寧 530003

阿爾茨海默病(AD)和血管性癡呆(VAD)是癡呆的兩種常見類型，前者是由于神經(jīng)退行性病變導(dǎo)致患者出現(xiàn)進(jìn)行性記憶、言語(yǔ)障礙及人格改變，后者是由于腦血管病變導(dǎo)致患者出現(xiàn)執(zhí)行、認(rèn)知功能障礙，這兩種疾病都會(huì)對(duì)患者的日常生活產(chǎn)生負(fù)面影響[1]。臨床研究表明，AD和VAD雖然疾病種類不同，但二者發(fā)病機(jī)制有共性，心腦血管疾病的危險(xiǎn)因素也成為AD的危險(xiǎn)因素，AD的標(biāo)志物淀粉樣蛋白β同時(shí)也受到VAD的影響[2]。因此，以疾病發(fā)病特征作為AD和VAD的區(qū)分手段存在明顯欠缺。調(diào)查報(bào)告顯示，癡呆患者中AD占70%，VAD占20%，但僅有不到2%的患者能夠得到及時(shí)有效的治療[2-3]。究其原因，正是由于兩種疾病未得到快速、有效區(qū)分，癡呆患者無(wú)法及時(shí)得到針對(duì)性治療?；诖?，為探討AD和VAD患者的鑒別診斷手段，本研究選擇性測(cè)定同型半胱氨酸和氫過(guò)氧化物水平，以期為二者的鑒別診斷提供新的參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院2018年2月至2019年2月住院治療的61例AD患者(甲組)和41例VAD患者(乙組)為觀察對(duì)象，另選取同期體檢健康并經(jīng)腦功能檢查相關(guān)指標(biāo)正常者50例納入丙組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)甲組患者符合AD的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，Hachinski缺血指數(shù)(HIS)<4分；(2)乙組患者符合VAD的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，HIS>7分。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)近期服用過(guò)B族維生素及葉酸類藥物；(2)存在肝腎等臟器功能障礙性疾病，免疫功能嚴(yán)重受損。甲組中男30例，女31例；年齡71～93歲，平均(83.35±5.2)歲；合并高血壓者占62.78%，合并糖尿病者占17.63%。乙組中男22例，女19例；年齡69～94歲，平均(82.74±4.8)歲；合并高血壓者占64.18%，合并糖尿病者占16.42%。丙組中男26例，女24例；年齡72～92歲，平均(83.14±4.2)歲。3組性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審核通過(guò)，所有研究對(duì)象及家屬均知情同意。

1.2方法 清晨采集血液標(biāo)本，采集標(biāo)本前要求3組研究對(duì)象空腹12 h以上。對(duì)每例研究對(duì)象分別采集2管血液標(biāo)本，每管3 mL，放入4 ℃環(huán)境中冷藏1 h，取出后以3 000 r/min離心提取血清。采用循環(huán)酶法檢測(cè)同型半胱氨酸水平,檢測(cè)試劑盒購(gòu)自寧波美康生物科技股份有限公司；采用分光光度法檢測(cè)氫過(guò)氧化物水平，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京百奧萊博科技有限公司[5-6]。

2 結(jié) 果

2.13組檢測(cè)結(jié)果比較 甲、乙組的同型半胱氨酸、氫過(guò)氧化物水平明顯高于丙組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；甲組同型半胱氨酸、氫過(guò)氧化物水平高于乙組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 3組檢測(cè)結(jié)果比較

2.2ROC曲線分析 分別采用血清同型半胱氨酸、氫過(guò)氧化物單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)AD和VAD進(jìn)行鑒別診斷，曲線下面積(AUC)分別為0.744、0.805、0.816。見圖1、表2。

圖1 ROC曲線

表2 血清同型半胱氨酸和氫過(guò)氧化物單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)的診斷效能

