免疫檢驗(yàn)中電化學(xué)發(fā)光免疫分析的應(yīng)用和結(jié)果影響因素

張明

【摘 要】目的：探討并分析免疫檢驗(yàn)中電發(fā)光免疫的臨床運(yùn)用以及呈現(xiàn)出的結(jié)果情況。方法：分析并研究電極開關(guān)在電化學(xué)發(fā)光中的相關(guān)影響情況，對(duì)比不同開關(guān)的電極的發(fā)光效率。結(jié)果：觀察電化學(xué)發(fā)光影像，四孔電極的電發(fā)化學(xué)發(fā)光影像下不僅具有四孔發(fā)光的特點(diǎn)，其小孔同樣也存在發(fā)光的情況，Tri-n-propylamine與六水合二氯三聯(lián)吡啶釕所呈現(xiàn)出的圖形較清楚，信噪比為4。結(jié)論：免疫檢驗(yàn)中電化學(xué)發(fā)光會(huì)受到電極開關(guān)的影響而造成不同的發(fā)光效率，電化學(xué)發(fā)光通常集中于邊緣位置。

【關(guān)鍵詞】電化學(xué)發(fā)光免疫;免疫檢驗(yàn);影響因素;電化學(xué)發(fā)光效率

【中圖分類號(hào)】R447 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2095-6851（2020）10--01

本研究共設(shè)置了三類形態(tài)的電極，即圓片狀、螺旋絲狀以及四孔狀，本文主要將這幾類形態(tài)電極運(yùn)用于免疫檢驗(yàn)過程中，來檢測(cè)電化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度與發(fā)光圖像等相關(guān)情況，具體報(bào)道如下。

1 臨床資料與研究方法

1.1 儀器與試劑

本研究試驗(yàn)所使用的試劑包含了硫酸鉀（由鄭州統(tǒng)麒化工所生產(chǎn)）、三丙胺（Tri-n-propylamine，由美國(guó)Sigma-Aldrich公司所生產(chǎn)）、六水合二氯三聯(lián)吡啶釕（由Sigma-Aldrich公司所提供）等。二維成像系統(tǒng)則由恒溫水泵、ICCD、PC機(jī)、ST-130控制器所組成，首先，使用相關(guān)控制器（ST-130）進(jìn)行制冷處理（降低至-40度）之后，將其置于暗箱中，通過光學(xué)透鏡在ICCD光電陰極成像，由ST-130控制器對(duì)數(shù)據(jù)加以采集并完成傳送工作，圖像則由winview加以處理。

1.2 電極選擇

本研究共選擇了三類電極，全部電極都屬于定做電極，其中，四孔電極主要是在圓片電極的基礎(chǔ)上來鉆出一個(gè)1毫米直徑的小孔所得到，而圓片電極的直徑為1.5厘米，最后，以鉑絲（給予彎曲處理后）來得到了實(shí)驗(yàn)使用的螺旋絲電極。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

選擇硫酸鉀，并以0.1mol/L的劑量對(duì)六水合二氯三聯(lián)吡啶釕進(jìn)行溶解處理，從而配制成1mmol/L的實(shí)驗(yàn)液，在運(yùn)用的過程中通過磷酸鹽進(jìn)行稀釋處理，并且對(duì)Tri-n-propylamine以及六水合二氯三聯(lián)吡啶釕依照1：2的比例加入樣品池，兩組電壓設(shè)置為1.25V，運(yùn)用ICCD成像，同時(shí)探測(cè)發(fā)光的基本強(qiáng)度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法

