恩替卡韋分散片的制備及質(zhì)量控制

謝明珠

摘? 要：目的：本文只要探究恩替卡韋分散片的制備工藝和成分質(zhì)量控制。方法：恩替卡韋分散片制備的成分為交聯(lián)聚維酮、乳糖、微晶纖維素、聚維酮共同組成。利用HPLC色譜法檢驗(yàn)恩替卡韋分散片的主要成分含量，以此鑒定藥片含量的質(zhì)量。使用梯度洗脫法鑒定B、C、D、E四種已知處方雜質(zhì)的構(gòu)成。除了上述雜質(zhì)外，還存在其他雜質(zhì)的成分，鑒定這些雜質(zhì)采用手性色譜柱完成對(duì)映異構(gòu)體的有效分離。結(jié)果：通過(guò)對(duì)恩替卡韋分散片質(zhì)量控制，明確了藥物的主要組成成分，對(duì)于4中雜質(zhì)進(jìn)行對(duì)映異構(gòu)體的分離。結(jié)論：在本實(shí)驗(yàn)中制備的散片處方符合藥理的基準(zhǔn)，制備工藝操作簡(jiǎn)便，通過(guò)梯度洗脫法能夠?qū)ι⑵嬖诘碾s質(zhì)高效分離，有效控制散片雜質(zhì)純度降低。

關(guān)鍵詞：恩替卡韋分散片;制備;質(zhì)量控制

在藥典記敘中表明恩替卡韋分散片是治療慢性乙肝的藥物，其組成結(jié)構(gòu)為脫氧鳥嘌呤核苷類似物，能有效抑制病毒的增長(zhǎng)，具備良好的藥效特征，在治療慢性乙肝的前景上具備臨床應(yīng)用的效果。恩替卡韋分散片主要由美國(guó)藥物研究機(jī)構(gòu)進(jìn)行生產(chǎn)，具備較低的抗耐性，但是我國(guó)對(duì)于美國(guó)生產(chǎn)的恩替卡韋分散片，其含量成分沒(méi)進(jìn)行過(guò)綜合的檢定，因此藥物成分包含諸多的雜質(zhì)，影響藥物含量的純度。采用梯度洗脫法，分離對(duì)映異構(gòu)體，對(duì)散片的質(zhì)量進(jìn)行合理的控制，有效解決雜質(zhì)分離的問(wèn)題，保證藥物臨床安全使用性能。

1 儀器和試藥

儀器：260型高效液相色譜儀、GHL150型高速混合制粒機(jī)、ZP15旋轉(zhuǎn)壓片機(jī)和SYH100型三維運(yùn)動(dòng)混合機(jī)。

試藥：雜質(zhì)A對(duì)照品、雜質(zhì)B對(duì)照品、雜質(zhì)C對(duì)照品、雜質(zhì)D對(duì)照品和雜質(zhì)E對(duì)照品。

阿司帕坦、恩替卡韋原藥、恩替卡韋分散片、聚維酮K30、桃味香精。水使用的是娃哈哈純凈水，三乙胺、三氟乙酸、無(wú)水乙醇、正乙烷和乙腈都是色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 恩替卡韋分散片的制備

2.1.1 輔料的相容性

將硬脂酸鎂、乳糖、PVPK30、PVPP、MCC101、桃味香精、阿司帕坦和恩替卡韋按照1：100：70：10：1：1：0.5來(lái)進(jìn)行混合，并且將其分別的放置在高溫、高濕下，經(jīng)過(guò)10h的考察之后就能夠發(fā)現(xiàn)，各種輔料都是在4min之前就出峰，而且不會(huì)受到任何因素的影響，輔料呈現(xiàn)穩(wěn)定性，對(duì)于恩替卡韋是沒(méi)有任何的干擾的。

2.1.2 處方工藝

取0.5g恩替卡韋原藥，過(guò)80目篩，之后加入PVPP10g、MCC75g、乳糖100g，將其混勻，之后向里面加入粘合劑溶液，過(guò)24目篩制粒，在45℃左右進(jìn)行干燥，之后過(guò)24目篩整粒。向里面加入香精和硬脂酸鎂，進(jìn)行混勻處理，之后在80N壓力下來(lái)進(jìn)行恩替卡韋分散片的制定，一共有1000片，而且每一片藥物會(huì)含0.5mg的恩替卡韋。

2.2 含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件和系統(tǒng)適用性

根據(jù)2010版的中國(guó)藥典規(guī)定進(jìn)行測(cè)定。色譜柱是WelchUltimateC18柱，流速是1.0ml·min-1，柱溫是30℃，流動(dòng)相是乙腈-水-三氟乙酸（50∶950∶0.5），檢測(cè)波長(zhǎng)是254nm，進(jìn)樣量為100μL。拖尾因子按恩替卡韋峰計(jì)為0.8～1.5，理論板數(shù)按恩替卡韋峰計(jì)應(yīng)≥30000。

（1）供試品溶液Ⅰ

取本品20片，研細(xì)，取適量粉末（相當(dāng)于恩替卡韋0.5mg）置50mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲15min，冷至室溫后定容，過(guò)濾，取續(xù)濾液即得。

