任潔 黃成河
【摘 要】目的:探析乙型、丙型肝炎病毒感染者血清中自身抗體檢測(cè)結(jié)果。方法:選取2018年11月~2019年11月,在我院接受治療的750例HBV患者,350例HCV患者,50例健康體檢者,檢測(cè)三組自身血清中的抗體。結(jié)果:HBV患者自身抗體的陽(yáng)性率為19.3%,HCV患者自身抗體的陽(yáng)性率為28.3%,均較對(duì)照組7.5%更高,(P<0.05)統(tǒng)計(jì)學(xué)存在意義。自身存在抗體的感染者和不存在抗體的感染者對(duì)比乙型肝炎病毒基因、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶均存在差異。結(jié)論:感染乙型或丙型肝炎病毒可將自身機(jī)體的免疫反應(yīng)觸發(fā),自身免疫也許是感染HBV、HCV后組織損傷重要的因素。
【關(guān)鍵詞】丙型肝炎;乙型;自身抗體;血清
【中圖分類號(hào)】R446【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1005-0019(2020)13--01
部分學(xué)者指出,HBV、HCV肝組織損傷不是肝細(xì)胞內(nèi)HBV、HCV病毒復(fù)制直接產(chǎn)生的結(jié)果,而是因一系列的機(jī)體免疫反應(yīng)致使肝細(xì)胞出現(xiàn)病理性的免疫損害,自身產(chǎn)生抗體和自身免疫性疾病激活期間,病毒可能參與其中。國(guó)內(nèi)外學(xué)者在近些年發(fā)現(xiàn)[1],HBV、HCV的感染者有自身免疫現(xiàn)象存在,其表現(xiàn)主要為檢測(cè)出自身各種抗體,且相較于正常人,其差異較為顯著,針對(duì)乙丙肝患者中自身存在臨床免疫表現(xiàn)或自身存在高滴度抗體的患者,治療時(shí)給予干擾素可使其病情惡化,所以,研究者更加注重病毒性肝炎患者病情發(fā)展和癌變中自身免疫的效果。
1 資料與方法
1.1 臨床資料
在我院2018年11月~2019年11月住院感染HBV、HCV的患者選取1100例,其中乙肝750例,男494例,女256例,丙肝350例,男230例,女120例。另選取健康體檢者40例為對(duì)照組,其中男30例,女10例。無(wú)急慢性的肝腎疾病存在,且近期未應(yīng)用免疫抑制劑和抗生素。
1.2 儀器和試劑
1.2.1 儀器 印跡掃描儀、搖床、臺(tái)式高速離心機(jī)、貝克曼Au5800,2700生化分析儀、美國(guó)雅培i2000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀、自動(dòng)光激化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀LiCA500、免疫印跡掃描儀、熒光顯微鏡。
1.2.2 試劑 自身免疫性肝病IgG類抗體檢測(cè)試劑盒:包括Ro52抗原、SLA/LP、LC-1、LKM-1、gp210、PML、Sp100、M2-3E(BPO)、AMA-M2。
自身抗體譜IgG檢測(cè)試劑盒:用于檢測(cè)人血清、血漿內(nèi)的自身抗體,包括體位定性檢測(cè)抗橫紋肌抗體、抗肝腎微粒體抗體、抗雙鏈抗體、抗平滑肌抗體、抗線粒體抗體、抗核抗體。
上述設(shè)計(jì)均源自德國(guó)呂貝克歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份有限公司定量檢測(cè)乙型、丙型肝炎病毒的試劑盒源自雅培和科美儀器配套試劑
1.3 方法
自身抗體檢驗(yàn):樣本為乙二胺四乙酸、人血清、檸檬酸鹽或肝素抗凝的血漿。以免疫印跡法對(duì)患者樣本加以測(cè)定,以樣本緩沖液稀釋樣本,比例為1:101,間接免疫熒光法測(cè)定標(biāo)本歐蒙公司推薦的樣本起始稀釋度為1:100。嚴(yán)格按照要求準(zhǔn)備血漿、血清、試劑樣本,并平衡于室內(nèi)30min,后以說明書要求為標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行相關(guān)操作。
2 結(jié)果
2.1 檢測(cè)自身抗體
檢測(cè)HBV、HCV患者自身抗體陽(yáng)性率分別為19.3%、28.3%,見表1
2.2HBV感染者相關(guān)性分析
感染HBV者與病毒載量、肝功主要指標(biāo)、年齡、性別間關(guān)系分析,見表2.
