瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 對(duì)櫻花根癌病的防效與抑菌物質(zhì)初探

張錫唐，吳小芹*，陳飛

（1.南京林業(yè)大學(xué)南方現(xiàn)代林業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心，南京林業(yè)大學(xué)林學(xué)院，江蘇 南京，210037；2.江蘇省有害生物入侵預(yù)防與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京，210007；3.江蘇天悅生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司，江蘇 徐州，221600）

櫻花作為一種優(yōu)良的園林觀賞樹(shù)種，在全國(guó)各地均有種植［1］，然而櫻花根癌病嚴(yán)重影響了櫻花的生長(zhǎng)和苗木的培育。該病害在北京、河北、遼寧、吉林、山東、內(nèi)蒙古、浙江、江蘇、上海等地均有不同程度地發(fā)生［2］。根癌病作為一種嚴(yán)重的細(xì)菌性病害，其病原根癌土壤桿菌（Agrobacterium tu?mefaciens）可 侵 染93 科331 屬643 種 植 物，在 我 國(guó)根癌病菌可侵染櫻桃、桃、杏、李、蘋(píng)果、梨、葡萄、榆葉梅［3］、楊樹(shù)［4］、毛白楊［5］、無(wú)患子［6］等。由于該病菌特殊的致病機(jī)制（即病菌致病基因Ti 質(zhì)粒轉(zhuǎn)移并整合于植物的細(xì)胞中，導(dǎo)致植物細(xì)胞的異常增生，從而形成根瘤），導(dǎo)致防治較為困難［7］。前期調(diào)查發(fā)現(xiàn)，江蘇徐州沛縣苗木種植基地的櫻花根癌病發(fā)生嚴(yán)重，平均發(fā)病率76%，重發(fā)病區(qū)達(dá)92%［8］，尋找良好的防治方法迫在眉睫。

上世紀(jì)70 年代前世界各國(guó)對(duì)該病進(jìn)行了多年研究，未能獲得理想的防治方法。1972 年澳大利亞Kerr 等研制出放射土壤桿菌（Agrobactorium ra?diobacter）K84 生防菌劑，該生防菌劑在防治桃樹(shù)根癌病獲得成功并在世界多地廣泛應(yīng)用，是根癌病防治中的重大突破［9］。之后研究者們發(fā)現(xiàn)了更多可用于防治根癌病的生防菌株，如金色假單胞菌（Pseudomonas aureofaciens）B-4117 和熒光假單胞菌（P. fluorescens）CR330D 對(duì)葡萄農(nóng)桿菌（A.tumefaciens）Tm4 和Sz1 均具有拮抗作用［10］；水生拉 恩 氏 菌（Rahnella aquatilis）HX2 對(duì) 由A. vitis K308 引起的葡萄根癌病有較好的抑制作用［11］；Rhizobium vitis VAR03-1 對(duì)蘋(píng)果根癌病具生物防治的作用［12］。瓦雷茲芽孢桿菌（Bacillus velezen?sis）是一種良好的根際促生細(xì)菌，對(duì)許多病原菌都具有拮抗作用［13］。其抑菌機(jī)理包括：（1）產(chǎn)生細(xì)胞分裂素等促生物質(zhì)促進(jìn)植物生長(zhǎng)；（2）產(chǎn)生鞭毛蛋白、脂多糖類和水楊酸類等誘導(dǎo)抗性的物質(zhì)來(lái)誘導(dǎo)植物的系統(tǒng)抗性；（3）產(chǎn)生抑菌物質(zhì)如羊毛硫抗生素或細(xì)菌素（lantibiotics or bacteriocins）或脂肽類 和 聚 酮 類 化 合 物（lipopeptides and polyketides）［14］。關(guān)于瓦雷茲芽孢桿菌防治櫻花根癌病的報(bào)道較少。

本研究前期從櫻花根際土壤篩選到一株對(duì)根癌土壤桿菌有拮抗作用的菌株JK-XZ8，經(jīng)鑒定其為瓦雷茲芽孢桿菌（B. velezensis）。本研究將該菌株進(jìn)行田間應(yīng)用，測(cè)定其野外生防效果；并對(duì)該菌株JK-XZ8 的抑菌粗提物的穩(wěn)定性和抑菌合成相關(guān)基因檢測(cè)，以期為探討該生防菌的抑菌機(jī)理及今后的田間應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

