頭孢菌素類抗生素口服固體制劑的有關(guān)物質(zhì)質(zhì)量評價

梅芊，李茜，李楊，劉英

(河南省食品藥品檢驗所，鄭州 450018)

β-內(nèi)酰胺類抗生素按作用機制可分為青霉素類和頭孢菌素類。1945年意大利醫(yī)學博士Giuseppe Brotzu[1]從撒丁島卡利亞里市一個污水排放口附近的海水中分離出一種真菌，定義為頂頭孢霉菌(Cephalosporin acremonium，現(xiàn)為Acremonium chrysogenum )。1954年牛津大學的Guy Newton和Edward Abraham從該株真菌中分離得到頭孢菌素N，1955年又從頭孢菌素N中分離出頭孢菌素C，這是第一個具有廣譜抗菌和耐青霉素酶特點的頭孢菌素，但抗菌效力較弱。1962年禮來公司的Robert Morin發(fā)現(xiàn)裂解頭孢菌素C上的側(cè)鏈D-α-氨基己二酸可得到7-氨基頭孢烷酸(7-ACA)，通過在其C7位上進行化學側(cè)鏈修飾可以得到更新型、更高效的頭孢菌素類抗生素。1964年第一個頭孢菌素類抗生素藥物(先鋒霉素)應(yīng)用于臨床，而頭孢菌素類抗生素因其廣譜、低毒、易于給藥和良好的藥代動力學特性，成為目前使用最廣泛的抗菌藥物之一。頭孢菌素類的作用機制與青霉素類相同，主要通過干擾細菌細胞壁主要成分肽聚糖的合成而發(fā)揮抗菌作用。根據(jù)頭孢菌素類抗生素的開發(fā)年代、抗菌譜、抗菌活性、腎毒性及對β-內(nèi)酰胺酶的穩(wěn)定性可分為五代[2]。

2018年我省對口服頭孢菌素類抗生素藥品進行有關(guān)物質(zhì)專項監(jiān)督抽驗，抽得樣品共7個品種58批次。本文按檢驗標準對所有樣品進行有關(guān)物質(zhì)檢查，并對結(jié)果進行分析，同時對發(fā)現(xiàn)的問題進行探討，為口服頭孢菌素類抗生素的有關(guān)物質(zhì)分析及質(zhì)量控制提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器與試劑

Waters e2695/2489液相色譜儀(美國Waters公司)，Agilent 1200液相色譜儀(美國Agilent公司)，XPE205電子天平(梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司)。甲醇、乙腈為色譜純(MERCK公司)，鹽酸、醋酸鈉、10%四丁基氫氧化銨溶液、磷酸、乙酸、磷酸氫二鈉、氫氧化鈉、磷酸二氫銨、甲酸、25%四甲基氫氧化銨溶液、乙二胺四醋酸二鈉、磷酸二氫鉀、氫氧化鉀均為分析純，水為MillQ去離子水。

1.2 樣品

頭孢氨芐對照品(130408-201411，94.4%)，雙氫苯甘氨酸對照品(130434-201403，94.7%)，7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸(130416-201006，98.5%)，α-苯甘氨酸(130415-200904，99.8%)，α-對羥基苯甘氨酸(130435-200502，99.4%)均由中國食品藥品檢定研究院提供。

58批次樣品由河南省食品藥品檢驗所監(jiān)督辦抽自省內(nèi)經(jīng)營單位57批次、醫(yī)療機構(gòu)1批次，共7個品種。按照生產(chǎn)企業(yè)所屬省份，覆蓋全國14個省、自治區(qū)、直轄市，共29家，有一定的抽樣代表性。具體抽樣信息見表1。

2 試驗方法

2.1 色譜條件

色譜柱為Kromasil 100-5-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)，進樣量20 μL。各品種有關(guān)物質(zhì)色譜條件見表2。

