731例胎兒和新生兒溶血病預(yù)防性檢測(cè)結(jié)果分析

馬 玲

(河北省承德市中心血站， 河北 承德 067000)

近五年來，胎兒和新生兒溶血病(Hemolytic Disease of the fetus and the newborn,HDFN)患病數(shù)量呈上升趨勢(shì)，預(yù)防性產(chǎn)前新生兒溶血病檢測(cè)抗體及效價(jià)發(fā)現(xiàn)存在新生兒溶血病風(fēng)險(xiǎn)并能夠?qū)⑻汉托律鷥喝苎〉奈：档阶畹?。新生兒溶血病發(fā)生機(jī)制是胎兒微量紅細(xì)胞進(jìn)入母體血液循環(huán)后，由于與母血血型存在差異，發(fā)生溶血現(xiàn)象。胎兒的血型基因來自于父親母親，母親缺少父親所攜帶的基因，母體的抗體由于胎兒紅細(xì)胞膜上父親基因編碼的抗原刺激產(chǎn)生，此抗體為IgG類免疫性抗體，能夠通過胎盤進(jìn)入胎兒血循環(huán)，并且與胎兒紅細(xì)胞相結(jié)合并破壞紅細(xì)胞而發(fā)生溶血現(xiàn)象。本文選取血站需要進(jìn)行新生兒溶血病檢測(cè)的血液標(biāo)本，共計(jì)731例，按照血型、孕婦抗體效價(jià)、新生兒發(fā)病率進(jìn)行相關(guān)分析，以期發(fā)現(xiàn)HDFN的發(fā)病相關(guān)危險(xiǎn)因素。

1 資料與方法

1.1一般資料:收集2015年至2019年期間送往本血站需要進(jìn)行新生兒溶血病檢測(cè)的血液樣本731例，孕婦年齡23～42歲，孕周16～32周。納入標(biāo)準(zhǔn)：孕婦為A型B型O型AB型或RhD陰性血液樣本；所有受檢孕婦均知情同意，及新生兒懷疑溶血病標(biāo)本進(jìn)行血型血清學(xué)檢查,血樣均為3mL EDTA抗凝管采集。

1.2方法:采用試管法進(jìn)行ABO和RhD血型鑒定，CcEe抗原檢測(cè)，2-疏基乙醇(2-ME)處理待檢血清，7支試管分別標(biāo)記1∶4；1∶8；1∶16；1∶32；1∶64；1∶128；1∶256，用生理鹽水進(jìn)行倍比稀釋，加入處理后血清與丈夫相應(yīng)血型紅細(xì)胞，應(yīng)用間接抗人球蛋白法測(cè)定血清lgG抗-A和(或)抗-B效價(jià)及不規(guī)則抗體的檢測(cè)，對(duì)抗體篩查陽性者進(jìn)行抗體效價(jià)的檢測(cè)及抗體特異性鑒定。應(yīng)用微柱凝膠卡法進(jìn)行新生兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)，包括直接抗人球蛋白試驗(yàn)、抗體釋放試驗(yàn)和游離抗體試驗(yàn)。

1.3評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn):ABO血型系統(tǒng)IgG抗-A和(或)抗-B效價(jià)值≥64時(shí)或RH血型系統(tǒng)抗D,抗E,抗Ce等抗體效價(jià)值≥32時(shí)提示具有患病風(fēng)險(xiǎn)。孕期檢查共分為三次，第一次檢測(cè)在16-20周，第二次在28周左右，第三次在32周左右,三次中有一次抗體效價(jià)值超過臨界值，此標(biāo)本記為一個(gè)存在風(fēng)險(xiǎn)性標(biāo)本。新生兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)：游離試驗(yàn)(陽性懷疑患病)，直接抗人球蛋白試驗(yàn)、放散試驗(yàn)(其中放散試驗(yàn)一項(xiàng)或兩項(xiàng)陽性為患病),三項(xiàng)陽性為患病。

1.4統(tǒng)計(jì)分析:采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行計(jì)算分析，計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1孕婦HDFN檢測(cè)出存在風(fēng)險(xiǎn)的血型分布:ABO血型系統(tǒng)及Rh血型系統(tǒng)存在風(fēng)險(xiǎn)樣本進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，ABO血型系統(tǒng)檢測(cè)出存在風(fēng)險(xiǎn)樣本83例，ABO-HDFN(+)檢出率為11.36%，Rh血型系統(tǒng)檢測(cè)出存在風(fēng)險(xiǎn)樣本15例，Rh-HDFN(+)檢出率為2.06%，χ2=4.27，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在731例樣本中，孕婦新生兒溶血病檢測(cè)存在風(fēng)險(xiǎn)樣本的血型分布不同，ABO-HDFN(+)檢出率高于Rh-HDFN(+)檢出率,孕婦O型檢測(cè)數(shù)和檢出率均最高。見表1。

表1 731例樣本中孕婦HDFN檢測(cè)存在風(fēng)險(xiǎn)的血型分布n(%)

2.298例高風(fēng)險(xiǎn)HDFN孕婦抗體分布情況:98例高風(fēng)險(xiǎn)HDFN孕婦中，74例新生兒溶血病，達(dá)75.51%(74/98)，且抗體滴度越高，發(fā)生HDFN病風(fēng)險(xiǎn)越高，在抗體效價(jià)≥1:128時(shí)，HDFN患病率最高，與其他不同效價(jià)抗體滴度比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。見表2。