2.3HCV感染者相關(guān)性分析
檢測(cè)HCV感染者顯示,其陰性組和陽(yáng)性組在性別、年齡、ALT、核酸陽(yáng)性率及病毒載量對(duì)比,(P<0.05)統(tǒng)計(jì)學(xué)存在意義,見表3.
3 討論
本文經(jīng)檢測(cè)HBV感染者的血清,檢出自身多種抗體的幾率為19.3%,相較于對(duì)照組7.5%高,且差異較為顯著(P<0.05),自身檢出抗體中以ANA、Ro52較為多見,主要為低滴度,與相關(guān)文獻(xiàn)資料基本符合[2]。本次研究顯示,感染HBV者可引發(fā)自身的免疫反應(yīng),致使機(jī)體本身的免疫出現(xiàn)紊亂,對(duì)其發(fā)生機(jī)制加以分析可能為(1)感染肝炎病毒從而誘導(dǎo)自身抗原加以修飾,進(jìn)而誘發(fā)自身的免疫反應(yīng)。(2)感染肝炎病毒致使自身免疫的控制機(jī)制出現(xiàn)紊亂。(3)肝炎病毒的抗原和自身機(jī)體抗原分子的發(fā)生模擬。而肝炎病毒的致敏免疫活性細(xì)胞可與外來抗原間發(fā)生特異性的免疫反應(yīng),與自身的組織成分間也可發(fā)生交叉的免疫反應(yīng)。為使感染HBV者自身抗體的存在意義得到進(jìn)一步明確,本文對(duì)照了感染者自身抗體與其性別、年齡間關(guān)系,并對(duì)其病毒載量、肝功實(shí)施檢測(cè),發(fā)現(xiàn)感染HBV者自身的抗體陰性和陽(yáng)性組性別、年齡間差異無(wú)相關(guān)性,而陽(yáng)性組的AIT、AST、HBV-DNA增高較為顯著,提示了自身出現(xiàn)抗體與體內(nèi)HBV病毒的復(fù)制有關(guān),病毒的復(fù)制對(duì)自身免疫起到促進(jìn)作用,最終使肝臟病理?yè)p害加重。
據(jù)相關(guān)研究指出[3],慢性的丙型肝炎有與HCV復(fù)制相關(guān)的自身免疫現(xiàn)象存在,檢測(cè)其體內(nèi)可發(fā)現(xiàn)自身抗體,本文也驗(yàn)證了感染HCV者自身抗體的陽(yáng)性率較對(duì)照組高,也較感染HBV女性和年齡較大的患者高,且差異較為明顯,可能因(1)分子模型的機(jī)制,意思是HCV的病毒蛋白與某些人體自身蛋白間有序列相似性存在,致使出現(xiàn)交叉的免疫反應(yīng),將免疫反應(yīng)和免疫耐受的平衡破壞,致使自身組織或細(xì)胞持續(xù)受到機(jī)體免疫系統(tǒng)的攻擊,自身抗體產(chǎn)生。(2)旁路激活理論。特定組織受到病毒感染后局部出現(xiàn)炎癥反應(yīng),如因某些細(xì)胞因子釋放,激活了自身反應(yīng)的T細(xì)胞,對(duì)B細(xì)胞的分化繁殖進(jìn)行輔助,自身抗體產(chǎn)生。自身抗體的陽(yáng)性組中AIT、AST、HBV-DNA的陽(yáng)性率、載量均出現(xiàn)程度不同的增高,提示了,慢性丙型肝炎的自身抗體使自身抗原遞呈增加,促發(fā)肝臟出現(xiàn)炎癥損傷。
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