兒童細(xì)菌性腹瀉的病原微生物檢驗(yàn)分析

阮芬

【摘要】目的：檢驗(yàn)兒童細(xì)菌性腹瀉的病原微生物，探析引起腹瀉的菌種。方法：收集腹瀉患兒的糞便標(biāo)本115份，經(jīng)過病原微生物檢驗(yàn)分析致病菌屬。結(jié)果：在115例細(xì)菌性腹瀉患兒檢驗(yàn)中，共檢出病原菌102株，檢出率為88.70%。102株病原菌中志賀菌檢出率最多，為60.79%，弧菌屬、氣單胞菌與其它菌株檢出率依次減少，分別為21.57%、11.76%、5.88%。藥敏試驗(yàn)顯示，所有菌株對頭孢哌酮的耐藥性最強(qiáng)，其次為氨芐西林，再次為頭孢噻肟。結(jié)論：志賀菌為兒童細(xì)菌性腹瀉的主要病原菌，其次為弧菌屬、氣單胞菌等，藥敏檢測顯示這些菌種的耐藥性都較強(qiáng)。

【關(guān)鍵詞】病原微生物;志賀菌;細(xì)菌性腹瀉;弧菌屬

【中圖分類號】R246.4 ? 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A ? ?【文章編號】2107-2306（2020）03-256-02

小兒腹瀉屬于腸道傳染性疾病，病毒、細(xì)菌感染是導(dǎo)致腹瀉的主要原因。相關(guān)報(bào)道指出，兒童細(xì)菌性腹瀉呈現(xiàn)出全球性趨勢，發(fā)病后迅速向周圍擴(kuò)散，暴發(fā)流[1]。腸胃癥狀是細(xì)菌性腹瀉患兒的常見癥狀，細(xì)菌感染程度不同癥狀輕重、表現(xiàn)形式也存在明顯差異。誘發(fā)腹瀉的細(xì)菌常見于志賀菌、大腸桿菌、弧菌屬等，細(xì)菌類別不同加之外部環(huán)境影響，細(xì)菌潛伏期與爆發(fā)期存有較大差異，通?；純杭毙云鸩≌级鄶?shù)，緩慢起病占少數(shù)。感染性細(xì)菌性腹瀉是臨床主要類型，少數(shù)患兒是非感染性的，如炎性、解剖性等[2]。為控制腹瀉患者病情，有必要對感染的病原微生物類型及特點(diǎn)進(jìn)行分析，進(jìn)而制定治療方案，提高殺菌效果。因此本研究選取115例細(xì)菌性腹瀉患兒，進(jìn)行病原微生物檢驗(yàn)分析，詳細(xì)如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集腹瀉患兒的糞便標(biāo)本共115例，標(biāo)本收集時間：2018年3月-2019年3月。所有患兒中男患兒、女患兒各58例、57例，年齡最大為6歲，最小3個月，平均（3.5±0.5）歲，病程2～6天，平均（2.5±0.5）天。所有患兒均符合細(xì)菌性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)，以發(fā)熱、腹瀉、嘔吐為主要癥狀。本次研究提前上報(bào)倫理委員會，審批通過。

診斷標(biāo)準(zhǔn)：患兒表現(xiàn)為腹痛、發(fā)熱、膿血、黏液便等細(xì)菌性腹瀉的典型癥狀;糞便鏡檢發(fā)現(xiàn)不超過10個白細(xì)胞數(shù)目。

納入標(biāo)準(zhǔn)：患兒家長對本次研究知情同意，簽署知情同意書;患兒精神尚可，能配合檢查;患兒無腎臟、肝功能不全等合并癥。

排除標(biāo)準(zhǔn)：家長拒絕參與研究;患兒有先天缺陷。

1.2 方法

儀器：合肥恒星細(xì)菌鑒定藥敏分析儀HX-21。試劑：合肥恒星細(xì)菌鑒定藥敏分析試劑板

檢驗(yàn)方法：（1）病原菌檢驗(yàn)：取糞便標(biāo)本后立即涂片染色，進(jìn)行鏡檢。鏡檢的同時進(jìn)

行細(xì)菌菌落培養(yǎng)，取SS瓊脂平板培養(yǎng)基，保持35℃恒溫持續(xù)培養(yǎng)細(xì)菌20h，選取培養(yǎng)基上可疑菌落，對菌落實(shí)施生化反應(yīng)，同時進(jìn)行血清凝集試驗(yàn)。通過上述操作對病原菌分型，記錄志賀菌、弧菌屬、氣單胞菌等菌株檢出率。檢驗(yàn)儀器：合肥恒星細(xì)菌鑒定藥敏分析儀HX-21。（2）藥敏試驗(yàn)：分別取臨床常用藥物氨芐西林、頭孢哌酮與頭孢噻肟適量，將藥物與細(xì)菌放在同一培養(yǎng)基上培養(yǎng)，持續(xù)培養(yǎng)20h，保持35℃溫度恒定，測量抑菌圈直徑，最后依據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對細(xì)菌耐藥性進(jìn)行分析。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）統(tǒng)計(jì)各菌屬的占比情況，包括志賀菌、弧菌屬、氣單胞菌、其他菌株。

