廣東省東莞市大朗鎮(zhèn)大朗醫(yī)院(523770)陳彩玲 黎麗冰 陳巧玲 葉淑華
梅毒是一種比較常見的性傳播疾病,具有較強(qiáng)的傳染性。該病的主要病原體是梅毒螺旋體,能夠通過多種途徑傳播,對(duì)人們的健康和安全造成了較大的影響[1]。人是梅毒螺旋體的唯一傳染源,主要包括先天性、獲得性兩種。在臨床上,常用的梅毒血清檢測(cè)方法主要包括梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(TRUST)等方法,均可發(fā)揮一定的作用[2]。但是不同方法之間的檢測(cè)結(jié)果,也存在一定的差異。基于此,本文選取醫(yī)院收治的100例產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查的孕婦,研究了不同梅毒血清檢測(cè)方法在產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查中的應(yīng)用價(jià)值。
1.1 一般資料 選取2019年1月~2019年12月醫(yī)院收治的100例產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查的孕婦,年齡為22~35歲,平均年齡為(28.2±3.6)歲,孕周為13~30周,平均孕周為(21.4±2.8)周,其中84例初產(chǎn)婦,16例經(jīng)產(chǎn)婦。所有患者對(duì)本研究均知情同意,醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。
1.2 方法 所有孕婦分別采用TPPA法、ELISA法、TRUST法進(jìn)行梅毒血清檢測(cè)。孕婦空腹采集靜脈血各5ml,以4000r/min的速度離心血清,靜置后取上清液備用。TPPA法:取100ul血清稀釋液加入第8孔,25ul血清稀釋液分別加入第1、2、3、4、5、6孔。取25ul待檢血清,加入第8孔,混合均勻后取25ul加入第1孔。重復(fù)操作步驟至第6孔,均勻混合后棄去25ul液體。細(xì)胞工作液均勻混合,取25ul未致敏顆粒加入第2孔,取25ul致敏顆粒加入第3、4、5、6孔。在微量振蕩器上振蕩30s,在濕盒內(nèi)放置,在15℃~25℃下孵育2h。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):顆粒凝集覆蓋整個(gè)孔底,呈多邊形膜狀,邊緣粗糙,結(jié)果為陽性(++)至陽性(++++);顆粒凝集,呈多邊形性粗糙大環(huán)狀,結(jié)果為陽性(+);顆粒濃集,呈邊緣光滑小環(huán)狀,結(jié)果為可疑(±);顆粒在孔底中央聚集,光亮,邊緣光滑,結(jié)果為陰性(-)。
ELISA法:血液凝集半小時(shí)以上,取血清檢測(cè)。用稀釋液將酶復(fù)合物稀釋,加入血清、陰性對(duì)照、陽性對(duì)照、質(zhì)控品。孵育1h,洗板,加入底物,在避光環(huán)境下反應(yīng)半小時(shí),加入終止液完成分反應(yīng)。根據(jù)數(shù)值結(jié)果判定陰性或陽性。
TRUST法:卡片定性試驗(yàn),取50ul待檢血清,加入卡片圓圈內(nèi),均勻涂抹。用專用滴管,加入搖勻抗原1滴,旋轉(zhuǎn)卡片8min,觀察結(jié)果。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):卡片圓圈中有黑色凝聚顆粒及絮片出現(xiàn),為陽性;未出現(xiàn)凝聚快,僅有均勻亮灰色,為陰性。卡片定量試驗(yàn),使用等量生理鹽水,在小試管中做6個(gè)稀釋度,分別為1∶1、1∶2、1∶8、1∶16、1∶32,分別取50ul血清,加入每個(gè)稀釋度的玻片圓圈中,用定性法進(jìn)行測(cè)定。
1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo) 比較不同方法的檢測(cè)結(jié)果,分析應(yīng)用價(jià)值。比較三種方法單獨(dú)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)的陽性率結(jié)果,以及敏感度、特異度、準(zhǔn)確度。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS20.0軟件處理數(shù)據(jù),計(jì)量資料和計(jì)數(shù)資料分別用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差和數(shù)或率的形式代表,用t和卡方檢驗(yàn),P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
