糜子溶磷內(nèi)生真菌的篩選及其鑒定

楊 剛，余仲東，趙世偉,3，郭威震，李 喆

(1.西北農(nóng)林科技大學(xué) 資源環(huán)境學(xué)院,陜西 楊凌 712100;2.西北農(nóng)林科技大學(xué) 林學(xué)院,陜西 楊凌 712100;3.西北農(nóng)林科技大學(xué) 水土保持研究所,陜西 楊凌 712100)

糜子(Panicummiliaceum)最早發(fā)源于中國，相較于其他農(nóng)作物具有更悠久的歷史。經(jīng)過長期的自然選擇和栽培馴化，糜子越來越能夠適應(yīng)干旱、半干旱地區(qū)的貧瘠和干涸，這使得它具有了抗旱、耐貧瘠的優(yōu)點，并且由于它對氮、磷等營養(yǎng)元素的吸收性好而且生育期很短，使它成為了如今干旱、半干旱地區(qū)的主要農(nóng)作物之一,在解決糧食問題的同時，糜子更為干旱、半干旱帶來較為可觀的經(jīng)濟效益，這使它成為了國家和人民重點種植推廣的作物，并成為了我國抗災(zāi)備荒、增產(chǎn)增收必不可卻的農(nóng)作物[13-15]。近年來，由于干旱、半干旱地區(qū)磷肥及一些高濃度復(fù)合肥的大量使用，不僅使得土壤中磷素過剩，利用率低，還導(dǎo)致了一系列的環(huán)境污染問題。小麥、玉米、水稻等大眾農(nóng)作物根際土壤和植株體內(nèi)的溶磷菌已被廣泛篩選和開發(fā)利用，溶磷機理也逐步得到闡明[16]，極大地促進了這些農(nóng)產(chǎn)品的“綠色生產(chǎn)”，而對于糜子內(nèi)生菌的開發(fā)利用目前尚無研究報道。本試驗從產(chǎn)自寧夏回族自治區(qū)和甘肅省的糜子種子中分離、篩選出具有高效溶磷能力的菌株，通過盆栽試驗研究了這些溶磷真菌對糜子苗期生長發(fā)育的影響及其解磷效果，以期為糜子的“綠色生產(chǎn)”和高效栽培提供技術(shù)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

選用產(chǎn)自寧夏回族自治區(qū)(固糜21號、寧糜11號、寧糜14號)和甘肅省(隴糜9號、隴糜13號、隴糜14號)兩地不同品種健康飽滿的糜子種子，于2018年10月采集后裝于自封袋中，在實驗室中4 ℃保存，用于進行快速的分離培養(yǎng)。供試培養(yǎng)基包括：PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200 g,葡糖糖20 g，瓊脂15 g，自來水1 000 ml自然pH值)；NBRIP培養(yǎng)基：葡萄糖10 g，Ca3(PO4)25 g，MgSO4·7H2O 0.25 g，MgCl2·6H2O 5 g，KCl 0.2 g，(NH4)2SO40.1 g,蒸餾水1 000 ml，瓊脂16 g，pH值6.5～7.5，液體培養(yǎng)基不加瓊脂。營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：蛋白胨10 g，牛肉膏3 g，氯化鈉5 g,瓊脂17 g,蒸餾水1 000 ml，pH值為7.2。

1.2 方 法

1.2.1 溶磷真菌的分離 將采自寧夏(固糜21號、寧糜11號、寧糜14號)，甘肅(隴糜9號、隴糜13號、隴糜14號)不同品種健康飽滿的糜子種子在自來水下洗凈后轉(zhuǎn)移至超凈臺。消毒方法參考López-López等[17]的消毒方式并稍加改進。第一輪消毒，1 g種子首先用40 ml自來水沖洗3次，然后用40 ml蒸餾水沖洗3次。清洗后的種子用40 ml 3.5%次氯酸鈉溶液浸泡5 min，然后用50 ml無菌蒸餾水洗滌3次。第2輪消毒，將種子浸泡在40 ml 96%乙醇中5 min，然后用50 ml無菌蒸餾水進行5次徹底清洗。檢查表面消毒，將100 μl最終沖洗水在營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)，在28 ℃下培養(yǎng)4 d，若無任何細菌真菌生長，則表明消毒完成。將表面消毒滅菌后的糜子種子分別接入PDA培養(yǎng)基(規(guī)格：90 mm一次性培養(yǎng)皿)，每個PDA培養(yǎng)皿中均勻放置3粒種子，5次重復(fù)。在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7～12 d，溫度設(shè)置為25 ℃，通過觀察菌落形態(tài)的差異并進行純化，直至得到單一的純菌落。菌落編號后用斜面PDA保存于4 ℃冰箱中備用。