（2）記錄各類細(xì)菌對頭孢哌酮、氨芐西林和頭孢噻肟的耐藥性情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

SPSS21.0分析，t檢驗(yàn)表示計(jì)量資料、x2檢驗(yàn)表示計(jì)數(shù)資料。P<0.05為差異明顯。

2 結(jié)果

2.1致病菌屬占比情況

在115例細(xì)菌性腹瀉患兒檢驗(yàn)中，共檢出病原菌102株，檢出率為88.70%。102株病原菌中志賀菌檢出率最多，為60.79%，弧菌屬、氣單胞菌與其它菌株檢出率依次減少，分別為21.57%、11.76%、5.88%。見表1。

2.2耐藥性分析

藥敏試驗(yàn)顯示，所有菌株對頭孢哌酮的耐藥性最強(qiáng)，其次為氨芐西林，再次為頭孢噻肟。見表2。

3 討論

兒童是急性腹瀉的易感人群，腹瀉發(fā)生后需及時予以對癥治療，否則會危及患兒生命。細(xì)菌感染是導(dǎo)致急性腹瀉的主要原因，此外病毒、真菌等感染也會誘發(fā)腹瀉。為進(jìn)一步探討細(xì)菌感染分型進(jìn)行本次研究，結(jié)果顯示志賀菌檢出率最多，為60.79%，其它菌屬弧菌屬與氣單胞菌占比較少，與其它菌屬檢出率相比，志賀菌檢出率高。同時對檢出菌屬進(jìn)行藥敏檢測試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)所有菌屬對頭孢哌酮的耐藥性最強(qiáng)，其次是氨芐西林和頭孢噻肟，這一檢驗(yàn)結(jié)果基本和其它研究類似。

志賀菌屬又統(tǒng)稱為痢疾桿菌，宿主以老人、幼兒等免疫力低下的人群。調(diào)查顯示，雞、土豆等生的蔬菜，面制品等極易為志賀菌屬繁殖提供優(yōu)渥條件。志賀菌屬于革蘭染色陰性桿菌，有菌毛但無鞭毛，培養(yǎng)基中志賀菌呈現(xiàn)出半透明菌落，能快速將葡萄糖分解并產(chǎn)生酸，且對培養(yǎng)基的營養(yǎng)要求并不高[3]。此菌屬又分為A、B、C、D四個菌群，在臨床上B菌群即福氏志賀氏菌感染居多，其它菌群感染率較低，菌屬中的K抗原耐熱性較差，在100℃高溫下持續(xù)1小時就能被殺死。此菌屬對理化因素的抵抗力較弱，對酸相當(dāng)敏感，在常溫下志賀菌最多能存活20天，56℃下10分鐘就會死亡。

作為感染性腹瀉的第二大類細(xì)菌，弧菌屬以其形狀短小、彎曲如弧而得名。弧菌屬運(yùn)動活波，性質(zhì)與志賀菌類似，屬于兼性厭氧菌，不凝集弧菌屬感染機(jī)體后會導(dǎo)致腹瀉、霍亂樣疾病等。本次檢驗(yàn)患兒糞便標(biāo)本還檢測出氣單胞菌，人類食用后細(xì)菌會附著在腸粘膜上，進(jìn)而導(dǎo)致腸內(nèi)、腸外感染，甚至誘發(fā)腹瀉?；純喊l(fā)生腹瀉后，臨床上常用氨芐西林、頭孢噻肟及頭孢哌酮進(jìn)行治療，長期用藥后細(xì)菌對藥物產(chǎn)生抵抗作用，即抗藥性，導(dǎo)致藥物治療效果下降，患兒病情反復(fù)[4]。

針對細(xì)菌感染性腹瀉，一方面要做好臨床治療工作，另一方面要加強(qiáng)日常預(yù)防。日常預(yù)防措施包括：保證患兒日常衛(wèi)生，勤洗手，降低患兒接觸到病原體機(jī)率，必須接觸情況下需做好物品消毒。家長多參加關(guān)于細(xì)菌性腹瀉防治的健康講座，學(xué)習(xí)相關(guān)防護(hù)知識，在平時注意防護(hù)。日常飲食規(guī)律，不給孩子吃野，一旦發(fā)現(xiàn)孩子有腹瀉癥狀，立即到醫(yī)院就診，避免耽誤最佳治療時間[5]。臨床治療方面，要加快新藥物研發(fā)，提高細(xì)菌性腹瀉檢測質(zhì)量，保證臨床診斷精準(zhǔn)性。

綜上所述，通過病原微生物檢測得知，志賀菌是引起小兒腹瀉的主要原因，其次為弧菌屬和氣單胞菌。濫用抗生素治療會導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性，因此臨床治療時要合理選擇方案，并叮囑家屬做好患兒日常防護(hù)工作，進(jìn)而防治細(xì)菌性腹瀉的發(fā)生。

參考文獻(xiàn)：

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[5]周林，李靜，徐文健，等.首都兒科研究所附屬兒童醫(yī)院門診感染性腹瀉患兒的細(xì)菌病原學(xué)分析[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2019，42（5）：359-364.