2.2 標準規(guī)定

各品種供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，按表3的檢驗標準規(guī)定限值進行判定。

3 試驗結(jié)果

本次抽驗樣品中，不同企業(yè)的同一品種相同劑型樣品有關(guān)物質(zhì)含量差異較小，且均遠低于標準規(guī)定限值，表明目前上市的頭孢菌素類抗生素有關(guān)物質(zhì)總體情況均良好。

3.1 頭孢拉定

頭孢拉定膠囊檢出主要雜質(zhì)17個，7-ADCA結(jié)果為未檢出0.01%，均值為0.03%；雜質(zhì)13含量最高，均值為1.3%；雜質(zhì)2～雜質(zhì)6含量相對較高，均值在0.03%～0.14%之間；其余雜質(zhì)含量均較低，均值不大于0.01%；不同企業(yè)間的樣品同一雜質(zhì)含量差異較小。

3.2 頭孢克肟

抽驗頭孢克肟品種包含4個劑型，頭孢克肟片、膠囊、分散片有關(guān)物質(zhì)標準為中國藥典2015年版二部，不同劑型樣品中均為雜質(zhì)5含量最高，除雜質(zhì)2外，其余雜質(zhì)的含量基本無差異，見圖1。頭孢克肟咀嚼片有關(guān)物質(zhì)執(zhí)行標準為國家食品藥品監(jiān)督管理局標準YBH02452012，共檢出14個雜質(zhì)，見圖2，同一企業(yè)不同批次間結(jié)果基本一致。

表1 抽驗樣品信息

表2 有關(guān)物質(zhì)色譜條件

表3 各品種有關(guān)物質(zhì)標準規(guī)定限值

3.3 頭孢氨芐

抽驗頭孢氨芐片僅1批次，未檢出7-ADCA，α-苯甘氨酸含量為0.006%，其他單個雜質(zhì)為0.1%，其他各雜質(zhì)和為0.2%，均遠低于規(guī)定限值。

頭孢氨芐膠囊共19批次，檢出5個雜質(zhì)，各企業(yè)間樣品的7-ADCA、α-苯甘氨酸、其他單個雜質(zhì)及其他各雜質(zhì)和含量差異較小，均遠低于標準規(guī)定限度。

3.4 頭孢呋辛酯

抽驗頭孢呋辛酯片、膠囊共檢出6個雜質(zhì)，典型色譜圖見圖3，其中△3-異構(gòu)體含量相對較高，且各企業(yè)間差異稍大，但均低于規(guī)定限度，△3-異構(gòu)體為降解產(chǎn)物[13]，故其含量的差異可能與企業(yè)間不同生產(chǎn)工藝有關(guān)；其余雜質(zhì)含量基本一致。

3.5 頭孢泊肟酯

抽驗頭孢泊肟酯片共檢出18個雜質(zhì)，見圖4，雜質(zhì)C+雜質(zhì)B-Ⅱ的含量最高，且企業(yè)間差異較大；其余雜質(zhì)含量均較低，企業(yè)間結(jié)果基本一致，差異較小。

3.6 頭孢地尼

頭孢地尼膠囊僅抽到1批次，檢出雜質(zhì)G與雜質(zhì)H和為0.2%，雜質(zhì)I為0.1%，雜質(zhì)J為0.1%，雜質(zhì)M與雜質(zhì)N和為0.1%，雜質(zhì)Q為0.1%，雜質(zhì)S為0.04%，各雜質(zhì)峰面積和為0.5%，均低于規(guī)定限度。

3.7 頭孢羥氨芐

本次抽驗抽取頭孢羥氨芐片僅1批，僅檢出α-對羥基苯甘氨酸，含量為0.04%，其他雜質(zhì)均未檢出。

4 討論

4.1 樣品的有關(guān)物質(zhì)總體質(zhì)量

按規(guī)定質(zhì)量標準檢驗結(jié)果顯示，本次我省頭孢菌素類抗生素口服固體制劑的專項監(jiān)督抽驗樣品有關(guān)物質(zhì)情況良好。

