調(diào)心通督法對血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及海馬區(qū)bFGF表達(dá)的影響

高音來　陳芯儀　何灝龍　鄭慧娥　朱鈺　譚濤　陳楚淘　田浩梅

〔摘要〕 目的 探討調(diào)心通督法對血管性癡呆（vascular dementia，VD）大鼠學(xué)習(xí)記憶功能及海馬堿性成纖維細(xì)胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）表達(dá)的影響。方法 SD大鼠行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)篩選出特異性大鼠后隨機(jī)分出6只假手術(shù)組，其余大鼠采用雙側(cè)頸總動脈永久性結(jié)扎法（2-VO）復(fù)制VD大鼠模型，造模后再按隨機(jī)數(shù)字表法分為模型組、西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組，每組6只。于造模成功后及治療后分別采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)觀察大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，Western Blot法檢測雙側(cè)海馬bFGF蛋白表達(dá)。結(jié)果 造模后，與假手術(shù)組比較，各組大鼠平均逃避潛伏期時(shí)間明顯增加，且找到平臺次數(shù)明顯減少（P<0.01）。治療后，與模型組相比，西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組平均逃避潛伏期明顯縮短（P<0.01），穿越原平臺次數(shù)增加（P<0.05）;與西藥對照組比較，調(diào)心通督法針刺組差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與假手術(shù)組比較，各組大鼠海馬區(qū)bFGF表達(dá)均升高（P<0.01）;與模型組比較，西藥對照組及調(diào)心通督法針刺組海馬bFGF表達(dá)均明顯增高（P<0.05）。結(jié)論 調(diào)心通督法能明顯改善VD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力、上調(diào)海馬bFGF表達(dá)，可能是其重要作用機(jī)制之一。

〔關(guān)鍵詞〕 血管性癡呆;調(diào)心通督法;堿性成纖維細(xì)胞生長因子;學(xué)習(xí)記憶

〔中圖分類號〕R246.6? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ?〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2020.01.019

〔Abstract〕 Objective To explore the effects of Tiaoxin Tongdu method on learning and memory function and basic fibroblast growth factor （bFGF） expression in hippocampus of vascular dementia （VD） rats. Methods SD rats were selected by Morris water maze test and then randomly divided into 6 sham operation groups. VD rat model was established by permanent ligation of bilateral common carotid artery （2-VO）. The other rats were divided into a model group， a western medicine control group and Tiaoxin Tongdu method acupuncture group according to the random number table method， with 6 rats in each group. Morris water maze test was used to observe the learning and memory ability of rats after successful modeling and after treatment. Western Blot method was used to detect the expression of bFGF protein in bilateral hippocampus. Results Compared with sham operation groups， the average escape latency time of rats in each group increased significantly， and the number of platforms found decreased significantly （P<0.01）. Compared with the model group， the average escape latency was significantly shortened （P<0.01） and the number of times crossing the original platform was increased （P<0.05） in the western medicine control group and the Tiaoxin Tongdu method acupuncture group. Compared with the western medicine control group， the difference of the Tiaoxin Tongdu method acupuncture group was not statistically significant （P>0.05）. Compared with the sham operation groups， the expression of bFGF in hippocampus of each group was increased （P<0.01）. Compared with the model group， the expression of bFGF in hippocampus of the western medicine control group and the Tiaoxin Tongdu method acupuncture group increased significantly （P<0.05）. Conclusion Tiaoxin Tongdu method can significantly improve the learning and memory ability of VD rats， and up-regulation of bFGF expression in hippocampus may be one of its important mechanisms.

〔Keywords〕 vascular dementia; Tiaoxin Tongdu method; basic fibroblast growth factor; learning and memory

血管性癡呆（vascular dementia，VD）是主要由長期慢性低灌注的顱內(nèi)血管疾病所致的記憶障礙綜合征。隨老齡化社會的到來，血管性癡呆的發(fā)病率逐年遞增[1]。該病嚴(yán)重影響著患者自身、家庭乃至整個(gè)社會，預(yù)防及醫(yī)治VD已被世界衛(wèi)生組織列為21世紀(jì)重點(diǎn)科研項(xiàng)目之一[2-3]。前期臨床研究[4]表明由名老中醫(yī)嚴(yán)潔教授提出以心包經(jīng)和督脈為主的“調(diào)心通督”法能提高VD患者簡易智力狀態(tài)檢查（mini-

mental state examination，MMSE）評分，改善其自理能力，提示慢性低灌注腦組織的保護(hù)、修復(fù)過程與調(diào)心通督法相關(guān)，但其作用機(jī)制尚待探討。