瓦雷茲芽孢桿菌（B. velezensis）JK-XZ8 和根癌土壤桿菌（A. tumefaciens）PX-1 均由本重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室從櫻花根際篩選分離獲得，現(xiàn)保存于南京林業(yè)大學(xué)森林病理實(shí)驗(yàn)室。

供試櫻花：一年生日本早櫻（Prunus subhirtel?la），由江蘇天悅生態(tài)農(nóng)業(yè)股份有限公司提供。

放射土壤桿菌（Agrobactorium radiobact）K84生物菌肥購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)，用于防治根癌病。

培養(yǎng)基：除特殊說(shuō)明外，配制時(shí)均用蒸餾水定容至1 000 mL，121℃滅菌20 min。LB 培養(yǎng)基（生防細(xì)菌計(jì)數(shù)）：10 g 蛋白胨、5 g 酵母提取物、10 g NaCl；Medium D1 培養(yǎng)基［15］（篩選根癌土壤桿菌）：15 g 甘露醇、5 g NaNO3、6 g LiCl、20 mg Ca（NO3）2·4H2O、2 g K2HPO4、0.2 g MgSO4·7H2O、0.1 g溴百里酚藍(lán)、15 g瓊脂，根據(jù)根癌土壤桿菌的抗生素抗性特性加入一定濃度的相應(yīng)抗生素。

1.2 平板拮抗測(cè)定

活化瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 與根癌土壤桿菌PX-1，先將2 種菌株接種于25 mL LB 液體培養(yǎng)基，置于200 r·min-1，28℃的恒溫?fù)u床中培養(yǎng)24 h。將100 μL 根癌土壤桿菌PX-1 涂布于固體LB 培養(yǎng)基中，之后將6 mm 的無(wú)菌濾紙置于平板上，最后吸取5 μL 瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 滴加于無(wú)菌濾紙上。將固體平板置于28 ℃的恒溫培養(yǎng)箱中24 h，觀察濾紙片周?chē)欠裼幸志Τ霈F(xiàn)。如有抑菌圈，通過(guò)游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈2 個(gè)垂直方向的直徑，平均值即為該抑菌圈的直徑。

1.3 抑菌物質(zhì)的粗提及其拮抗作用測(cè)定

參 考Abdallah 等 方 法［16］，通 過(guò) 酸 沉 淀 進(jìn) 行 脂肽分離。用6 mol·L-1HCl 將發(fā)酵濾液調(diào)節(jié)至pH 2，并在4 ℃下儲(chǔ)存過(guò)夜。離心后，用5 倍體積的甲醇將沉淀物萃取2 次。將溶液用旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器干燥，將剩余的干燥殘余物溶于50 mmol·mL-1Tris-HCl，pH 7.5 緩沖液中，然后通過(guò)0.22 μm 過(guò)濾器過(guò)濾，即獲得抑菌物質(zhì)溶液。

將100 μL 根癌土壤桿菌PX-1 涂布于LB 固體平板上，之后在平板上放3 個(gè)6 mm 的圓形濾紙片，將生防菌瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 滴加10 μL 于濾紙片上，每處理3 個(gè)重復(fù)。最后將其放置于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，觀察是否有抑菌圈。

1.4 抑菌物質(zhì)相關(guān)基因的檢測(cè)

選擇8 個(gè)與抑菌物質(zhì)假定合成相關(guān)的基因進(jìn)行克?。?6～18］，其基因和克隆引物如表1 所示。

表1 抑菌物質(zhì)假定合成相關(guān)基因的引物Tab.1 Primers of genes related to bacteriostatic substances

1.5 抑菌物質(zhì)穩(wěn)定性測(cè)定

參考梁靜［4］的方法進(jìn)行抑菌物質(zhì)熱穩(wěn)定、酸堿穩(wěn)定性、蛋白酶穩(wěn)定性和紫外穩(wěn)定性檢測(cè)。熱穩(wěn)定試驗(yàn)中將抑菌物質(zhì)溶液分別置于20、50、80、100℃的水浴鍋中處理15～20 min；酸堿穩(wěn)定性中用乳酸和氫氧化鈉將抑菌物質(zhì)溶液的pH 值調(diào)為2、4、6、9、12；蛋白酶穩(wěn)定性是用蛋白酶K 處理抑菌物質(zhì)溶液30 min；紫外照射（70 μW·cm-2的30 W紫外線燈管，0.5 m）抑菌物質(zhì)溶液1、2、3 h，最后均利用濾紙片法測(cè)定抑菌活性。