4.2 質(zhì)量標準探討

由于β-內(nèi)酰胺抗生素的不穩(wěn)定性及其生產(chǎn)工藝特點，使其有關(guān)物質(zhì)的含量相對較高，種類也較多，這也是β-內(nèi)酰胺抗生素產(chǎn)生速發(fā)型過敏或其他嚴重不良反應(yīng)的主要來源，所以有關(guān)物質(zhì)研究是其質(zhì)量控制的重點也是難點[14]。本次抽樣有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果顯示各品種檢出雜質(zhì)數(shù)目較少，且大部分雜質(zhì)的含量均遠低于標準規(guī)定限值，說明各生產(chǎn)廠家的生產(chǎn)工藝能很好地控制質(zhì)量標準下規(guī)定的有關(guān)物質(zhì)，對產(chǎn)品質(zhì)量起到了一定的控制作用。但各品種的現(xiàn)行標準中有關(guān)物質(zhì)項尚不完善，主要體現(xiàn)在以下幾個方面。

圖1 頭孢克肟片、膠囊、分散片的有關(guān)物質(zhì)含量圖

圖2 頭孢克肟咀嚼片的有關(guān)物質(zhì)含量圖

圖3 頭孢呋辛酯類制劑的有關(guān)物質(zhì)含量圖

圖4 頭孢泊肟酯片的有關(guān)物質(zhì)含量圖

4.2.1 色譜條件

流動相緩沖液鹽濃度高(0.2mol/L)，在做大批量樣品的評價性檢驗工作時，易造成鹽的析出，堵塞色譜系統(tǒng)，造成色譜柱柱壓明顯升高[15]。

4.2.2 雜質(zhì)限度

國外藥典已增加對已知雜質(zhì)的控制，且在限度控制方面較中國藥典更為嚴格。如BP2019中頭孢拉定[16]有關(guān)物質(zhì)項下，除控制單雜、總雜外，對特定雜質(zhì)A、B、C、D、E、F、G均單獨控制，而中國藥典2015年版二部中頭孢拉定[17]有關(guān)物質(zhì)項僅對雙氫苯甘氨酸、7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸單雜和總雜進行控制，且各限值均比EP規(guī)定限值低。對原料中有關(guān)物質(zhì)的嚴格控制是影響制劑中雜質(zhì)水平的首要因素，從產(chǎn)品安全性方面考慮，建議中國藥典對頭孢拉定及其制劑中的有關(guān)物質(zhì)限度進行完善和提高，收錄英國藥典中雜質(zhì)A～雜質(zhì)F的結(jié)構(gòu)，結(jié)合該品種歷年國家藥品評價性抽驗的探索性研究結(jié)果，增加對特定雜質(zhì)的定量控制。

4.2.3 質(zhì)量標準的統(tǒng)一

個別產(chǎn)品未收載于藥典，同一品種不同劑型的產(chǎn)品質(zhì)量標準不統(tǒng)一，如頭孢克肟分散片、膠囊劑、片劑均收載于中國藥典，而頭孢克肟咀嚼片執(zhí)行國家食品藥品監(jiān)督管理局局頒標準。兩個標準中有關(guān)物質(zhì)的色譜條件存在差異，限度規(guī)定也不同，一定程度上增加了對該品種有關(guān)物質(zhì)質(zhì)量進行評價和比較的難度，不利于該品種質(zhì)量水平的提高。

為更客觀地反映各品種有關(guān)物質(zhì)的質(zhì)量情況，并與其不良反應(yīng)建立關(guān)聯(lián)，保證用藥安全，建議統(tǒng)一各劑型的質(zhì)量標準，改進標準中有關(guān)物質(zhì)的色譜系統(tǒng)，結(jié)合我國每年的藥品評價性抽驗相關(guān)研究內(nèi)容，對各品種確定的已知雜質(zhì)進一步研究并按需要寫入標準進行控制，持續(xù)提高質(zhì)量標準。