孔秀紅
【摘 要】目的:探討不同標(biāo)本及處理方式對微柱凝膠卡式法交叉配血試驗結(jié)果的影響。方法:選取2019年2-2019年6月間在我院接受輸血治療的50例患者標(biāo)本和30例有凝塊血液標(biāo)本為研究對象,進行交叉配血試驗,包括使用血清與血漿、不同的離心方式、抗凝不完全血樣的使用、不同濃度紅細(xì)胞懸液的對比。結(jié)果:抗凝不完全血樣和未進行抗凝處理的血樣在交叉配血試驗中易出現(xiàn)假陽性結(jié)果,當(dāng)紅細(xì)胞懸液濃度高于1%時易引起假陽性。結(jié)論:標(biāo)本的處理方式不當(dāng),可造成微柱凝膠試驗假陽性;未抗凝標(biāo)本由于纖維蛋白短時間難以析出,不宜急診配血;紅細(xì)胞懸液不可過濃,且抗凝不完全血樣紅細(xì)胞最好洗滌后使用。
【關(guān)鍵詞】卡式法;微柱凝膠;交叉配血
【中圖分類號】R457.1【文獻標(biāo)識碼】A【文章編號】1005-0019(2020)13--02
在臨床治療與搶救生命中,輸血是一項重要的治療措施,要保證輸血安全,必須保證供血者紅細(xì)胞表面的凝集原與受血者血漿中的凝集素相吻合匹配[1]。常規(guī)來講,就是雙方的血液血型必須具有相容性,否則在對患者輸入不匹配的血液后,會導(dǎo)致受血者血漿中的凝集素與輸入的紅細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng),形成血液凝塊,激活補體導(dǎo)致溶血。在臨床中,血型鑒定、抗體篩選和交叉配血是對輸血治療安全的重要保障。三項方法的根本目的就是為了保證血液輸注后,不會造成供受者的紅細(xì)胞破壞,從而引發(fā)嚴(yán)重輸血不良反應(yīng)。交叉配血中通常應(yīng)用微柱凝膠試驗,該種試驗方法能夠有效地將免疫血清檢測與凝膠技術(shù)結(jié)合,操作方法更為簡便,但同時試驗標(biāo)本也有了更高的要求。本文對卡式法交叉配血試驗中出現(xiàn)假陽性的原因及對策進行研究,旨在提高臨床配血準(zhǔn)確性。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取2019年2月-6月間在我院接受輸血治療的50例患者標(biāo)本和30例有凝塊血液標(biāo)本為研究對象。其中男性28例,女性22例,年齡19-56歲,平均(34.6±1.3)歲,全部進行輸血治療,對所有患者采集抗凝血與促凝血,血樣經(jīng)過血常規(guī)檢查,紅細(xì)胞、白細(xì)胞以及血小板計數(shù)均顯示正常,RhD檢出結(jié)果均為陽性,與供血者凝聚胺交叉配血試驗顯示吻合度高,同時選取30例抗凝不完全血液標(biāo)本進行交叉配血試驗,研究對象臨床資料經(jīng)由統(tǒng)計學(xué)比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
1.2 方法
1.2.1 儀器與試劑 ABODE血型檢測卡(微柱凝膠)、抗人球蛋白檢測卡由長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供,所有微柱凝膠卡在使用前均1000r/min離心1min;凝聚胺試劑盒由珠海貝索生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供;IgG抗D(效價大于或等于64)由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供。以上所有試劑均在效期內(nèi)使用。TD-A型血型血清學(xué)用離心機、FYQ型免疫微柱孵育器均由長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司提供。
1.2.2 操作方法 將受血者與供血者的血樣離心分離血清,進一步離心分離紅細(xì)胞,分別將二者紅細(xì)胞配成0.8%生理鹽水懸液,將50μL受血者血清與50μL供血者紅細(xì)胞懸液混合加入主側(cè)凝膠管中,將50μL受血者紅細(xì)胞懸液與50μL供血者血清加入次側(cè)凝膠管中,加樣后的凝膠試劑卡(長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司,批號S20150036)置于免疫微柱孵育器中37℃孵育15min,孵育后的凝膠試劑卡使用血型血清學(xué)多用離心機(BYL型,長春博研科學(xué)儀器有限公司)離心(900r/min,2min)后再離心(1500r/min,3min)。