1.6 野外生防試驗(yàn)

一年生櫻花苗木種植于江蘇徐州沛縣張莊鎮(zhèn)天悅生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司苗圃，當(dāng)?shù)赝寥罏辂}堿土（pH 8.2）。試驗(yàn)于2019 年4 月進(jìn)行，每個(gè)試驗(yàn)處理30 株櫻花苗木，栽培管理?xiàng)l件一致。3 個(gè)試驗(yàn)處理分別為CK（不做任何處理）、JK-XZ8 處理（通過(guò)根部蘸漿法單獨(dú)施用瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8）、K84 處理（按照使用說(shuō)明使用）。

瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 采用200 L 自動(dòng)發(fā)酵罐（TPC-1551T-E3AE，上海百倫公司）發(fā)酵24 h，以25 L 無(wú)菌桶封裝放4 ℃恒溫冷藏室備用，并將市售Agrobacterium radiobacter K84 菌肥作為防效對(duì)照。新栽櫻花幼苗用根部蘸漿法：取母菌液2 L，加水定容10 L 桶中，稀釋5 倍，攪拌混勻，加適當(dāng)土稀釋至呈粘稠狀，做成漿液。將裸根櫻花苗逐一放入桶中浸沒(méi)根部，待表面包裹一層泥漿后取出，放入事先挖好的土穴栽植。

在施菌處理一個(gè)月后，通過(guò)稀釋涂布法用Me?dium D1 選擇培養(yǎng)基測(cè)定不同處理的櫻花根際土壤中病原菌的數(shù)量。并于2019 年11 月櫻花完全落葉之后，進(jìn)行防治效果的測(cè)定，統(tǒng)計(jì)櫻花根癌病發(fā)病情況，即計(jì)算發(fā)病率，并統(tǒng)計(jì)根瘤數(shù)量和大小，分級(jí)（表2）。

表2 櫻花根癌病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)［19］Tab.2 Disease classification standards cherry blossoms crown gall

發(fā)病率=發(fā)病植株/總株數(shù)×100%

病情指數(shù)= 100×∑（各級(jí)病根數(shù)×各級(jí)代表值）/（調(diào)查總根數(shù)×最高級(jí)代表值）

防治效率%=（未處理發(fā)病率-處理后發(fā)病率）/未處理發(fā)病率×100

1.7 櫻花生長(zhǎng)情況測(cè)定

櫻花的株高與地徑使用卷尺和游標(biāo)卡尺進(jìn)行測(cè)量。

株高凈增長(zhǎng)量=完全落葉后株高-施菌前株高

胸徑凈增長(zhǎng)量=完全落葉后胸徑-施菌前胸徑

1.8 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 20 和EXCEL 2016 軟件進(jìn)行處理。數(shù)據(jù)的初步統(tǒng)計(jì)分析使用Excel 進(jìn)行，之后使用SPSS 20 進(jìn)行方差分析與鄧肯多重比較（One-way ANOVA），顯著差異水平P<0.05 用小寫(xiě)字母表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 瓦雷茲芽孢桿菌JK?XZ8 對(duì)根癌土壤桿菌PX?1 的拮抗作用

平板拮抗測(cè)定表明，CK 對(duì)照組在未接入JKXZ8 菌株的情況下培養(yǎng)皿正反都沒(méi)有任何變化（圖1A 和圖1B），而在接有菌株JK-XZ8 的培養(yǎng)皿濾紙片周?chē)忻黠@的透明圈（圖1C 和圖1D），說(shuō)明菌株JK-XZ8 抑制了櫻花根癌土壤桿菌PX-1 的生長(zhǎng)，對(duì)櫻花根癌土壤桿菌PX-1 有拮抗作用。

圖1 瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 拮抗根癌土壤桿菌PX-1Fig.1 B.velezensis JK-XZ8 antagonizes A.tumefaciens PX-1

