全自動生化分析儀試劑針攜帶污染對脂肪酶測定的影響

周麗敏，陳毅聰

(增城市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東增城511300)

全自動生化分析儀試劑針攜帶污染對脂肪酶測定的影響

周麗敏，陳毅聰

(增城市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東增城511300)

全自動生化分析儀；脂肪酶；試劑針；交叉污染；清洗

目前，全自動生化分析儀已廣泛應(yīng)用于臨床各大、中、小型實(shí)驗(yàn)室，全自動生化分析儀具有快速、高效、準(zhǔn)確、重復(fù)性好及多項(xiàng)目，多樣品處理能力等優(yōu)點(diǎn)。但由于生化分析儀在分析過程中必須共用吸樣針、試劑針、攪拌棒以及比色杯，使得交叉污染問題也隨之產(chǎn)生。交叉污染分為吸樣針、攪拌棒、樣品杯及試劑間(試劑針)的交叉污染，其中試劑間的交叉污染常不易發(fā)現(xiàn)，具有偶然性,對檢測結(jié)果影響最為嚴(yán)重。本實(shí)驗(yàn)室在實(shí)際工作中發(fā)現(xiàn)脂肪酶這一生化項(xiàng)目存在不穩(wěn)定性，個(gè)別標(biāo)本會偏離，但復(fù)查后又正常，懷疑存在試劑針交叉污染問題，下面針對脂肪酶這一項(xiàng)目做一試劑間交叉污染試驗(yàn)[1]。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本取正常人新鮮混合血清100ml。

1.2 材料LPS采用北京利得曼試劑，方法為酶顯色法，常規(guī)生化項(xiàng)目所用試劑為廈門英科新創(chuàng)試劑，校準(zhǔn)品為試劑配套校準(zhǔn)品；生化儀為日立7180全自動生化分析儀。

1.3 方法實(shí)驗(yàn)前應(yīng)確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境符合相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作條件，并嚴(yán)格按照儀器生產(chǎn)廠家的操作規(guī)程作儀器校準(zhǔn)、維護(hù)及操作，以確保儀器始終處于正常狀態(tài)及檢測的準(zhǔn)確性。試劑確保在有效期內(nèi)并用配套校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)。

1.3.1 取適量混合血清，在日立7180生化分析儀上用新鮮混合血清連續(xù)測定脂肪酶(LPS)10次結(jié)果，結(jié)果在50～52U/L，測量結(jié)果的均值為51.1U/L，變異系數(shù)為1.1%，重復(fù)性試驗(yàn)?zāi)軌驖M足臨床需要。

1.3.2 取適量新鮮混合血清，在日立7180生化分析儀上，先測定一個(gè)常規(guī)生化項(xiàng)目(污染項(xiàng)目)，再測定LPS(受污染項(xiàng)目)，本實(shí)驗(yàn)室34個(gè)常規(guī)生化項(xiàng)目與LPS逐一配對測試。

1.4 結(jié)果判斷當(dāng)脂肪酶測定結(jié)果小于平均值95%或大于平均值105%,則強(qiáng)烈支持上一測試項(xiàng)目對LPS存在交叉污染[2]。

2 結(jié)果

2.1 初步判斷對LPS存在試劑針污染的項(xiàng)目分別為尿酸、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇五個(gè)項(xiàng)目，如表1。

表1 測定一個(gè)常規(guī)生化項(xiàng)目后再測定LPS結(jié)果比較

2.2 將疑似對LPS污染項(xiàng)目確定，根據(jù)表2，將尿酸、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇五個(gè)項(xiàng)目與LPS配對測定，如測定尿酸后，再連續(xù)測定LPS3次，結(jié)果如表2，對LPS引起污染的項(xiàng)目為總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇，而尿酸項(xiàng)目則可能是其他一些隨機(jī)誤差引起表2的不準(zhǔn)確度。

2.3 清洗效果

2.3.1 確定污染項(xiàng)目后，在生化儀上進(jìn)行特殊清洗功能設(shè)置，首先用水清洗，測定次數(shù)3次，效果如表3，血脂項(xiàng)目對LPS存在的污染用水清洗沒法消除。