1.2.2 溶磷真菌的篩選 將上述分離純化得到的菌株分別接種于NBRIP固體平板培養(yǎng)基上，26 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)20 d，測定菌落直徑(d)和溶磷圈直徑(D)，并計算D/d，對得到的菌株進行初步篩選。將初步篩選得到的具有溶磷作用的菌株接種于PDA培養(yǎng)基，恒溫培養(yǎng)箱26 ℃擴繁培養(yǎng)10 d；將擴繁后的菌株在超凈工作臺進行無菌操作，取5個直徑5 mm的菌塊接種至盛有50 ml滅菌NBRIP液體培養(yǎng)基的錐形瓶中(錐形瓶規(guī)格：150 ml)，以接種無菌PDA培養(yǎng)基塊為對照(CK)，每個菌株3個重復(fù)，恒溫振蕩儀振蕩培養(yǎng)7 d(27 ℃，120 r/min)，振蕩完畢后用定性濾紙過濾，用pH計測定pH值并采用鉬銻抗比色法測上清液有效磷含量，用UV-1800紫外可見分光光度計在880 nm處測定OD值，計算上清液有效磷含量的溶磷率，結(jié)合溶磷圈大小確定不同菌株對無機磷的溶解能力。

溶磷率=〔(接菌培養(yǎng)基中可溶性磷含量—接培養(yǎng)基的對照組中的可溶性磷含量)/加入的無機磷源的總磷量〕×100%

1.2.3 盆栽試驗 將篩選后的溶磷內(nèi)生菌打碎孢子團，加無菌水制作菌懸液，菌懸液分生孢子濃度1.0×106個/ml，將滅菌后的固糜21號種子，在菌懸液中浸泡24 h后播種，試驗采用石英砂+蛭石(體積比2∶1)的混合滅菌基質(zhì)每盆1.55 kg，將磷酸三鈣以6 g/kg混合施入基質(zhì)(模擬土壤中的無機磷成分)，裝入規(guī)格為內(nèi)徑18.5 cm，外徑21 cm，高11.5 cm，底徑14 cm的塑料花盆內(nèi)。試驗對5種供試溶磷真菌菌液和不加菌液的無菌水(對照)分別設(shè)置4磷素梯度即施加無P,1/5 P,1/2 P,全P Hoagland滅菌營養(yǎng)液(見表1)，共24個處理，每處理3重復(fù)，共72盆。將浸泡后的固糜21號種子進行播種，每盆澆灌稀釋1/2后的全P滅菌Hoagland營養(yǎng)液500 ml后覆膜，出苗一周后去掉薄膜選擇長勢相近的植株間苗(每盆保留10株)并進行磷素控制，各磷素梯度每10 d澆灌滅菌Hoagland營養(yǎng)液500 ml，各菌懸液500 ml。試驗將于2019年5月10日于中國科學(xué)院固原生態(tài)試驗站旱棚內(nèi)進行，于2019年6月20日收獲。

表1 不同磷素(P)梯度Hoagland營養(yǎng)液

1.2.4 測試指標(biāo) 于2019年6月20日用葉綠素測定儀LYS-A型測試糜子SPAD值，用LI-6800便攜式光合儀測試糜子凈光合速率。采集糜子植株測其株高、鮮重，105 ℃下殺青30 min，75 ℃烘干至恒重后測定干重。將植株干樣粉碎后用H2SO4-H2O2消煮，鉬黃比色法測定植株全磷含量。

