癡呆和非癡呆患者血漿鳶尾素含量比較

張偉彬，阮清偉，姚鋒，俞卓偉

1.復(fù)旦大學(xué)附屬華東醫(yī)院老年科，上海市老年醫(yī)學(xué)研究所，上海市老年醫(yī)學(xué)臨床重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海200040；2.上海市金山區(qū)眾仁老年護(hù)理醫(yī)院，上海201501

鳶尾素（irisin）是2012年由Bostrom 等發(fā)現(xiàn)的一種新的肌肉因子，由運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)，具有激活皮下脂肪組織，刺激白色脂肪組織轉(zhuǎn)變?yōu)樽厣窘M織，介導(dǎo)多種與能量代謝相關(guān)的生物學(xué)反應(yīng)的功能[1]。鳶尾素具有調(diào)節(jié)葡萄糖和脂質(zhì)代謝的功能，常被應(yīng)用于心血管疾病相關(guān)的研究中[2]。最新的研究結(jié)果顯示鳶尾素可調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的能量平衡和代謝[3]，通過(guò)增加海馬區(qū)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）的合成，促進(jìn)神經(jīng)元生成，維持神經(jīng)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能，從而提高大腦認(rèn)知水平[4]。目前國(guó)內(nèi)缺乏關(guān)于鳶尾素與癡呆相關(guān)的研究，因此本研究目的為比較癡呆與非癡呆老年患者血漿鳶尾素水平表達(dá)差異；進(jìn)一步比較了慢性活動(dòng)受限對(duì)不同患者血漿鳶尾素濃度的影響；最后，比較癡呆最常見(jiàn)的兩個(gè)亞型，阿爾茲海默病及血管性癡呆中血漿鳶尾素水平是否有區(qū)別。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取2016年1月-2016年12月在上海金山眾仁老年護(hù)理院的77 例住院患者與2 例在復(fù)旦大學(xué)附屬華東醫(yī)院骨科住院患者組成79 例癡呆患者。由于二甲雙胍治療糖尿病會(huì)顯著促進(jìn)鳶尾素生成，排除2 例相應(yīng)的癡呆患者[5]。其中50 例診斷為阿爾茲海默?。ˋlzheimer's disease，AD）,設(shè)為AD 組；29例診斷為血管性癡呆（vascular cementia，VD），設(shè)為VD 組；在復(fù)旦大學(xué)附屬華東醫(yī)院骨科住院患者中招募49 例為非癡呆老年人,設(shè)為非癡呆組。所有病例均嚴(yán)格參照世界衛(wèi)生組織的國(guó)際疾病分類第十版（International classification of disease，10th revision，ICD-10）的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]和美國(guó)精神疾病診斷與分類標(biāo)準(zhǔn)（DSM-IV）作出癡呆診斷[7]；根據(jù)NINCDSADRDA 阿爾茨海默氏病診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷阿爾茲海默氏病[8]，且Hachinski 缺血量表（hachinskiischemic scale，HIS）＜4 分[9]；根據(jù)NINCDS-AIREN 標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合臨床病史、神經(jīng)系統(tǒng)查體、頭顱CT 等診斷血管性癡呆，且VD 患者HIS 量表評(píng)分均＞7 分；癡呆組活動(dòng)受限的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)為患者臥床是否＞3 個(gè)月，非癡呆組活動(dòng)受限為急性活動(dòng)受限＞3 d。上述工作由金山區(qū)眾仁老年護(hù)理醫(yī)院的主治醫(yī)師完成。本研究經(jīng)復(fù)旦大學(xué)附屬華東醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。所有參與患者或其家屬（監(jiān)護(hù)人）均知情同意。

1.2 血漿和腦脊液鳶尾素檢測(cè)方法 患者禁食8 h 后，清晨空腹抽取靜脈血5 mL，置聚丙烯EDTA 抗凝管中，以3 500 r/min 離心10 min，取上清于-80°凍存。