2.2 瓦雷茲芽孢桿菌JK?XZ8 粗提物對(duì)根癌病菌的拮抗作用

在將菌株JK-XZ8 發(fā)酵3 d 后，通過(guò)酸沉淀的方法提取抑菌粗提物，并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮，最后用Tris-HCl 緩沖液溶解。溶解后的物質(zhì)即為抑菌粗提物。平板拮抗試驗(yàn)表明，相較于CK（圖2A）處理，在濾紙片上接種菌液JK-XZ8，濾紙片周?chē)纬梢志Γ志Υ笮≈睆綖?0～11 mm（圖2B）。在濾紙片上滴加抑菌粗提物，濾紙片周?chē)纬擅黠@的抑菌圈，抑菌圈直徑大小為12～13 mm。證明瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 發(fā)酵濾液的粗提物對(duì)根癌土壤桿菌有較好的拮抗作用，也說(shuō)明生防菌株JK-XZ8 可以產(chǎn)生抑制根癌土壤桿菌PX-1 的物質(zhì)。

圖2 生防菌株JK-XZ8 發(fā)酵濾液拮抗根癌土壤桿菌PX-1Fig.2 B.velezensis JK-XZ8 antagonizes A.tumefaciens PX-1

2.3 瓦雷茲芽孢桿菌JK?XZ8 抑菌物質(zhì)假定合成相關(guān)基因PCR 檢測(cè)

利用8 對(duì)引物，分別對(duì)脂肽類物質(zhì)合成相關(guān)基因和聚酮類化合物合成相關(guān)基因進(jìn)行PCR 檢測(cè)。結(jié)果表明瓦雷茲有芽孢桿菌JK-XZ8 中含有脂肽類化合物合成相關(guān)基因bmyB，ituD，fenD 和聚酮類化合物合成相關(guān)基因PK1，PK2，PK3。此6 個(gè)基因片段與目標(biāo)片段長(zhǎng)度一致（圖3）。對(duì)擴(kuò)增得到的5 個(gè)基因片段進(jìn)行測(cè)序，經(jīng)NCBI 的Blast 比對(duì)分析，其中瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 菌株的bmyB基 因 序 列 與 B. amyloliquefaciens GYL4（KT963041.1）的bmyB 基因的同源性達(dá)到97.41%，JK-XZ8 菌株中的ituD 基因序列與B.amyloliquefaciens V167（CP044360.1）的ItuD 同源性達(dá)到98.97%，JK-XZ8 菌株中的fenD 基因序列 與 B. amyloliquefaciens SYBC H47（KY051734.1）的FenD 同源性達(dá)到95.93%。瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 的PK1、PK2、PK3 基因序列 與B. amyloliquefaciens FZB42（CP000560.2）的PK1（bae）、PK2、PK3（dif）基因的同源性分別達(dá)到97.67%、99.76%和99.62%。

圖3 瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 抑菌物質(zhì)相關(guān)基因PCR 檢測(cè)Fig.3 PCR detection of genes related to bacteriostatic substances of B.velezensis JK-XZ8.

2.4 瓦雷茲芽孢桿菌JK?XZ8 粗提物在不同條件下的抑菌活性穩(wěn)定性

測(cè)定表明（表3），瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 的粗提物在溫度20～100 ℃都有抑菌能力，且溫度在20～80 ℃其抑菌能力差異不顯著。當(dāng)pH 為7 時(shí)，粗提物的抑菌能力是最好的，過(guò)酸過(guò)堿都會(huì)降低粗提物抑菌能力。用蛋白酶K 處理該抑菌粗提物后，平板拮抗測(cè)定證明其抑菌能力依然存在。通過(guò)紫外照射該菌株的抑菌粗提物3 h 后，并未破壞該物質(zhì)的抑菌能力，但是在照射24 h 之后，抑菌能力消失。這些結(jié)果一定程度上說(shuō)明菌株JK-XZ8產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)性質(zhì)比較穩(wěn)定，且非蛋白類物質(zhì)。

表3 瓦雷茲芽孢桿菌JK?XZ8 抑菌粗提物的穩(wěn)定性測(cè)定Tab.3 Stability determination of crude extracts of B.velezensis JK?XZ8

