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    佛山地區(qū)3193例高齡孕婦胎兒染色體核型分析

    2020-10-22 08:59:10廣東省佛山市第一人民醫(yī)院528000禤潔甜伍啟康
    首都食品與醫(yī)藥 2020年8期
    關(guān)鍵詞:整倍體易位攜帶者

    廣東省佛山市第一人民醫(yī)院(528000)禤潔甜 伍啟康

    隨著社會上晚婚晚育的趨勢日趨明顯以及近年二胎政策的全面開放,年齡大于35歲的孕婦比例明顯增加,年齡因素對卵子的染色體有著明顯的負面影響,為了減少一些染色體異常的嬰兒出生,2010年我國衛(wèi)生部推出的《胎兒染色體異常的細胞遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷技術(shù)標準》中明確要求預(yù)產(chǎn)期年齡大于或等于35歲的孕婦應(yīng)進入產(chǎn)前診斷[1]。本文將來我院進行產(chǎn)前染色體核型分析的3193例高齡孕婦資料進行整理分析,了解高齡孕婦胎兒染色體異常的發(fā)生情況,為臨床遺傳咨詢提供參考數(shù)據(jù),現(xiàn)將統(tǒng)計數(shù)據(jù)報道如下。

    1 資料與方法

    1.1 資料 2006年1月~2018年10月到廣東省佛山市第一人民醫(yī)院細胞遺傳室進行胎兒染色體檢查者,共3193人。進入產(chǎn)前診斷的原因首先是預(yù)產(chǎn)期年齡大于35歲,有個別孕婦合并有B超異常、唐篩高風(fēng)險、夫婦有一方染色體異常、無創(chuàng)DNA檢測提示異常、不良生育史、羊水過多過少等。

    1.2 方法 孕婦在知情同意并簽署知情同意書后,行羊膜腔穿刺術(shù),在超聲引導(dǎo)下,抽取20ml左右的羊水,分兩個無菌離心管裝,1500r/min離心8~10min,將沉淀的細胞分別接種于羊水培養(yǎng)基中,置于37攝氏度、5.5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)6天后開始觀察,當羊水細胞貼壁生長旺盛,倒置顯微鏡下見多個細胞克隆時,即可收獲細胞。按照ISCN1995標準,油鏡下計數(shù)20個細胞,分析5個以上核型,發(fā)現(xiàn)嵌合體時加大計數(shù)和分析100核型(若總的核型不足100個,則視可分析的核型數(shù)量而定)。

    1.3 孕婦在知情同意并簽署知情同意書后,在超聲引導(dǎo)下,經(jīng)腹部抽取臍血1~2ml(以血紅蛋白電泳方法鑒別是否污染母親血),注入無菌肝素鋰抗凝管,分別接種在兩瓶外周血淋巴細胞完全培養(yǎng)液中,置于37攝氏度培養(yǎng)68~72小時后收獲,制片及核型分析過程同羊水。

    1.4 孕婦在知情同意并簽署知情同意書后,在超聲引導(dǎo)下,經(jīng)腹部抽取絨毛組織1~2枝,無菌操作下剪碎絨毛組織,胰酶消化10~15分鐘,加入培養(yǎng)基培養(yǎng)5天后觀察,當絨毛細胞貼壁生長旺盛,倒置顯微鏡下見多個細胞克隆時,可加入秋水仙素2~4小時后收獲細胞,制片及核型分析過程同羊水。

    1.5 隨訪 全部病例由專人跟蹤隨訪至產(chǎn)后6個月。

    2 結(jié)果

    3193例高齡孕婦染色體核型分析結(jié)果中,染色體異常99例,異常率3.1%,包括非整倍體83例(83.8%),其中21-三體60例(60.6%)、18-三體13例(13.1%)、1 3-三體5 例(5.0%),4 7,X.Y.例(4.0%),47,XYY 1例(1.0%);結(jié)構(gòu)異常16例(16.2%),其中易位13例(13.1%),45,X[27]/46,X,i(X)(q10)[35]1例(1.0%),46,XN,tas(20;21)(pter;qter)1例(1.0%),46,XN,der(7)dup(p22.1pter);der(9)del(9)(p22.3)1例(1.0%)。見附表。

    3 討論

    本研究數(shù)據(jù)顯示,3193例高齡孕婦胎兒染色體核型分析結(jié)果中異常染色體核型99例,異常率3.1%,略低于其他地區(qū)高齡孕婦胎兒染色體核型的異常率[2][3]。其中非整倍體83例,涉及的染色體包括13、18、21、X、和Y,占異常總數(shù)的83.8%,非整倍體中21-三體60例(60.6%),發(fā)生率最高;有文獻表明,絕大多數(shù)非整倍體是母源性的,發(fā)病率與孕婦高齡有關(guān)[4],隨著女性生育年齡增大,胎兒染色體異常的發(fā)生率增加,而且以染色體非整倍體異常發(fā)生率較高[5][6],與本研究中染色體非整倍體異常率較高一致。以上異常者均行詳細遺傳咨詢,性染色體異常者除了一例47,XYY綜合征選擇繼續(xù)妊娠外,非整倍體的胎兒全部選擇終止妊娠。