1.2.5 溶磷內(nèi)生真菌的鑒定 利用通用引物ITS1/ITS4(ITS1：5‘-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’，ITS4：5‘-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’)對溶磷內(nèi)生菌菌株核糖體基因轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)進行擴增。PCR體系為：Premix TaqTM 15 μl(Takara Biotechnology Co.,Ltd.,Dalian,China No.RR003A),DNA 2 μl，ITS1引物1 μl，ITS4引物1 μl，ddH2O 11 μl。PCR循環(huán)條件：94 ℃預(yù)變性5 min，94 ℃變性30 s，54 ℃退火30 s，72 ℃延伸45 s，40次循環(huán)，72 ℃延伸10 min。取3 μl PCR擴增產(chǎn)物，在混有0.01%EB核酸染劑的1%瓊脂糖凝膠上進行電泳，紫外凝膠成像儀下進行檢測。PCR擴增產(chǎn)物純化后送上海生工生物技術(shù)有限公司測序。將測序所得結(jié)果通過Chromas軟件進行校訂，校訂后的序列提交GenBank數(shù)據(jù)庫，并在NCBI的GenBank數(shù)據(jù)庫中用Blast程序與數(shù)據(jù)庫中的序列進行比對，尋找匹配度最高的生物序列進行溶磷內(nèi)生真菌的鑒定。初步確定溶磷內(nèi)生菌的分類學(xué)地位。對溶磷效果明顯的菌株，下載同源序列，用Clastw比對后，采用MEGA 6.0軟件構(gòu)建NJ系統(tǒng)樹，拓撲樹檢驗重復(fù)1 000次。

1.2.6 數(shù)據(jù)處理 運用Excel和IBM SPSS Statistics 20.0軟件進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析，LSD法進行多重比較，判斷差異顯著性;采用Origin 2016軟件繪圖，MEGA 6.0軟件構(gòu)建系統(tǒng)樹。

2 結(jié)果與分析

2.1 溶磷真菌的初步篩選

溶磷圈指的是在溶磷微生物的作用下，將無機磷固體培養(yǎng)基中的難溶性磷酸鹽溶解，在菌落周圍形成的透明地帶，一般將溶磷圈直徑(D)與菌落直徑(d)的比值(D/d)視為初步篩選溶磷菌株能力大小的指標(biāo)之一。D/d值越大，其溶磷能力也就越強[18-19]。從寧夏、甘肅當(dāng)?shù)孛幼臃N子內(nèi)分離的內(nèi)生真菌中，固糜21號分離得到4株，寧糜11號5株，寧糜14號4株，隴糜9號3株，隴糜13號3株，隴糜14號6株。在以磷酸三鈣為唯一磷源的固體培養(yǎng)基中能產(chǎn)生溶磷圈的菌株有5株。其中2株來自甘肅省，編號為LM1和LM2；3株來自寧夏，編號為GM1，GM2，GM3。在連續(xù)觀察5株菌株20 d內(nèi)發(fā)現(xiàn)，5株菌株生長至16 d時，D/d值基本趨于穩(wěn)定，整體表現(xiàn)為：GM1>GM3>LM1>LM2>GM2，其中GM1，GM3號菌株D/d值達到了1.59和1.47，初步判斷這兩株菌株溶磷能力強于其他菌株(見圖1)。

注：LM1，LM2分別代表來自甘肅省糜子品種的2株菌株；GM1，GM2，GM3分別代表來自寧夏回族自治區(qū)糜子品種的3株菌株。下同。

2.2 溶磷真菌的復(fù)篩及溶磷能力的比較

將5株可溶性溶磷真菌在NBRIP液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并測定其培養(yǎng)液中的可溶性磷含量及pH值(見表2)。5株溶磷內(nèi)生真菌對Ca3(PO4)的溶解能力很強，各菌株培養(yǎng)液中的可溶性磷含量及溶磷率均顯著(p<0.05)高于空白對照，各菌株可溶性磷含量在164.88～323.48 μg/ml，溶磷率范圍在3.26%～6.43%。其中，GM3號菌株的溶磷效果最好，顯著(p<0.05)高于其他菌株，溶磷率為6.43%，可溶性磷含量達到了323.48 μg/ml。GM1，GM2，LM1，LM2依次次之，溶磷率分別達到了5.26%，4.36%，3.56%和3.26%，可溶性磷含量分別為264.75，219.65，180.03，164.88 μg/ml。這與初步篩選得到的結(jié)果基本一致，進一步確定GM3，GM1號菌株溶磷能力較強。