所選100例孕婦中,常規(guī)篩查得出陽性12例,陰性88例。三種方法檢測(cè)陽性率,TPPA法陽性率75.00%、ELISA法陽性率66.67%、TRUST法陽性率58.33%,三種方法間相互比較,均無顯著差異(P>0.05)。三種方法聯(lián)合檢測(cè)陽性率為91.67%,高于每種方法單獨(dú)檢測(cè),均有顯著差異(P<0.05)。見附表。
附表 三種方法單獨(dú)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)陽性率比較[n(%)]
聯(lián)合檢測(cè)的敏感度91.67%、特異度98.88%、準(zhǔn)確度99.00%,均高于3種方法單獨(dú)檢測(cè)的TPPA(75.00%、96.70%、97.00%)、ELISA(66.67%、95.65%、96.00%)、TRUST(58.33%、94.62%、95.00%),均有顯著差異(P<0.05)。
梅毒是一種比較常見的性傳播疾病,具有很長(zhǎng)的歷史。該病會(huì)對(duì)患者的皮膚、黏膜、其他組織等造成侵犯,一般會(huì)有較長(zhǎng)的病程,對(duì)患者身體健康和生存質(zhì)量造成較大的危害[3]?;颊甙l(fā)病后,主要的臨床表現(xiàn)是生殖器官潰爛。有很多潛伏性梅毒的情況,平時(shí)可能并沒有明顯的癥狀表現(xiàn),但是依然有較高的風(fēng)險(xiǎn)[4]。如果孕婦攜帶梅毒螺旋體病毒,可能會(huì)通過胎盤傳染給胎兒,發(fā)生先天性梅毒,引起不良的妊娠結(jié)局,甚至造成胎兒直接死亡。因此,醫(yī)院對(duì)于梅毒的診療和預(yù)防工作,應(yīng)當(dāng)給予更高的重視,在產(chǎn)前檢查中,要進(jìn)行產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查,及時(shí)發(fā)現(xiàn)和干預(yù),改善妊娠結(jié)局,保證母嬰健康。當(dāng)前臨床上的梅毒血清檢測(cè)方法有很多種,常見的方法主要包括梅毒螺旋體抗體檢測(cè)、梅毒螺旋體DNA檢測(cè),非特異性梅毒螺旋體抗體檢測(cè)等。在妊娠梅毒的檢查與診斷中,梅毒血清學(xué)檢測(cè)將提供重要的依據(jù)[5]。因此,應(yīng)積極采取有效的檢測(cè)方法,提高檢測(cè)結(jié)果的可靠性和敏感性,確保能夠準(zhǔn)確篩查出妊娠梅毒的存在,進(jìn)而減少梅毒的發(fā)病,為母嬰健康安全提供更大的保障。
TPPA法、ELISA法、TRUST法都是當(dāng)前比較常用的梅毒血清檢測(cè)方法。其中TPPA法利用梅毒螺旋體天然抗體作為診斷抗原,具有較高的特異性,但是也存在一定的局限,如診斷結(jié)果難以自動(dòng)化、檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)、檢測(cè)費(fèi)用較高等。ELISA法能夠利用基因重組梅毒螺旋體特異性抗原包被酶標(biāo)板孔,采取雙抗原夾心法,對(duì)梅毒螺旋體抗體進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)中可以使用全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測(cè)系統(tǒng),在大批量檢測(cè)中具有明顯的優(yōu)勢(shì)。TRUST法能夠通過對(duì)患者血清的檢查,觀察其中是否存在非特異性類脂質(zhì)抗體的存在,這種方法比較快捷簡(jiǎn)單,檢測(cè)費(fèi)用較低,但是靈敏度并不理想,對(duì)于弱陽性的標(biāo)本,可能會(huì)受到肉眼主觀判斷的影響,并且也有一定的假陽性結(jié)果容易出現(xiàn)。因此,三種檢測(cè)方法各自具有優(yōu)缺點(diǎn),對(duì)于臨床上懷疑可能是梅毒的孕婦,可以將三種方法聯(lián)合應(yīng)用,能夠大大提高檢測(cè)結(jié)果的陽性率,同時(shí)敏感度、特異度、準(zhǔn)確度等都能夠得到較大的提升。很多妊娠期梅毒都屬于潛伏期梅毒的范疇,此類患者一般并沒有明顯的臨床癥狀表現(xiàn),因此容易漏診誤診。所以,需要重視產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查,采取有效的梅毒血清檢測(cè)方法,盡早發(fā)現(xiàn)和干預(yù)梅毒,減少通過胎盤向胎兒傳染的情況發(fā)生,改善胎兒的妊娠結(jié)局,為母嬰健康和安全提供更有力的保障。
綜上所述,在產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查中,TPPA、ELISA、TRUST等方法均可取得較為理想的結(jié)果,其中聯(lián)合檢測(cè)比單獨(dú)檢測(cè)效果更好,具有較高的應(yīng)用價(jià)值。