堿性成纖維細(xì)胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）是一種能作用于體內(nèi)及體外的多效性血管生長因子[5-6]，作為主要的血管生長因子之一，對促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂、血管生成、神經(jīng)修復(fù)、創(chuàng)面愈合及內(nèi)皮細(xì)胞新生具有不可替代的調(diào)節(jié)作用[7-9]。陳倩倩[10]、唐強(qiáng)[11]、王亞軍等[12]均觀察到針刺可通過上調(diào)bFGF的表達(dá)來促進(jìn)腦缺血區(qū)的血管新生。因此，本實(shí)驗(yàn)研究將從重要的血管新生因子bFGF著手，觀察調(diào)心通督法對VD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改變及bFGF蛋白的表達(dá)情況，探討調(diào)心通督法醫(yī)治VD的作用機(jī)制，為今后針灸治療VD提供充分的理論和實(shí)驗(yàn)支持。

1 材料與方法

1.1? 實(shí)驗(yàn)動物及分組

45只SPF級雄性SD大鼠，體質(zhì)量控制在200～250 g，購自湖南中醫(yī)藥大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心，許可證號：SCXK（湘）2016-0002，合格證號：43004700057075。將大鼠置于SPF級動物實(shí)驗(yàn)房飼養(yǎng)，保持室溫20～22 ℃，濕度50%～60%，飲食、飲水自由，喂養(yǎng)及治療期間隔天清洗籠盒及更換墊料，水迷宮實(shí)驗(yàn)期間每天清洗并更換。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)后篩選出特異性大鼠，保留43只，按隨機(jī)數(shù)表法選出6只為假手術(shù)組，其余大鼠造模后行水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測，篩選出造模成功的VD大鼠18只，分為模型組、西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組，6只/組。實(shí)驗(yàn)過程中大鼠死亡時(shí)，剔除并補(bǔ)錄，統(tǒng)一為發(fā)現(xiàn)情況的第2日上午采取簽盒抽簽的方式進(jìn)行補(bǔ)錄。本實(shí)驗(yàn)大鼠死亡率約為50%。實(shí)驗(yàn)動物處理的倫理學(xué)依據(jù)參照中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部發(fā)布的《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動物的指導(dǎo)性意見》。

1.2? 主要試劑與儀器

10%水合三氯乙醛（長沙-維爾生物科技有限公司），絡(luò)合碘（長沙-歐潤消毒科技有限公司），注射用青霉素鈉（江西-科達(dá)動物藥業(yè)有限公司），ABclonal抗體（北京-鼎國生物技術(shù)有限公司），安迪牌0.30 mm×25 mm無菌針灸針（貴州-安迪藥械有限公司），Morris水迷宮視頻分析系統(tǒng)（法國View-point公司），電子天平（杭州-恒儀儀表科技有限公司）。

1.3? 動物模型復(fù)制與評定標(biāo)準(zhǔn)

所有大鼠術(shù)前12 h禁食，不禁水。除假手術(shù)組外，其余各組采用雙血管阻斷法[13]（2-VO）模擬VD模型，用10%的水合三氯乙醛（0.3 mL/100 g）將大鼠麻醉后固定于鼠板上，待備皮、消毒后沿頸部中央前方逐層分離皮膚及皮下組織，依次暴露雙側(cè)頸總動脈，以4～0號線分別于近心端與遠(yuǎn)心端結(jié)扎并從中間剪斷，傷口內(nèi)撒入適量青霉素，以3～0號線縫合皮膚。注意手法柔和、無菌操作。假手術(shù)組操作方法一致，但不結(jié)扎剪斷雙側(cè)頸總動脈。

模型成功的判斷標(biāo)準(zhǔn)[14]：造模2周后行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，以假手術(shù)組作參照，計(jì)算各造模組大鼠逃避潛伏期分別與假手術(shù)組逃避潛伏期平均值之差占該鼠平均逃避潛伏期的比值，若該值大于20%，則為血管性癡呆模型。