表2 溶磷真菌對Ca3(PO4)2的溶解能力

從培養(yǎng)液中的pH值看，各處理均顯著(p<0.05)低于對照，其中GM1，GM3號菌株培養(yǎng)液的pH值最低，分別為2.88，3.63。LM1，LM2，GM2號菌株的培養(yǎng)液pH值在4.1～4.4。從溶磷率與pH值的變化趨勢來看，隨著溶磷率的提高，pH值大致呈下降的趨勢。相關(guān)性分析表明，5株溶磷真菌溶磷率(X)與其pH值(Y)呈極顯著負相關(guān)(r=-0.899**，p<0.001)，線性回歸方程為：

Y=-0.678X+7.093

2.3 接種溶磷真菌對糜子苗期生理特征及植株全磷的影響

2.3.1 接種溶磷真菌對糜子苗期生長的影響 在不施P的情況下，GM3號處理下的糜子干重較對照增加178%(見表3)。在施1/5 P及常量施P時，不同菌株對糜子的苗期株高、鮮重、干重的影響不明顯。在施1/2 P時，GM3，GM1號菌株均能夠顯著(p<0.05)增加糜子苗期株高和鮮重，株高較對照分別增加了24.9%和26.5%，鮮重較對照分別增加了44.52%，42.89%。

表3 不同磷素梯度下溶磷真菌對糜子苗期生長的影響

從5株溶磷真菌在4種不同磷素梯度下對糜子苗期株高、鮮重、干重的影響來看，GM1，GM3號菌株較于其他菌株對糜子苗期的生長促進作用更大，而且在磷素梯度為1/2 P時對糜子株高、鮮重、干重的增加更加明顯。

2.3.2 溶磷真菌對糜子苗期葉綠素的影響 SPAD值是衡量植物葉綠素相對含量的一個參數(shù)。由圖2可知，不施P時，各處理間糜子的SPAD值在16.97～19.21。常量施P時，各處理間糜子的SPAD值在18.88～21.29。在這兩種磷素梯度下，各菌株處理下的SPAD值較對照雖有變化，但差異并不明顯。施1/5 P時，GM3，GM2號菌株處理下的糜子SPAD值顯著(p<0.05)高于對照，達到了20.63和20.3，較對照分別提高20.67%和18.71%。施1/2 P時，GM3，GM1號菌株處理下的糜子SPAD值為21.46和21.6，與對照相比，增加22.28%，23.07%。整體來看，在不施P及常量施P的情況下，各菌株對糜子SPAD值的影響并不大。在施P為1/5，1/2時，GM3號菌株均能顯著增加糜子SPAD值。

2.3.3 溶磷真菌對糜子苗期凈光合速率的影響 如圖3所示，不施P時，GM1，GM2，GM3號菌株處理下的糜子凈光合速率較對照分別提高45.12%，48.92%和52.2%。施1/5 P時，GM3號菌株處理下的糜子凈光合速率顯著(p<0.05)高于其他處理，達到了23.2 μmol/(m2·s)，較對照提高145.76%，同時，LM1，GM1，GM2處理下的糜子凈光合速率均顯著(p<0.05)高于對照，分別提高48.47%，74.58%，69.49%。施1/2 P時，GM3號菌株處理下的糜子凈光合速率為25.87 μmol/(m2·s)，顯著(p<0.05)高于其他處理，與對照相比提高104.18%，同時，LM1，GM1，GM2處理下的糜子凈光合速率均顯著(p<0.05)高于對照，分別提高40.34%，60.22%，55.25%。常量施P時，GM3號菌株處理下的糜子凈光合速率為25.47 μmol/(m2·s)，顯著(p<0.05)高于對照，較對照提高61.71%。整體看來，在不同磷素梯度下，各菌株處理下的糜子苗期凈光合速率與對照相比有明顯差異，GM3號菌株在4種磷素梯度下均能顯著增加糜子凈光合速率且增幅最大。