2.3.2 在生化儀特殊清洗系統(tǒng)中設(shè)置用堿性清洗液清洗后，測定3次結(jié)果如表4，血脂項(xiàng)目總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇對LPS存在的污染用堿性清洗液清洗基本可以消除。

表2 測定疑似污染項(xiàng)目后再測定LPS三次結(jié)果比較

表3 用水清洗后結(jié)果比較

表4 堿性清洗液清洗后結(jié)果比較

3 討論

血清脂肪酶測定是臨床生化檢驗(yàn)中最常見的項(xiàng)目之一，可用于急、慢性胰腺炎、總膽管結(jié)石等多種疾病的輔助診斷，但在日常生化檢驗(yàn)工作中，發(fā)現(xiàn)LPS項(xiàng)目的檢測存在不穩(wěn)定性，一些標(biāo)本會出現(xiàn)異常增高，與病人的臨床癥狀不符，將標(biāo)本復(fù)查后又變成正常范圍，檢查儀器、試劑、校準(zhǔn)品、室內(nèi)質(zhì)控品等并未發(fā)現(xiàn)異常，懷疑存在試劑間的交叉污染[3]。通過上面實(shí)驗(yàn)證明血脂項(xiàng)目總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇這四個(gè)項(xiàng)目(簡稱血脂四項(xiàng))對LPS存在試劑間的交叉污染。查看血脂四項(xiàng)的試劑成份，均含有脂蛋白脂肪酶成分，其中甘油三酯試劑中所含脂蛋白脂肪酶成分最高，因此污染LPS最為嚴(yán)正重。在針對血脂項(xiàng)目對LPS存在試劑間的交叉污染而設(shè)置的特殊清洗實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)用堿性清洗液清洗，可消除上述的交叉污染問題。另外據(jù)報(bào)導(dǎo),脂肪酶項(xiàng)目的試劑配方中含有鈣離子作為激活劑,因此含有鈣離子絡(luò)合劑的試劑對它會發(fā)生負(fù)干擾，本實(shí)驗(yàn)室生化試劑中含鈣離子絡(luò)合劑的試劑并不多，這種負(fù)干擾的發(fā)生幾率較少，因此并未進(jìn)行這一實(shí)驗(yàn)。

在全自動生化分析儀應(yīng)用過程中，由于生化試劑的組分和含量問題,各項(xiàng)目間常常會出現(xiàn)明顯的正干擾或負(fù)干擾，這些造成干擾的原因主要來自于試劑的交叉污染，試劑間的交叉污染通常來自于生化儀的試劑針及攪拌棒的攜帶污染，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)項(xiàng)目試劑中含有乳酸脫氫酶，對乳酸脫氫酶項(xiàng)目存在正干擾，乳酸脫氫酶、肌酸激酶項(xiàng)目試劑中含有鎂，對鎂項(xiàng)目測定存在干擾等等，要求檢驗(yàn)人員對儀器工作流程、試劑組成、測定原理了如指掌,對試劑交叉污染的各種可能性加以考慮，合理設(shè)計(jì)程序。合理安排檢測項(xiàng)目的順序，在有交叉污染的檢測項(xiàng)目中間插入特殊清洗系統(tǒng)，最好是將被干擾項(xiàng)目置于干擾項(xiàng)目之前,或者干擾項(xiàng)目與被干擾項(xiàng)目間隔5個(gè)以上無干擾項(xiàng)目，以消除干擾發(fā)生的可能[4]。

[1]楊兆武,明德松.邁瑞全自動生化分析儀血糖試劑交叉污染及排除[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2012,30(1):98-99.

[2]于嘉屏.全自動生化分析儀及其試劑間化學(xué)污染對檢測結(jié)果的影響．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志[J].2007,30(11):1301-1302.

[3]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:431-434.

[4]汪仙德,程金蓮.EDTA-K2對血糖、血脂和腎功能檢測的影響[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,31(1):82-83.

R446.11+2

B

1674-1129(2013)03-0288-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.03.039