1.4? 各組干預(yù)方法

假手術(shù)組和模型組：只捆綁，不給藥，不針刺。調(diào)心通督針刺組：根據(jù)《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》及華興邦《實(shí)驗(yàn)動物圖譜》，選取“命門”“大椎”直刺5 mm，“風(fēng)府”向下斜刺5 mm，“百會”“神庭”平刺10 mm，“水溝”向鼻中隔方向斜刺2 mm，“內(nèi)關(guān)”直刺5 mm，“大陵”“勞宮”直刺2 mm;不給藥，捆綁后針刺，采取平補(bǔ)平瀉手法，留針30 min。西藥對照組：予尼莫地平（0.0625 g/kg）與蒸餾水混合至0.01 g/mL灌胃，給藥后捆綁，不針刺。各組干預(yù)1次/d，持續(xù)2周。

1.5? Morris水迷宮行為學(xué)檢測

Morris水迷宮[15]外形為一圓形水池，分為4個(gè)象限，任一象限中央可放置直徑10 cm低于水面2 cm的無色透明平臺。前5天為定位航行試驗(yàn)：每天固定時(shí)段訓(xùn)練4次，設(shè)定時(shí)限為120 s，將大鼠四肢完全站上平臺耗時(shí)，記為“逃避潛伏期”。前2天作為大鼠適應(yīng)期，不計(jì)入成績，最終以第3天到第5天平均耗時(shí)作為其有效成績。第6天為空間探索試驗(yàn)：撤除小平臺，任選同一象限將大鼠放入水中，測出120 s內(nèi)大鼠經(jīng)過平臺區(qū)域次數(shù)。

1.6? 腦組織取材及指標(biāo)檢測

各組大鼠先以10%的水合三氯乙醛（0.3 mL/100 g）進(jìn)行腹腔注射麻醉后迅速斷頭取腦，再將雙側(cè)海馬分離放入標(biāo)記好編號的EP管中，置于干冰箱中低溫保存，隨后移至-80 ℃冰柜凍存，采取Western Blot檢測法進(jìn)行樣品制備。

Western Blot法檢測海馬中bFGF蛋白表達(dá)：按比例將海馬組織加入裂解液，提取海馬總蛋白。進(jìn)行蛋白定量取上清液用BCA蛋白定量試劑盒，計(jì)算出蛋白濃度。采用10%分離膠和5%濃縮膠行SDS-PAGE電泳，NC膜轉(zhuǎn)移，轉(zhuǎn)膜后在室溫?fù)u晃閉存1 h，之后加入一抗（兔多抗），4 ℃孵育一宿，TBST洗膜，5 min×4次;將膜轉(zhuǎn)入二抗（兔多抗），室溫孵育1 h，TBST洗膜，5 min×5次;用化學(xué)發(fā)光法（ECL）顯影，掃描、存檔，Image-J軟件測出各條帶灰度值進(jìn)行分析。

1.7? 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，對所有數(shù)據(jù)均使用“x±s”表示。水迷宮實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用重復(fù)測量方差分析，多組間比較可用單因素方差分析（One-way ANOVA），以P<0.05作為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1? 定位航行實(shí)驗(yàn)-逃避潛伏期時(shí)長

組間比較：造模前，各組大鼠平均逃避潛伏期差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。造模后，與假手術(shù)組比較，各組大鼠平均逃避潛伏期時(shí)間明顯增加（P<0.01）。治療后，與模型組相比，西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組平均逃避潛伏期明顯縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）;與西藥對照組比較，調(diào)心通督法針刺組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。組內(nèi)比較：假手術(shù)組造模前、造模后及治療后兩兩比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與造模前比較，造模后與治療后模型組平均逃避潛伏期時(shí)間明顯增加（P<0.01）;與造模后比較，治療后模型組平均逃避潛伏期時(shí)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與造模前比較，造模后西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組平均逃避潛伏期時(shí)間明顯增加（P<0.01），治療后西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組平均逃避潛伏期時(shí)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;與造模后比較，西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組平均逃避潛伏期縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見圖1、表1。2.2? 空間探索實(shí)驗(yàn)-穿越平臺次數(shù)

組間比較：造模前，各組大鼠穿越平臺次數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。造模后，與假手術(shù)組比較，各組大鼠穿越原平臺次數(shù)明顯減少（P<0.01）。治療后，與模型組相比，西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組穿越原平臺次數(shù)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與西藥對照組比較，調(diào)心通督法針刺組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。組內(nèi)比較：假手術(shù)組造模前、造模后及治療后兩兩比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與造模前比較，造模后與治療后模型組穿越原平臺次數(shù)明顯減少（P<0.01）;與造模后比較，治療后模型組穿越原平臺次數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與造模前比較，造模后西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組穿越原平臺次數(shù)明顯減少（P<0.05），治療后西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組穿越原平臺次數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;與造模后比較，西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組穿越原平臺次數(shù)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3? 各組大鼠海馬區(qū)bFGF蛋白的表達(dá)情況

