氣相色譜法測定樟木中樟腦的含量△

劉娜郝美玲（.呼和浩特市食品藥品檢驗所呼和浩特00020；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)藥品檢驗研究院呼和浩特00020）

樟木為樟科植物樟的木材。［原植物］樟Cinnamomum camphora（L.）Presl［Laurus camphora L.］又名烏樟（陶弘景）、香樟（南方各省份通稱）、小葉樟（湖南）、傜人柴（廣西）。常綠大喬木，高可達30 m。樹皮灰黃褐色，縱裂。枝、葉及木材均有樟腦氣味。蒙醫(yī)傳統(tǒng)以其木材入藥。目前該藥材的樟腦含量標準尚未建立，因此，采用氣相色譜法對樟木的成分樟腦含量進行測定，為建立樟木的質(zhì)量標準奠定基礎。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：島津GC-2014C氣相色譜儀（日本）；柱子：聚乙二醇20000（PEC-20M）為固定相、涂布濃度為10%的毛細管柱。AL204型、MSE3.6P-CE型電子天平，揮發(fā)油測定器。

1.2 試劑試藥：樟腦對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110747-201008），乙酸乙酯為分析純。樟木[（四川成都荷花池，批號：150501、150502、150503、150504）；越南（150901、150906、150914）]。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件的選擇：進樣口溫度：190℃；載氣（氮氣）流量：1 mL/min；分流比為 20∶1；檢測器溫度：220 ℃；柱溫：起始溫度 80 ℃，停留9 min，升溫速率40℃/min，最終溫度180℃，停留3 min；理論板數(shù)：按樟腦峰計算應不低于2 000。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備：精密稱取樟腦對照品3.028 mg，置10 mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備：精密稱取樟木（已粉碎過二號篩）31.2501 g，照揮發(fā)油測定法（《中國藥典》2015年版四部通則2204）測定。揮發(fā)油過無水硫酸鈉置5 mL量瓶中（揮發(fā)油為0.2 mL以下時溶解到2 mL量瓶中），再用乙酸乙酯洗滌并定容至刻度，即得。

2.2.3 陰性溶液的制備：取乙酸乙酯分析純。

2.3 專屬性考察：分別精密吸取上述樟腦對照品溶液、供試品溶液、空白溶劑各1 μL注入氣相色譜儀測定（色譜圖見圖1、圖2、圖3），結(jié)果顯示，相同的保留時間處，供試品溶液與對照品溶液具有相同的色譜峰，而陰性溶液此處無色譜峰出現(xiàn)，表明陰性對照品無干擾，專屬性良好。

2.4 線性關(guān)系考察：精密吸取3.625 mg樟腦置25 mL的量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，作為對照品溶液。精密吸取對照品溶液 0.2、0.5、1、1.5、2.0、2.5、3、4.0、5.0 μL 注入氣相色譜儀，記錄峰面積，與進樣量做線性回歸。以濃度為橫坐標X，峰面積為縱坐標Y，建立標準曲線方程。線性回歸方程為y=536598x－810.81（r=0.9994），結(jié)果表明樟腦在0.029～0.725 mg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗：分別精密吸取“2.2.2”項下的供試品溶液1 μL，注入氣相色譜儀測定峰面積，測得的平均面積值為96708.3，RSD=1.77%，結(jié)果顯示精密度試驗良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗：精密吸取同一供試品溶液，分別在放置0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h、14 h 進樣 1 μL 記錄峰面積，RSD=0.75%。結(jié)果顯示，該成分在供試品溶液中24 h穩(wěn)定。

2.7 重復性試驗：取同一批樣品按供試品溶液制備方法制備6份樣品溶液，進樣1 μL測定峰面積，計算含量。結(jié)果顯示，該供試品中樟腦平均含量為0.0276%，RSD為0.32%，表明重復性良好。

2.8 回收率試驗：取同一批已知含量的樣品6份，每份取16 g，精密稱定，分別精密加入樟腦對照品適量，按供試品溶液制備方法制備樣品溶液，分別注入氣相色譜儀測定含量。結(jié)果顯示平均加樣回收率98.48%，RSD為0.82%，表明準確度良好。見表1。

表1 回收率試驗結(jié)果

3 樣品含量測定

取7個批次的樟木按“2.2.2供試品溶液的制備”方法制備溶液，按“2.1”項下方法測定，記錄色譜圖，計算樟腦的含量，結(jié)果見表2。

4 討論

4.1 前處理條件的考察：在提取溶劑的選擇上主要考慮了乙酸乙酯和環(huán)己烷，提取方法首先用了超聲提取，提取溶液經(jīng)過濃縮，進入氣相色譜儀測定，有效成分含量很低?？紤]到本實驗的所測成分主要存在于揮發(fā)油中，在濃縮環(huán)節(jié)會損失揮發(fā)油，后改為用揮發(fā)油測定器提取，乙酸乙酯的極性大于環(huán)己烷且微溶于水，所以采用環(huán)己烷作為提取溶劑。

4.2 色譜條件的考察：本實驗在其他色譜條件不變的情況下，分別改變進樣口溫度（190℃改為200℃）、柱溫（初始溫度80℃改為100 ℃）、分流比（20∶1改為 25∶1），測得RSD 為 1.24%。由此可見小的色譜因素變化對含量測定影響較小，方法可行有效。

4.3 樣品性狀的考察：通過對7個樣品的含量測定結(jié)果和性狀對比分析發(fā)現(xiàn)，藥材粗壯、生長年限較長的含量較高。

表2 樣品含量測定結(jié)果