探究血樣抗凝與否對試驗結(jié)果影響時,將EDTA-K2抗凝管中血樣、普通促凝管中血樣和不完全抗凝血樣作為受血者樣本使用MGT分別與供血者血樣進行交叉配血,并比較3組樣品陽性率;探究不同紅細(xì)胞懸液濃度對試驗結(jié)果影響時,將EDTA-K2抗凝管中血樣作為受血者血樣,且將受血者紅細(xì)胞懸液濃度用生理鹽水依次調(diào)整為0.5%、0.8%、1.0%、2.0%、3.0%、4.0%,使用MGT分別與供血者血樣進行交叉配血[2],比較3組樣品陽性率。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
本次研究將SPSS 20.0做為數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析軟件,對研究中的數(shù)據(jù)進行處理,采用與t檢驗分別對計數(shù)與計量資料進行檢驗,計數(shù)資料用百分率(%)表示,計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,即(),檢驗結(jié)果設(shè)定P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
血樣抗凝與否影響微柱凝膠卡式法交叉配血試驗結(jié)果,當(dāng)抗凝處理不完全時易出現(xiàn)假陽性,普通促凝組陽性率46.00%(23/50),EDTA-K2抗凝組陽性率0.00%(0/50),比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);不完全抗凝組陽性率43.33%(13/30),EDTA-K2抗凝組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。當(dāng)紅細(xì)胞懸液濃度大于1%時假陽性率6.00%(3/50),高于低濃度紅細(xì)胞懸液濃度陽性率(濃度0.5%、0.8%時陽性率均為0.00%),比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);2%紅細(xì)胞懸液濃度假陽性率86.00%(43/50),高于低濃度紅細(xì)胞懸液濃度陽性率,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);濃度大于2%紅細(xì)胞懸液時出現(xiàn)完全假陽性(濃度3.0%、4.0%時陽性率均為100.00%),高于低濃度紅細(xì)胞懸液濃度陽性率,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
3 討論
輸血是臨床搶救和治療的一項重要措施,交叉配血是指將患者血清中加入供血者的紅細(xì)胞懸液進行凝集實驗,只有交叉配血兩側(cè)均無凝集反應(yīng),方能進行輸血,次側(cè)出現(xiàn)凝集反應(yīng)則說明配血基本相合,緊急情況下可以輸血。交叉配血能夠保證輸血的安全性和有效性,近年來,臨床上常采用凝聚胺介質(zhì)配血、卡式配血等方式進行檢驗,凝聚胺介質(zhì)配血法操作簡單便捷,常用于急診配血,但該法局限性較強,受到多種因素的影響。研究顯示[3]微柱凝膠卡式法配血,適宜濃度為0.8%-1.0%,不能超過1.0%,紅細(xì)胞懸液濃度過濃會出現(xiàn)假陽性,跟本研究結(jié)果一致。
綜上所述,標(biāo)本的處理方式不當(dāng),可造成微柱凝膠試驗假陽性;未抗凝標(biāo)本由于纖維蛋白短時間難以析出,不宜急診配血;紅細(xì)胞懸液不可過濃,且抗凝不完全血樣紅細(xì)胞最好洗滌后使用。
參考文獻
田靜輝. 研究不同標(biāo)本對卡式法交叉配血試驗結(jié)果的影響[J]. 智慧健康,2017,3(19):16-17.
鞏 戎. 不同標(biāo)本及處理方式對微柱凝膠卡式法交叉配血試驗結(jié)果的影響[J]. 山西職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2019,29(4):58-60.
余海燕,丁后明,李凌波. 不同標(biāo)本對卡式法交叉配血試驗結(jié)果的影響分析[J]. 檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2017,14(3):386-388.