與假手術(shù)組比較，造模組大鼠海馬區(qū)bFGF蛋白表達(dá)明顯增加（P<0.01）;與模型組比較，西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組海馬bFGF蛋白表達(dá)均明顯增高（P<0.05或P<0.01）;西藥對照組與調(diào)心通督針刺組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見圖2、表3。

3 討論

中醫(yī)古籍中血管性癡呆多屬于“癡呆”“呆病”的范疇，其病位在腦，頭為“清陽之腑”，臟腑之精血清氣皆上注入腦，而督脈的循行與其密切相關(guān)。心為“君主之官”，因心包絡(luò)作為脂膜護(hù)衛(wèi)心于外，說明心包經(jīng)協(xié)助心經(jīng)完成心主血脈、主神明之功。因此心包代心受邪，故治療以心包經(jīng)與督脈為主?！罢{(diào)心通督”法為名老中醫(yī)嚴(yán)潔教授多年來的臨床和科研實(shí)踐總結(jié)，以督脈上“百會”“神庭”“大椎”“風(fēng)府”“水溝”“命門”，配以心包經(jīng)上“內(nèi)關(guān)”“大陵”“勞宮”等穴，達(dá)到醒腦開竅、清利頭目、平衡陰陽等作用，其臨床療效顯著。

本研究實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，造模后與假手術(shù)組比較，各組大鼠平均逃避潛伏期時(shí)間明顯增加，且找到平臺次數(shù)明顯減少，說明造模組耗時(shí)長，學(xué)習(xí)記憶能力下降，提示VD大鼠模型制備成功。治療后與模型組相比，藥物及針刺組平均逃避潛伏期明顯縮短，穿越原平臺次數(shù)增加，與西藥對照組比較，調(diào)心通督法針刺組差異不顯著，提示西藥、針刺均能明顯改善VD大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，且治療效果旗鼓相當(dāng)。組內(nèi)間與造模后比較，治療后調(diào)心通督法針刺組平均逃避潛伏期縮短，穿越原平臺次數(shù)增加，說明調(diào)心通督法治療VD大鼠療效肯定。bFGF是最為有效的血管生長因子之一，可增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞黏附遷移、分裂增殖、促進(jìn)血管新生。大量實(shí)驗(yàn)研究表明[16-17]bFGF是血管發(fā)生的啟動因子，能修復(fù)毛細(xì)血管，使血管得以再生或重塑，并能刺激VEGF的增殖，上調(diào)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子發(fā)揮作用[18-20]，共同促進(jìn)血管生成。與假手術(shù)組比較，造模組大鼠海馬區(qū)bFGF蛋白表達(dá)明顯增加;與模型組比較，西藥對照組、調(diào)心通督法針刺組海馬bFGF蛋白表達(dá)均明顯增高，有顯著性差異，但兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本實(shí)驗(yàn)說明通調(diào)心通督法可促進(jìn)VD大鼠海馬區(qū)bFGF蛋白的表達(dá)，從而實(shí)現(xiàn)血管的修復(fù)與再生，提高其學(xué)習(xí)記憶能力。

綜上所述，調(diào)心通督法針刺VD大鼠可以改善其學(xué)習(xí)記憶能力可能與增加海馬區(qū)bFGF蛋白表達(dá)有關(guān)。它作為具有中醫(yī)特色的針刺療法，不僅得到驗(yàn)證其臨床療效好，且相比目前其它治療其不良反應(yīng)小、安全性高，具備多方面臨床治療優(yōu)勢。本實(shí)驗(yàn)從動物實(shí)驗(yàn)研究調(diào)心通督法治療VD的作用機(jī)制，以便更好的為臨床針刺治療VD提供客觀的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，值得加快推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

[1] MANES F. The huge burden of dementia in Latin America[J]. The Lancet Neurology，2016，15（1）：29.

[2] 任晨斌，伍大華，張發(fā)友，等.滋腎活血方對血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力和海馬形態(tài)學(xué)的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，37（10）：1082-1085.