本研究中的全部數(shù)據(jù)均使用SPSS 20.0的軟件來加以處理，同時(shí)，本研究中的計(jì)量資料則以“”所表示，以“”來檢驗(yàn)本文中各數(shù)據(jù)間呈現(xiàn)出的數(shù)據(jù)差。統(tǒng)計(jì)結(jié)果P>0.05，數(shù)據(jù)差異對(duì)比不明顯，無統(tǒng)計(jì)學(xué)比較意義，統(tǒng)計(jì)結(jié)果P<0.05，代表數(shù)據(jù)差異對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀察電化學(xué)發(fā)光影像，四孔電極與圓片電極都存在邊緣發(fā)光的情況 ，其中，四孔電極不僅具有四孔發(fā)光的特征，同時(shí)，它的小孔同樣存在發(fā)光的情況，在此基礎(chǔ)上，Tri-n-propylamine與六水合二氯三聯(lián)吡啶釕（100mol/L）所呈現(xiàn)出的圖像十分清楚，其信噪比為4。

對(duì)比發(fā)光強(qiáng)度，運(yùn)用濃度為1amo/1L-1nmo/1L的Tri-n-propylamine與六水合二氯三聯(lián)吡啶釕分別測(cè)試四孔電極的發(fā)光體系與圓片發(fā)光體系的ECL強(qiáng)度，結(jié)果顯示，對(duì)比圓片電極來說，四孔電極中，其電化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度大約提升了50-90%，運(yùn)用圓片電極檢測(cè)Ru（bpy）3Cl2.6H2O的極限值為1fom/L，而運(yùn)用四孔圓片的電極極限則為1aom/L。

3 討論：

就當(dāng)前臨床免疫學(xué)來看，抗原-抗體特異性結(jié)合是其中受到廣泛關(guān)注的問題，通過電化學(xué)發(fā)光免疫則能運(yùn)用此生物特異性完成對(duì)復(fù)雜生物體系的分析選擇。電化學(xué)發(fā)光免疫分析主要是指光化學(xué)發(fā)光與免疫檢測(cè)結(jié)合的新型免疫分析法，對(duì)比常規(guī)化學(xué)發(fā)光來看，電化學(xué)發(fā)光免疫分析的標(biāo)記物存在一定的差異性，它屬于電極表面特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，這是由兩個(gè)部分所組成的，即化學(xué)發(fā)光與電發(fā)光。對(duì)比其它類別免疫分析法來說，電化學(xué)發(fā)光免疫分析有著較高的檢驗(yàn)速度、較高的靈敏度、無任何發(fā)射性以及較高的檢驗(yàn)范圍等特點(diǎn)，電化學(xué)發(fā)光免疫分析在自動(dòng)免疫分析前沿技術(shù)中以相對(duì)較高的穩(wěn)定度以及操控性在生命科學(xué)研究中呈現(xiàn)了良好的發(fā)展效益。在如今電化學(xué)發(fā)光技術(shù)中，最為常見的工作電極均以表面光滑的圓片電極為主，由于邊緣效應(yīng)的產(chǎn)生，分布于電極表面的電荷并不均勻，這致使發(fā)光集中于工作電極的邊緣位置，為此，發(fā)光效率相對(duì)較低，從而致使極低的探測(cè)靈敏度。本研究結(jié)果顯示，四孔電極中，四孔與小孔均出現(xiàn)了發(fā)光的情況，Tri-n-propylamine與六水合二氯三聯(lián)吡啶釕圖形較清晰，信噪比為4，而螺旋狀電極呈現(xiàn)出螺旋狀的發(fā)光效果。電化學(xué)發(fā)光免疫分析作為一類與時(shí)俱進(jìn)的免疫標(biāo)記技術(shù)為生命科學(xué)研究與臨床診斷提供了一種有效的檢測(cè)手段，并逐漸成為免疫分析與DNA分析的前沿方法。

總的來說，電化學(xué)發(fā)光免疫分析是一類相對(duì)快捷、便捷、具有較高靈敏度的免疫檢驗(yàn)法，對(duì)比表面積進(jìn)行調(diào)整能夠有效完成檢測(cè)范圍動(dòng)態(tài)的調(diào)整價(jià)值。

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