2.5 瓦雷茲芽孢桿菌JK?XZ8 對(duì)櫻花根癌病的

2.6 田間生防效果及櫻花生長(zhǎng)狀況

田間櫻花苗木施菌處理一個(gè)月后，通過(guò)稀釋涂布（即利用Medium D1 篩選培養(yǎng)基）和平板計(jì)數(shù)對(duì)不同處理的櫻花根際土壤中根癌土壤桿菌數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。結(jié)果表明與CK 處理相比，施用生防菌JK-XZ8 的櫻花根際病原菌數(shù)量明顯下降，然而施用生物菌肥K84 的病原菌數(shù)量與CK 處理無(wú)差異（圖4）。

圖4 不同處理下櫻花根際土壤中病原菌數(shù)量Fig.4 The number of pathogens in the rhizosphere soil of cherry blossoms under different treatments

施用生防菌7 個(gè)月后對(duì)野外櫻花的生長(zhǎng)和發(fā)病情況進(jìn)行調(diào)查（表4），結(jié)果表明施用瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 可幫助櫻花苗木更好的在鹽堿地上存活（存活率100%），同時(shí)對(duì)櫻花根癌病的防治效果達(dá)到50%。作為對(duì)照的K84 菌肥櫻花苗木的存活率為58.75%，對(duì)櫻花根癌病的防治效果為25%。此外施用K84 菌肥的櫻花根瘤平均直徑為37.06 mm，明顯高于施用瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8的平均根瘤直徑（24.34 mm）。病情指數(shù)作為綜合考量病害的發(fā)生程度，施用K84 的櫻花苗木病情指數(shù)為60，也明顯高于施用瓦雷茲芽孢桿菌的櫻花處理（40）。說(shuō)明瓦雷茲芽孢桿菌是一株可用于防治櫻花根癌病的潛力菌株。

通過(guò)對(duì)櫻花苗木株高胸徑的測(cè)量，結(jié)果表明不同處理的櫻花幼苗之間無(wú)論是其株高凈增長(zhǎng)率還是胸徑凈增長(zhǎng)率之間均與CK 處理無(wú)明顯差異。各處理株高凈增長(zhǎng)量均在6～8 cm 之間，胸徑凈增長(zhǎng)量均在3.5～4.5 mm 之間。

圖5 不同處理下櫻花苗木生長(zhǎng)情況Fig.5 Growth of cherry saplings under different treat?ments

3 結(jié)論與討論

表4 瓦雷茲芽孢桿菌JK?XZ8 對(duì)櫻花根癌病的野外防治效果和櫻花存活率Tab.4 Control effect and survival rate of cherry blossom crown gall disease by B.velezensis JK?XZ8 in field trials