鳶尾素測(cè)定：采用酶聯(lián)免疫吸附法((Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA) 進(jìn)行血漿鳶尾素檢測(cè)，試劑盒型號(hào)：Cat.No.EK-067-29,lot number 606529,Phoenix Pharmaceuticals,CA,USA。記錄結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 25.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，不符合正態(tài)分布時(shí)采用中位數(shù)（25%，75%）表示，對(duì)于定量資料符合正態(tài)分布和方差齊性則用 檢驗(yàn)或方差分析，不符合正態(tài)分布和方差齊性則使用秩和檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例表示，對(duì)于定性資料使用卡方檢驗(yàn)。采用邏輯回歸分析enter法校正年齡和性別因素分析。以＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料 一共有77 例癡呆患者和49 例非癡呆老年人納入本次研究的統(tǒng)計(jì)分析，所有受試者的年齡均≥60 歲。3 組之間在年齡、性別上差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？偘V呆患者平均年齡（84.1±7.2）歲。其中AD組平均年齡為（84.8±7.2）歲，男性18 例，女性32例；VD 組平均年齡為（82.9±7.4）歲，男性9 例，女性18 例；非癡呆組患者平均年齡為（80.2±9.9），男性19 例，女性30 例。非癡呆組患者具有功能受限相對(duì)于AD 組和VD 組受試者較多（=0.022），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1。

表1 AD、VD 與非癡呆組患者的年齡、性別和受限的構(gòu)成

2.2 癡呆和非癡呆患者血漿尾素含量的比較 77 例癡呆患者的血漿鳶尾素濃度為（11.54±7.14）ng/mL 略低與49 例非癡呆患（12.45±5.94）ng/mL，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（=0.458）。見(jiàn)表2。

表2 癡呆患者和非癡呆患者血漿鳶尾素的差異比較

2.3 活動(dòng)受限對(duì)鳶尾素含量的比較 對(duì)于癡呆及非癡呆患者根據(jù)非受限和慢性活動(dòng)受限進(jìn)行分組。癡呆患者中，33 例活動(dòng)受限；44 例活動(dòng)不受限；非癡呆患者中，活動(dòng)受限人數(shù)為33 例，無(wú)活動(dòng)受限者16 例。癡呆患者中，受限和非受限患者血漿鳶尾素的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而非癡呆患者中，非受限患者的血漿鳶尾素水平較受限患者高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表3和表4。通過(guò)邏輯回歸校正年齡和性別因素后，發(fā)現(xiàn)血漿鳶尾素水平是非癡呆患者受限和非受限的獨(dú)立影響影響因素。

表3 癡呆患者中受限和非受限患者血漿鳶尾素含量的比較

表4 非癡呆患者中受限和非受限患者血漿鳶尾素含量的比較

2.4 AD 與VD 組血漿鳶尾素比較 AD 組患者血漿中鳶尾素含量10.46（8.30，12.42）ng/mL 較VD 組患者9.88（7.25，13.19）ng/mL 高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表6。

3 討論

鳶尾素是在運(yùn)動(dòng)等因素刺激下，由于骨骼肌過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體 輔激活因子1 (peroxisome proliferator-activated receptor coactivator-1 ，PGC-1 )上調(diào)，而促進(jìn)Ⅲ型纖連蛋白組件包含蛋白5 (type Ⅲdomain-containing protein 5，F(xiàn)NDC5) 裂解，經(jīng)蛋白酶水解而生成，分泌進(jìn)血液[10-11]。鳶尾素的氨基酸序列具有高度保守性[12]。鳶尾素在體內(nèi)的分布廣泛，在骨骼肌等肌肉組織中高度表達(dá)，在腦組織中也有少量表達(dá)，同時(shí)，也可在組織體液如血漿、腦脊液和唾液等中檢測(cè)到鳶尾素[13]。

鳶尾素具有活化大腦神經(jīng)通路的作用[13]。郭培培等[14]研究結(jié)果顯示鳶尾素預(yù)處理能夠減輕大鼠缺血再灌注損傷。目前的研究表明血漿鳶尾素可能是由脈絡(luò)叢的內(nèi)皮細(xì)胞的受體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)運(yùn)方式[13]，通過(guò)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的模式通過(guò)血腦屏障而進(jìn)入腦脊液。運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)產(chǎn)生FNDC5 能裂解為鳶尾素后釋放入血，能夠改善中樞功能[15]。而在動(dòng)物研究中，通過(guò)腺病毒載體將外周的FNDC5 注射入小鼠的肝臟，導(dǎo)致血漿胰島素水平的增加，腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子和海馬其他神經(jīng)保護(hù)基因表達(dá)的增加[16]，對(duì)突觸可塑性和記憶功能具有保護(hù)作用。