    本研究組有15例結(jié)構(gòu)異常的病例,12例非同源染色體發(fā)生平衡易位,經(jīng)進一步驗證檢查,發(fā)現(xiàn)11例來源于父母,1例為新生易位;1例發(fā)生在20和21號染色體發(fā)生末端相接亦為新生結(jié)構(gòu)異常,上述兩例新生的染色體結(jié)構(gòu)異常病例胎兒宮內(nèi)發(fā)育正常,超生檢查正常,遺傳咨詢時已向孕婦詳細說明遺傳效應(yīng)及可能存在的風(fēng)險,孕婦知情后選擇繼續(xù)妊娠,出生后外觀表型正常,目前生長發(fā)育正常,并密切隨訪;有1例因有不良孕產(chǎn)史進入產(chǎn)前診斷的絨毛染色體核型為46,XX,t(7;9)(p15;p21),同期超聲檢查未見異常,進一步檢查發(fā)現(xiàn),母親核型為46,XX,t(7;9)(p15;p21),7號與9號染色體平衡易位攜帶者,表型智力正常,已育有一正常九歲男孩,孕20周時進行羊水染色體核型分析并同時進行CMA的檢測,CMA檢測結(jié)果提示胎兒存在7號染色體部分重復(fù)以及9號染色體部分單體,同期B超檢查結(jié)果發(fā)現(xiàn)心臟、腎臟等多個臟器畸形,胎兒的染色體核型分析報告在結(jié)合超聲檢測報告及CMA的結(jié)果后發(fā)出的核型為46,XN,der(7)dup(p22.1pter),der(9)del(9)(p22.3)的報告,孕婦在接受遺傳咨詢被告知胎兒會出現(xiàn)多發(fā)畸形建議引產(chǎn)的情況下仍堅持選擇繼續(xù)妊娠。新生兒于2018年7月孕40周+5順產(chǎn)一女嬰,超聲提示左腎異?;芈?,考慮左腎多囊性發(fā)育不良;下肢X線檢測雙側(cè)扁平足改變、腦CT、肝膽脾超聲等未見異常;體格檢查發(fā)現(xiàn)硬腭、軟腭Ⅱ度裂,肛門息肉,肌張力稍低等,這病例還在密切跟蹤隨訪。染色體平衡易位攜帶者表型及智力發(fā)育一般正常,但在減數(shù)分裂時,因染色體的聯(lián)會與交換,會產(chǎn)生18種配子,與正常的配子受精后,會形成18種類型的合子,但只有1/18是正常,1/18為表型正常的平衡易位攜帶者,其他16種均不正常;羅氏易位攜帶者會產(chǎn)生6種配子,與正常的配子受精后,會形成6種類型的合子,但只有1/6是正常,1/6為表型正常的平衡易位攜帶者,其他4種均不正常,上述兩種染色體易位均會導(dǎo)致反復(fù)流產(chǎn)、死胎和胎兒多發(fā)畸形等[7],因此對于夫婦其中一方為染色體結(jié)構(gòu)異常攜帶者的病例,在遺傳咨詢過程中須告知孕婦相關(guān)風(fēng)險,勸其積極進入介入性產(chǎn)前診斷。雖然傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)染色體核型分析技術(shù)至今仍然是診斷染色體畸形的金標準,但隨著分子遺傳學(xué)診斷技術(shù)的廣泛應(yīng)用,建議同時進行胎兒分子遺傳學(xué)檢測,兩種方法聯(lián)合診斷,排除胎兒染色體微缺失或微重復(fù)綜合征,并可提高診斷的準確率[8][9][10]。

    附表 3193例高齡孕婦胎兒染色體異常核型

    綜上所述,染色體非整倍體的發(fā)生在常見的5條染色體上,分別為13、18、21、X、和Y,其中以21-三體的發(fā)生率最高;染色體結(jié)構(gòu)異常主要源于父母,因此夫婦其中一方為染色體結(jié)構(gòu)異常攜帶者,建議直接進入產(chǎn)前診斷,有條件的地區(qū)應(yīng)同時送檢分子遺傳學(xué)的診斷,盡早發(fā)現(xiàn)染色體異常胎兒,及時終止妊娠,預(yù)防出生缺陷。

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