MPB64免疫膠體金檢測(cè)法在分枝桿菌菌種鑒定中的應(yīng)用

孔繁慧

【摘 要】 目的：對(duì)MPB64免疫膠體金檢測(cè)法在分枝桿菌菌種鑒定當(dāng)中的應(yīng)用進(jìn)行探究。方法：選擇PCR擴(kuò)增測(cè)序法作為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)傳統(tǒng)PNB法與MPB64免疫膠體金法在58株分枝桿菌分離株中的鑒定能力進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果：在本次研究當(dāng)中，MPB64免疫膠體金檢測(cè)法與PNB法檢測(cè)結(jié)果，與PCR測(cè)序法結(jié)果的一致率，分別為95.87%與87.14%，MPB64免疫膠體金檢測(cè)法在結(jié)核分枝桿菌的敏感度、特異度以及預(yù)測(cè)值方面，達(dá)到了88.42%、99.65%、99.17%、94.56%，而對(duì)于PNB法檢測(cè)來看，各項(xiàng)值為62.31%、99.27%、97.73%、84.23%，在采用膠體金法之后，能夠在15min之內(nèi)獲取相應(yīng)的結(jié)果，檢測(cè)時(shí)間更為迅速。結(jié)論：在當(dāng)前的分枝桿菌菌種鑒定當(dāng)中，MPB64免疫膠體金檢測(cè)法的應(yīng)用效果更加，具有較強(qiáng)的靈敏度與特異度，同時(shí)檢測(cè)方法簡單，檢測(cè)速度更快，在臨床中的推廣價(jià)值較高。

【關(guān)鍵詞】 MPB64免疫膠體金檢測(cè)法;分枝桿菌;菌種鑒定

在我國當(dāng)前的社會(huì)發(fā)展當(dāng)中，結(jié)核病的發(fā)病率在不斷的提升，對(duì)人們的生命安全產(chǎn)生了嚴(yán)重的威脅。特別是近些年，受到環(huán)境、氣候以及檢測(cè)手段的影響，非結(jié)核分枝桿菌感染呈現(xiàn)出快速增長的狀態(tài)，使得人們的身體健康受到了明顯的影響[1]。在目前的臨床中，結(jié)核分枝桿菌是造成結(jié)核病的主要病原菌，同時(shí)存在很強(qiáng)的傳染性，法律中將其規(guī)定為乙類傳染病。從檢測(cè)結(jié)果來看，結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌之間存在很大的相似之處，不管是在影像學(xué)檢查、臨床癥狀，還是在實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)方面，都比較相似，這就需要對(duì)兩類菌種進(jìn)行快速的鑒定，為臨床用藥提供可靠保障[2]。因此，本研究在選取58株分枝桿菌作為樣本的基礎(chǔ)上，對(duì)MPB64免疫膠體金檢測(cè)法在分枝桿菌菌種鑒定當(dāng)中的應(yīng)用進(jìn)行探究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

在本次研究當(dāng)中，選取的樣本是2019年1月到2019年12月間分離的58株分枝桿菌菌株，使用的試劑為MPB64免疫膠體金快速診斷試劑盒以及PNB鑒定培養(yǎng)基，儀器選擇為PTC 200 PCR 擴(kuò)增儀，電泳儀以及凝膠成像系統(tǒng)。

1.2 方法

在進(jìn)行PNB培養(yǎng)基生長試驗(yàn)的過程中，需要按照中國防癆協(xié)會(huì)出臺(tái)的相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行，生長試驗(yàn)為陽性，判定為NTM，其他情況則需要將其判定為結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群[3]。在采用MPB64免疫膠體金檢測(cè)法的過程中，需要將分枝桿菌純培養(yǎng)物1μL添加到0.2ml的生理鹽水當(dāng)中，進(jìn)行充分的漩渦，然后取出100μL的菌懸液，將其加入到試劑盒當(dāng)中，在經(jīng)過15min之后，對(duì)結(jié)果進(jìn)行觀察[4]。在判定的過程中，如果控制區(qū)與檢測(cè)區(qū)均表現(xiàn)出紫紅色條帶，則為陽性;如果控制區(qū)出現(xiàn)紫紅色條帶，但是檢測(cè)區(qū)沒有出現(xiàn)，則為陰性;如果控制區(qū)當(dāng)中沒有出現(xiàn)任何條帶，那么需要進(jìn)行重新的檢測(cè)[5]。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