[3] 李? 濤，田桂杰，韓景獻(xiàn).血管性癡呆的中西醫(yī)臨床研究現(xiàn)狀與展望[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血病雜志，2008，6（3）：333-336.

[4] 譚? 濤，任? 珍，覃佐愛，等.調(diào)心通督法治療血管性癡呆的臨床研究[J].中醫(yī)藥報(bào)，2017，23（4）：66-68.

[5] 邊雙義，孟藝哲，馮建偉.丹龍醒腦湯對MCAO模型大鼠血管新生及bFGF蛋白、Ang-1蛋白表達(dá)的影響[J].四川中醫(yī)，2017，35（5）：69-71.

[6] 沈丹萍，戈東輝，陳顯達(dá)，等.bFGF通過促進(jìn)心臟血管新生改善心肌梗死后小鼠心臟重構(gòu)[J].中國病理生理雜志，2018，34（1）：47-51.

[7] LIU Q， HUANG Y， LAN Y， et al. Acceleration of skin regeneration in full-thickness burns by incorporation of bFGF-loaded alginate microspheres into a CMCS-PVA hydrogel[J]. Journal of Tissue Engineering & Regenerative Medicine，2017，11（5）：1562.

[8] RUI L， JIANFENG M， YANGING W， et al. Dual Delivery of NGF and bFGF Coacervater Ameliorates Diabetic Peripheral Neuropathy via Inhibitin Schwann Cells Apoptosis[J]. International Journal of Biological Sciences，2017，13（5）：640-651.

[9] ZBINDEN A， BROWNE S， ALTIOK E I， et al. Multivalent conjugates of basic fibroblast growth factor enhance in vitro proliferation and migration of endothelial cells[J]. Biomaterials Science，2018， 6（5）：1076-1083.

[10] 陳倩倩.針灸通督法對缺血性腦卒中患者BFGF、VEGF的干預(yù)作用研究[D].合肥：安徽中醫(yī)藥大學(xué)，2014.

[11] 唐? 強(qiáng)，姜云飛，朱路文，等.針康法對局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)功能缺損及缺血區(qū)堿性成纖維細(xì)胞生長因子、血管抑制素蛋白表達(dá)的影響[J].中國康復(fù)理論與實(shí)踐，2015，21（10）：1151-1155.

[12] 王亞軍，方曉麗，黃春換，等.子午流注納甲法對局灶性腦缺血模型大鼠腦區(qū)NSE、NGF、bFGF的影響[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2017，23（1）：63-67.

[13] 譚? 潔，韓國棟，張? 泓，等.改良大鼠雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎方式建立血管性癡呆模型的評價(jià)研究[J].中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志，2017，32（3）：264-268.

[14] 鄭先振，馬光瑜，林玨龍.納洛酮對血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶和海馬神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)鈣離子的影響[J].中國新藥與臨床雜志，2005，24（3）：185-188.

[15] 方? 松，余化霖.Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中海馬相關(guān)空間學(xué)習(xí)記憶的研究進(jìn)展[J].國際病理科學(xué)與臨床雜志，2010，30（4）：321-326.

[16] SALEHI A， ZHANG J H. OBENAUS A. Response of the cerebral vasculature following traumatic braininjury[J]. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism， 2017，37（7）：2320-2339.

[17] WANG Z G， CHENG Y， YU X C， et al. bFGF protects against blood-brain barrier damage throughjunction protein regulation via pi3k-akt-rac1 pathway following traumatic brain injury[J]. Molecylar Neurobiology， 2015，53（10）：1-14.

[18] LIU Q， HUANG Y， LAN Y， et al. Acceleration of skin regeneration in full-thickness burns by incorporation of bFGF-loaded alginate microspheres into a CMCS-PVA hydrogel[J]. Journal of Tissue Engineering & Regenerative Medicine， 2017， 11（5）：1562-1573.

[19] LI W， LAN Y， GUO R， et al. In vitro and in vivo evaluation of a novel collagen/cellulose nanocrystals scaffold for achieving the sustained release of basic fibroblast growth factor[J]. Journal of Biomaterials Applications，2015，29（6）：882-893.

[20] ZHANG X， ZHU D， WEI L， et al. OSM Enhances Angiogenesis and Improves Cardiac Function after Myocardia Infarction[J].Biomed Research International， 2015，2015：317905.

（本文編輯? 匡靜之）