（2）對(duì)照品溶液

精密稱取恩替卡韋對(duì)照品20mg置100mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，同上操作。移取2.5mL置50mL量瓶中，加流動(dòng)相定容，得10μg·mL-1的對(duì)照品溶液。

2.2.2 有關(guān)物質(zhì)測(cè)定

色譜條件篩選：關(guān)于恩替卡韋有關(guān)物質(zhì)分析方法，文獻(xiàn)及上市品標(biāo)準(zhǔn)中均采用梯度洗脫方法，但又不盡相同，本研究將從以下幾方面確定有關(guān)物質(zhì)的分析方法。

色譜柱的選擇：分別選用不同廠家不同型號(hào)的色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），以施貴寶進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)條件為例，以塔板數(shù)、對(duì)稱因子及分離度。系統(tǒng)適用性要求恩替卡韋峰對(duì)稱因子介于0.8～1.2，塔板數(shù)不低于30000，對(duì)比以上結(jié)果，選用WelchXBC18柱。

梯度條件的選擇：為驗(yàn)證進(jìn)口原料藥標(biāo)準(zhǔn)，施貴寶進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)、正大天晴標(biāo)準(zhǔn)中梯度條件（見(jiàn)表1）對(duì)測(cè)定的影響，分別采用各條件下的流動(dòng)相A為溶劑，將恩替卡韋原藥配成50μg·mL-1的供試品溶液Ⅱ，進(jìn)樣測(cè)定。色譜圖見(jiàn)圖1：

從表1可以觀察出，進(jìn)口原料藥、施貴寶、正大天晴的流動(dòng)相組成和梯度程序。根據(jù)圖1有關(guān)物質(zhì)摸索的HPLC色譜圖，觀察出進(jìn)口原料藥在標(biāo)準(zhǔn)條件下，在梯度脫洗過(guò)程中，在15分鐘處有一個(gè)明顯的尖峰，對(duì)于雜質(zhì)的分離難度較大，而正大天晴分離雜質(zhì)出峰時(shí)間適中，在5分鐘處就開(kāi)始分離雜質(zhì)，但是分離梯度脫洗的時(shí)間較長(zhǎng)，和進(jìn)口原料藥相比，分離基線較為穩(wěn)定，只在20分鐘后基線出現(xiàn)輕微波動(dòng)。施貴寶的出峰時(shí)間在15分鐘-20分鐘，出峰的時(shí)間照比進(jìn)口原料藥和正大天晴時(shí)間延長(zhǎng)，但后期的基線同兩者比穩(wěn)定。

在表1 條件梯度列表中，施貴寶和正大天晴，流動(dòng)相的測(cè)定使用三氟乙酸，三氟乙酸作為離子分離試劑，其主要作用是改善峰型，調(diào)節(jié)離子保留時(shí)間的功能。參照施貴寶流動(dòng)相的加入成分，在溶液中加入0.1%的三氟乙酸溶劑，則對(duì)照品雜質(zhì)E的主峰分離度小于1.5，不能達(dá)到分離的標(biāo)準(zhǔn)。而參照正大天晴流動(dòng)相進(jìn)行雜質(zhì)分離，填入三氟乙酸的比例為0.05%，對(duì)照品雜質(zhì)E的主峰分離度大于1.5，分離雜質(zhì)的純度符合分離的標(biāo)準(zhǔn)。

恩替卡韋分散片在酸堿性條件下可溶解，也可在水溶液條件下溶解，本實(shí)驗(yàn)分別觀察0.01mol·L-1的鹽酸溶液和流動(dòng)相A溶劑，A溶劑由乙腈水于三氟乙酸的混合溶劑，觀察溶劑對(duì)主峰的影響。通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，流動(dòng)相溶劑A和鹽酸溶都能將藥劑的主要成分提取出來(lái)，提取的含量分別為（98.8±0.10）%和（99.0±0.12）%，提取的溶液均為混合懸濁液體，通過(guò)濾網(wǎng)過(guò)濾，得到澄清溶液，但在鹽酸為溶劑的情況下，在4分鐘和6分鐘處，出現(xiàn)兩個(gè)溶劑干擾峰波，所以對(duì)于上述三種藥物雜質(zhì)的分離，最好選取流動(dòng)相溶劑A。

3 穩(wěn)定性試驗(yàn)

在對(duì)3批包裝樣品進(jìn)行加速試驗(yàn)，溫度和濕度控制在（25±2）℃和（60±10）%，藥品存放12個(gè)月，分貝在3、6、9、12月進(jìn)行藥品穩(wěn)定性取樣，檢查藥品的含量和有關(guān)物質(zhì)對(duì)映異構(gòu)體變化，結(jié)果如表2所示。

4 討論

總的來(lái)說(shuō)，由于樣品的規(guī)格較小，在藥劑的制備上，首先考慮雜質(zhì)混合均勻的問(wèn)題，恩替卡韋分散片根據(jù)說(shuō)明可在水中溶解，將藥物粉末進(jìn)行粉碎，在60～70℃溶解度由2.4mg·mL-1提高至2.8mg·mL-1。在梯度脫洗試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)雜質(zhì)分離存在難度，應(yīng)加原藥進(jìn)行過(guò)篩再混合，實(shí)驗(yàn)通過(guò)延長(zhǎng)混合時(shí)間提升藥劑含量均勻性。

參考文獻(xiàn)

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