瓦雷茲芽孢桿菌作為一種環(huán)境友好且有較好抑菌能力的菌株，受到廣泛研究。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道芽孢桿菌發(fā)揮的生物防治作用是由于不同的機(jī)制所致：除了對(duì)宿主植物有良好的促生作用和刺激植物誘導(dǎo)抗性之外，產(chǎn)生抑菌物質(zhì)也是很重要的［13］。目前已知芽孢桿菌可以產(chǎn)多種抗菌物質(zhì)，按合成途徑不同，可分為核糖體肽和非核糖體肽。核糖體肽主要包括細(xì)菌素與類細(xì)菌素、酶類和活性蛋白等物質(zhì)，非核糖體肽主要包括脂肽類、多肽類和其他類物質(zhì)［20］。本研究提取了瓦雷茲芽孢桿菌的抑菌粗提物，經(jīng)不同溫度測(cè)定表明，該抑菌粗提物在20～100 ℃間，對(duì)根癌土壤桿菌的抑制能力一直存在，在20～80 ℃之間，抑菌能力無(wú)明顯差異，當(dāng)溫度達(dá)100℃，抑菌能力才有明顯下降。在pH 為2～12 之間該抑菌粗提物均有抑菌能力，當(dāng)pH 在6～9 之間時(shí)，抑菌能力無(wú)明顯差異；當(dāng)pH為2 或12 時(shí)，該粗提物抑菌能力出現(xiàn)明顯下降。除此之外該抑菌粗提物不會(huì)被蛋白酶K 分解，說(shuō)明該抑菌物質(zhì)性質(zhì)穩(wěn)定，且為非蛋白類物質(zhì)。說(shuō)明該菌株的環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)，在較寬泛的自然環(huán)境條件下抑菌物質(zhì)能發(fā)揮一定作用。同時(shí)有研究表明，脂肽類物質(zhì)是解淀粉芽孢桿菌中結(jié)構(gòu)穩(wěn)定且具有抑菌能力的物質(zhì)。本研究對(duì)瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 的脂肽類抑菌物質(zhì)基因進(jìn)行了PCR 驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)菌株JK-XZ8 中含有bmyB 基因。2017 年Frikha-Gargouri 等研究認(rèn)為基因bmyB 可以作為篩選拮抗根癌病有效芽孢桿菌的因子［21］，因此可以認(rèn)為瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 是一株有效的拮抗櫻花根癌病的菌株。本研究PCR 檢測(cè)到菌株JK-XZ8 還含有ituD 和fenD 基因，他們分別是合成伊枯草素（Iturin）和泛革素（fengycin）的基因，說(shuō)明抑菌粗提物中可能含有伊枯草素（Iturin）和泛革素（Fengycin），這與2015 年Ben 的研究結(jié)果一致［16］。2017 年Frikha-Gargouri 等還研究發(fā)現(xiàn)解淀粉芽孢桿菌39b 在體外實(shí)驗(yàn)中阻止植物致病性根癌土壤桿菌的生長(zhǎng)，并通過(guò)質(zhì)譜法鑒定物質(zhì)為表面活性素［22］。然而在本研究中并未檢測(cè)到表面活性素合成的必須基因sfp［17］。說(shuō)明瓦雷茲芽孢桿菌JKXZ8 并非產(chǎn)生表面活性素來(lái)抑制根癌土壤桿菌。本研究中還檢測(cè)到聚酮類化合物的合成基因，即合成多烯抗生素difficidin 和oxydifficidin 的PK1 和PK3 基因，以及控制合成一種弱的未知聚酮化合物 的PK2 基 因［18］。Chen 等 研 究 發(fā) 現(xiàn) 解 淀 粉 芽 孢桿菌FZB42 產(chǎn)生的聚酮化合物對(duì)由歐文氏菌（Er?winia amylovora）引起的梨火疫病具有防治效果［23］。因此我們推測(cè)瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 抑菌粗提物中不僅含有脂肽類物質(zhì)，還含有聚酮類物質(zhì)，是一株可能通過(guò)產(chǎn)生上述物質(zhì)來(lái)有效防治根癌病的生防菌株。

芽孢桿菌常作為林業(yè)和農(nóng)業(yè)應(yīng)用上的生物防控劑和植物生長(zhǎng)促生劑。如李青等［24］研究的B.velezensis SQR9，該菌株可以形成強(qiáng)健的生物膜，具有較強(qiáng)的根系定殖能力，常作為農(nóng)作物生產(chǎn)中的生物肥料和生物防治劑，可以有效促進(jìn)植物生長(zhǎng)和抑制土傳病害。張俊祥等研究的解淀粉芽孢桿菌GB1，將其應(yīng)用于防治蘋(píng)果腐爛?。╒alsa ma?li），經(jīng)田間試驗(yàn)證明其控制蘋(píng)果腐爛病的效果髙達(dá)90%［25］。譚石勇將解淀粉芽孢桿菌T5 應(yīng)用于防治番茄青枯病（Ralstonia solanacearum），盆栽實(shí)驗(yàn)證明其防控效率達(dá)到了74.35%［26］。櫻花根癌病作為一種細(xì)菌性的土傳病害，在我國(guó)危害日益嚴(yán)重，本研究將瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 應(yīng)用于徐州沛縣櫻花圃地的鹽堿土壤中，結(jié)果表明其對(duì)于大田櫻花根癌病的防治效果可達(dá)50%，防效優(yōu)于市場(chǎng)上應(yīng)用的用于防治根癌病的K84 菌肥的防效（25%）。施用瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 還提高了櫻花幼苗的存活率（100%），明顯高于施用K84 菌肥和CK。說(shuō)明瓦雷茲芽孢桿菌JK-XZ8 較K84 菌肥更適用于鹽堿地上櫻花根癌病的防治，且對(duì)櫻花亦有一定的促生長(zhǎng)作用，是一株良好的具有防治櫻花根癌病的生防菌株。