本研究的目的是比較癡呆患者及非癡呆患者體內(nèi)血漿鳶尾素含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)對(duì)于非癡呆患者血漿鳶尾素含量較高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？赡苁怯捎诒狙芯康幕颊呤芟薇壤痪人?。Lourenco 等[15]研究結(jié)果顯示13 例晚期AD 患者與40 例健康或輕度認(rèn)知功能障礙的患者相比，血漿中鳶尾素含量差異不顯著。本研究和Lourenco 等的研究樣本量均較少，同時(shí)，鳶尾素表達(dá)差異受多種因素影響，患者的個(gè)人因素：活動(dòng)能力，甲狀腺功能、慢性共患病數(shù)（糖尿病、慢性腎病的分期等）、是否合并肌少癥；藥物的作用因素：糖尿病藥物二甲雙胍等、高血壓藥物等；樣品的采集時(shí)間，包括采集的時(shí)段（上午、下午）都會(huì)影響鳶尾素的檢測(cè)結(jié)果[10]。因此癡呆和非癡呆患者的血漿鳶尾素水平是否具有差異，需要更大樣本的隊(duì)列來(lái)證實(shí)本研究的結(jié)果。

本研究前期的研究表明，血漿A 和tau 蛋白等與癡呆的進(jìn)展相關(guān)[17]，因此下一步研究將結(jié)合鳶尾素和A 等血漿標(biāo)志物進(jìn)行比較，進(jìn)一步評(píng)估血漿鳶尾素水平應(yīng)用于癡呆診斷的可行性。

血漿鳶尾素水平的改變與日常生活功能異常密切相關(guān)，血漿鳶尾素水平下降提示肌肉廢用程度嚴(yán)重[18]。有研究結(jié)果顯示短期運(yùn)動(dòng)后會(huì)增加鳶尾素的合成，但血漿鳶尾素含量會(huì)隨著運(yùn)動(dòng)結(jié)束持續(xù)下降，約20 min后就降至正常水平[19]。長(zhǎng)期運(yùn)動(dòng)對(duì)于血漿鳶尾素含量的影響有較大爭(zhēng)議，有文獻(xiàn)認(rèn)為長(zhǎng)期運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)了體內(nèi)的鳶尾素含量，且由于機(jī)體調(diào)節(jié)能力增強(qiáng)，增強(qiáng)了血漿鳶尾素含量的穩(wěn)定性，可能是與運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度相關(guān)。耐力訓(xùn)練運(yùn)動(dòng)會(huì)升高血漿鳶尾素含量，而劇烈運(yùn)動(dòng)對(duì)于長(zhǎng)期血漿鳶尾素含量并無(wú)較大影響[20]。本研究對(duì)受限及非受限患者進(jìn)行比較。數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，非癡呆活動(dòng)受限患者的血漿鳶尾素含量遠(yuǎn)低于非受限患者。癡呆患者中，受限患者血漿鳶尾素稍低于非受限患者，但差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?；顒?dòng)受限會(huì)導(dǎo)致鳶尾素產(chǎn)生減少，但是由于癡呆患者的血腦屏障受損[21]，肌源性的鳶尾素會(huì)進(jìn)入腦脊液中，腦源性鳶尾素也會(huì)隨著中樞老化而分泌增加，共同導(dǎo)致癡呆患者受限和非受限的鳶尾素水平無(wú)差異。

表5 非癡呆患者中校正年齡和性別后受限和非受限患者血漿鳶尾素含量邏輯回歸分析

表6 AD 與VD 患者的血鳶尾素含量比較

最后，本研究對(duì)AD 和VD 患者的血漿鳶尾素含量進(jìn)行比較，結(jié)果顯示血漿鳶尾素不能用于區(qū)分這兩個(gè)癡呆的亞型。但Lourenco 等的研究表明癡呆患者相對(duì)于健康老年人，認(rèn)知功能下降，腦脊液的鳶尾素水平顯著降低，因此，通過(guò)體育鍛煉增加腦脊液鳶尾素水平的表達(dá)是具有臨床預(yù)防意義。

綜上所述，本研究結(jié)果顯示，癡呆患者血漿液鳶尾素與非癡呆患者差異不明顯?？赡苁怯捎? 組間活動(dòng)受限的比率差異較大所致。而血漿鳶尾素水平是否能夠應(yīng)用于癡呆人群的鑒別中，還需要更大樣本和排除多種影響因素條件下進(jìn)行比較研究。慢性軀體活動(dòng)受限會(huì)降低血漿鳶尾素，老年人需要加強(qiáng)鍛煉，能夠增加肌源性鳶尾素，從而能夠?qū)ν挥|和記憶功能產(chǎn)生有益作用，預(yù)防認(rèn)知功能下降。