3 討 論

癡呆患者雖然意識(shí)清醒，但無(wú)法控制日常社會(huì)活動(dòng)行為，隨著病情加重，其意志、思維、行為，甚至整體觀念和人格都將發(fā)生巨大變化，表現(xiàn)出生理功能缺陷[5]。AD和VAD的臨床表現(xiàn)相似，AD患者會(huì)有VAD表現(xiàn)，而VAD患者也會(huì)出現(xiàn)AD癥狀。戴蓉芳等[9]在對(duì)氧化應(yīng)激產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)元所處的環(huán)境易被自由基破壞，致使神經(jīng)元的正常作用機(jī)制遭到破壞，大腦損傷明顯。AD患者淀粉樣蛋白β在氧化應(yīng)激作用下不斷積累，可增加神經(jīng)毒性，逐漸破壞血腦屏障，造成血管損傷。因此，本研究將氧化應(yīng)激指標(biāo)中的氫過(guò)氧化物和血清同型半胱氨酸作為檢測(cè)指標(biāo)，對(duì)以上兩種疾病進(jìn)行鑒別診斷。

氧化應(yīng)激是指體內(nèi)氧化與抗氧化作用嚴(yán)重失衡的狀態(tài)，往往由于中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，導(dǎo)致蛋白酶分泌加快，產(chǎn)生大量氧化中間產(chǎn)物，導(dǎo)致人體衰老或發(fā)生疾病。AD、VAD患者的檢查結(jié)果顯示，大量由氧化應(yīng)激誘發(fā)的大腦損傷出現(xiàn)在死亡患者的大腦海馬區(qū)域內(nèi)，雖然目前并無(wú)明顯證據(jù)表明氧化應(yīng)激各指標(biāo)水平和大腦記憶衰退具有直接因果聯(lián)系，但可間接說(shuō)明AD和VAD與氧化應(yīng)激存在聯(lián)系，測(cè)定氧化應(yīng)激產(chǎn)物如同型半胱氨酸和氫過(guò)氧化物可作為AD和VAD臨床診斷的參考依據(jù)[10-11]。同型半胱氨酸作為一種含硫氨基酸，只能由蛋氨酸分解而來(lái)，它既可以誘導(dǎo)血管平滑肌增生，致使動(dòng)脈粥樣硬化，也可通過(guò)抑制蛋白C活動(dòng)機(jī)制從而降低血栓調(diào)節(jié)素表達(dá)，造成血小板高凝、聚集，引發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化。

本研究檢測(cè)了AD和VAD患者的同型半胱氨酸和氫過(guò)氧化物水平，并將其與體檢健康者進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)3組研究對(duì)象的氧化應(yīng)激指標(biāo)均存在不同程度的差異：甲、乙組的同型半胱氨酸和氫過(guò)氧化物水平明顯高于丙組(P<0.05)，表明AD、VAD患者血管內(nèi)皮損傷明顯，同時(shí)也證明檢測(cè)同型半胱氨酸和氫過(guò)氧化物水平可對(duì)AD、VAD患者與健康人進(jìn)行區(qū)分，這與吳佳慧等[12]研究結(jié)論一致。甲組同型半胱氨酸、氫過(guò)氧化物水平高于乙組，說(shuō)明AD患者氧化應(yīng)激程度更高。本研究分別采用血清同型半胱氨酸、氫過(guò)氧化物單項(xiàng)及兩項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)AD和VAD進(jìn)行鑒別診斷，其靈敏度分別為0.738、0.885、0.852，特異度分別為0.732、0.683、0.732，約登指數(shù)分別為0.470、0.568、0.584，AUC分別為0.744、0.805、0.816。該結(jié)果表明，聯(lián)合診斷的AUC最高，即說(shuō)明血清同型半胱氨酸與氫過(guò)氧化物聯(lián)合檢測(cè)對(duì)AD和VAD的鑒別診斷價(jià)值最高。此外需要注意的是，老年癡呆患者大多合并糖尿病和高血壓等多種基礎(chǔ)疾病，這些基礎(chǔ)疾病會(huì)對(duì)患者的氧化應(yīng)激反應(yīng)造成影響，同時(shí)也會(huì)對(duì)患者的認(rèn)知水平造成影響，需將這些因素排除在外。本研究中，甲、乙兩組合并基礎(chǔ)疾病者的比例接近，排除了這一因素的干擾。

綜上所述，血清同型半胱氨酸和氫過(guò)氧化物可通過(guò)對(duì)腦血管和腦神經(jīng)元的損害造成不同程度的血腦屏障功能障礙。因此，可通過(guò)檢測(cè)血清同型半胱氨酸和氫過(guò)氧化物水平對(duì)AD和VAD患者進(jìn)行鑒別診斷。