2.398例高風(fēng)險(xiǎn)HDFN孕婦胎兒出生時(shí)間分布情況:98例存在新生兒溶血病風(fēng)險(xiǎn)的孕婦中，新生兒出生時(shí)間越早，發(fā)生HDFN風(fēng)險(xiǎn)越高，與出生4～10d比較,第0～3天所生新生兒HDFN發(fā)生率顯著升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。見表3。

表2 HDFN孕婦抗體分布情況n(%)

表3 HDFN新生兒出生時(shí)間分布情況n(%)

3 討 論

通過檢測(cè)孕婦體內(nèi)是否存在相應(yīng)的lgG類導(dǎo)致胎兒溶血的抗體及效價(jià),預(yù)測(cè)母親與胎兒之間是否可能存在血型不合，導(dǎo)致新生兒溶血病[1]。本文研究發(fā)現(xiàn)，進(jìn)行孕婦新生兒溶血病檢測(cè)的血液樣本731例中，ABO-HDFN(+)顯著高于Rh-HDFN(+)檢出率，ABO血型系統(tǒng)的新生兒溶血病主要發(fā)生在第一胎，Rh血型系統(tǒng)的新生兒溶血病主要發(fā)生在第二胎，但Rh血型系統(tǒng)患病比ABO血型系統(tǒng)患病嚴(yán)重，孕婦O型檢測(cè)數(shù)和檢出率均最高，胎兒為A型或者B型造成新生兒溶血病的可能性更大，是由于A、B型的胎兒在母親血型抗體免疫刺激下產(chǎn)生更多的IgG抗體，胎兒紅細(xì)胞上的B位點(diǎn)抗原決定簇較A位點(diǎn)少，同時(shí)B型的IgG抗體結(jié)合力也弱于A型[2]。

溶血程度與效價(jià)值呈正相關(guān)，使之產(chǎn)生不同程度的溶血，可引起胎兒貧血、水腫、流產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)。本文中檢測(cè)出孕婦存在風(fēng)險(xiǎn)樣本98例，跟蹤檢測(cè)所生新生兒患病數(shù)74例，患病率為75.51%，抗體效價(jià)≥1:128患病率最高，患病率有隨抗體效價(jià)值增加而增高的趨勢(shì)，孕婦在懷孕前就有可能多種原因已產(chǎn)生高效價(jià)的LgG類ABO抗體[3]。女性由于妊娠、流產(chǎn)或輸血等免疫刺激下產(chǎn)生抗體，胎兒體液免疫不成熟，體內(nèi)抗體幾乎全部來自母體的血液循環(huán)，紅細(xì)胞上有相應(yīng)的抗原，則導(dǎo)致新生兒溶血病的發(fā)生。隨著妊娠次數(shù)的增加，患新生兒溶血病的機(jī)會(huì)也會(huì)隨著增加，并且更加嚴(yán)重[4]。早發(fā)現(xiàn)早治療，為臨床提供有價(jià)值的診斷和防治的依據(jù)。

新生兒采樣時(shí)間越早陽性檢出率越高，0～3d陽性率88.71%高于4～10d陽性率52.78%，這一結(jié)果與遲媛媛等[5]的文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致，因此臨床懷疑新生兒溶血應(yīng)盡早采集標(biāo)本。因?yàn)榘l(fā)病時(shí)間越長(zhǎng)，會(huì)中和大部分的IgG血型抗體，結(jié)合成抗原抗體復(fù)合物并且失去了反應(yīng)原性，同時(shí)機(jī)體識(shí)別并溶解破壞大部分的致敏紅細(xì)胞，陽性檢出率也就下降。出生3d內(nèi)采集標(biāo)本，更能準(zhǔn)確的檢測(cè)出新生兒溶血病，這對(duì)降低新生兒的病死率以及提高治愈率具有非常重要的意義[6]。

病情取決于孕婦產(chǎn)生抗體的多少、抗體與紅細(xì)胞結(jié)合并破壞的強(qiáng)弱、胎兒造血和免疫功能等諸多狀況。孕婦產(chǎn)前抗體檢測(cè)和抗體效價(jià)監(jiān)測(cè)，產(chǎn)后新生兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)和高膽紅素測(cè)定，能夠有效確診新生兒溶血病。孕婦對(duì)于新生兒溶血病進(jìn)行早期篩查應(yīng)引起重視，通過產(chǎn)前抗體及效價(jià)檢測(cè)，早發(fā)現(xiàn)并及時(shí)與孕前、孕中及產(chǎn)后采取相應(yīng)處理，降低造成新生兒溶血病的風(fēng)險(xiǎn)，減少對(duì)新生兒的損害。尤其再次妊娠(包括流產(chǎn))或者輸過血的女性，免疫刺激下產(chǎn)生抗體，孕前及孕中都有必要做新生兒溶血病預(yù)防性檢測(cè)。出生后懷疑為新生兒溶血病的患兒，要盡早采集3d內(nèi)標(biāo)本進(jìn)行新生兒溶血病確診檢測(cè)，為提高治愈率爭(zhēng)取寶貴時(shí)間。