在此次試驗(yàn)當(dāng)中，需要采用特異度、敏感度以及陽性、陰性預(yù)測(cè)值進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2 結(jié)果

在本次研究當(dāng)中，MPB64免疫膠體金檢測(cè)法與PNB法檢測(cè)結(jié)果，與PCR測(cè)序法結(jié)果的一致率，分別為95.87%與87.14%，MPB64免疫膠體金檢測(cè)法在結(jié)核分枝桿菌的敏感度、特異度以及預(yù)測(cè)值方面，達(dá)到了88.42%、99.65%、99.17%、94.56%，而對(duì)于PNB法檢測(cè)來看，各項(xiàng)值為62.31%、99.27%、97.73%、84.23%，在采用膠體金法之后，能夠在15min之內(nèi)獲取相應(yīng)的結(jié)果，檢測(cè)時(shí)間更為迅速。

3 討論

在目前的臨床中，結(jié)核分枝桿菌是造成結(jié)核病的主要病原菌，同時(shí)存在很強(qiáng)的傳染性，法律中將其規(guī)定為乙類傳染病。從檢測(cè)結(jié)果來看，結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌之間存在很大的相似之處，不管是在影像學(xué)檢查、臨床癥狀，還是在實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)方面，都比較相似，這就需要對(duì)兩類菌種進(jìn)行快速的鑒定，為臨床用藥提供可靠保障。在本次研究當(dāng)中，MPB64免疫膠體金檢測(cè)法與PNB法檢測(cè)結(jié)果，與PCR測(cè)序法結(jié)果的一致率，分別為95.87%與87.14%，MPB64免疫膠體金檢測(cè)法在結(jié)核分枝桿菌的敏感度、特異度以及預(yù)測(cè)值方面，達(dá)到了88.42%、99.65%、99.17%、94.56%，而對(duì)于PNB法檢測(cè)來看，各項(xiàng)值為62.31%、99.27%、97.73%、84.23%，在采用膠體金法之后，能夠在15min之內(nèi)獲取相應(yīng)的結(jié)果，檢測(cè)時(shí)間更為迅速。

綜上所述，在當(dāng)前的分枝桿菌菌種鑒定當(dāng)中，MPB64免疫膠體金檢測(cè)法的應(yīng)用效果更加，具有較強(qiáng)的靈敏度與特異度，同時(shí)檢測(cè)方法簡單，檢測(cè)速度更快，在臨床中的推廣價(jià)值較高。

參考文獻(xiàn)

[1] 徐禮鋒， 余旭良， 張峰， et al. 液體分枝桿菌培養(yǎng)管培養(yǎng)聯(lián)合結(jié)核分枝桿菌分泌蛋白64免疫膠體金檢測(cè)法在快速鑒定結(jié)核分枝桿菌中的應(yīng)用[J]. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2017（4）：48-50.

[2] 周笑珍， 王冰雪， 吳曉春， et al. 結(jié)核分枝桿菌液體培養(yǎng)配合MPB64的免疫膠體金法檢測(cè)在結(jié)核診斷中的應(yīng)用[J]. 全科醫(yī)學(xué)臨床與教育， 2017， 09（3）：327-328.

[3] 張帆， 劉守江， 覃林珍， et al. MPB64抗原檢測(cè)對(duì)非結(jié)核分枝桿菌快速鑒別的意義[J]. 中國熱帶醫(yī)學(xué)， 2015， 14（10）：1286-1287.

[4] 施軍衛(wèi)， 顧德林， 石彩芳， et al. 米氏7H9液體培養(yǎng)聯(lián)合MPB64膠體金法快速檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌[J]. 臨床檢驗(yàn)雜志，2016（6）：38-39.

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