2.3.4 溶磷真菌對糜子植株苗期全磷的影響 由圖4可以看出，不施P時，GM3號菌株能夠顯著(p<0.05)增加糜子植株全磷含量，為8.87 mg，較對照增加290.74%。施1/5 P時，與對照相比，GM3號菌株處理下的糜子植株全磷顯著(p<0.05)增加了168.35%，含量達到了10.09 mg/盆。施1/2 P時，GM3號菌株處理下的糜子植株全磷含量為12.39 mg/盆，較對照顯著提高121.25%。常量施P時，各處理下的糜子植株全磷與對照相比無顯著差異。在缺磷或少磷情況下，GM3號菌株均能顯著提高糜子植株全磷含量。

注：不同字母表示不同處理間差異達0.05顯著水平，未標(biāo)注則差異不顯著。下同。

圖3 溶磷真菌對糜子苗期凈光合速率的影響

圖4 溶磷真菌對糜子植株苗期全磷的影響

2.4 溶磷真菌的初步鑒定

采用CTAB法分別提取5株溶磷真菌的DNA，并利通用引物ITS1/ITS4對5株溶磷真菌菌株核糖體基因轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)進行擴增。PCR擴增產(chǎn)物純化后送上海生工生物技術(shù)有限公司雙向測序。

將測序所得結(jié)果通過Chromas軟件進行校訂后，將5株溶磷內(nèi)生真菌的18 SrDNA ITS區(qū)序列分別與GenBank中的菌株序列進行相似性分析進行初步鑒定(結(jié)果見表4)。

由表4可見，LM1，LM2，GM1為黃絲曲霉屬(Talaromycessp.)，GM2，GM3為青霉屬(Penicilliumsp.)，初步確定了5株溶磷內(nèi)生菌的分類學(xué)地位。從以上5種溶磷內(nèi)生真菌在盆栽試驗的綜合表現(xiàn)來看，菌株GM3號表現(xiàn)最為優(yōu)異，為本試驗得到的促生潛力菌株。

表4 溶磷內(nèi)生真菌初步鑒定結(jié)果

GM3的ITS rDNA經(jīng)PCR擴增后，擴增產(chǎn)物長度為500～520 bp。從NCBI數(shù)據(jù)中下載GM3的同源序列，用Clastw比對后，采用MEGA 6.0軟件使用臨近(NJ)法對GM3菌株及所下載相似度較高菌種的ITS序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(見圖5)，鑒定菌株GM3為產(chǎn)黃青霉(Penicilliumchrysogenum)，GenBank序列登記號為MT229079，系統(tǒng)發(fā)育樹按一定比例繪制，分支長度用于推斷系統(tǒng)發(fā)育樹的進化距離。

圖5 產(chǎn)黃青霉GM3菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹

3 討 論

通過溶磷圈直徑、菌落直徑及二者比值只能直觀定的表示溶磷真菌的溶磷能力，只通過這種方式來判斷溶磷能力大小并不準確和可靠[20-21]，若想進一步確定溶磷能力的強弱還需要定量的測定培養(yǎng)液中的可溶性磷含量。如圖1可以看出，GM1，GM3號菌株D/d值達到了1.59和1.47，而在表2中GM1，GM3號菌株可溶性磷含量分別為264.75，323.48 μg/ml,兩種方法得到的結(jié)果有差異，這可能是由于不同菌株對環(huán)境的適應(yīng)性不同所致。

溶磷真菌類主要有青霉菌(Penicillium)、曲霉菌(Asperillus)、根霉(Rhizopus)、鐮刀菌(Fu-sarium)、小菌核菌(Selerotium)等[22]。本研究從糜子種子內(nèi)得到的5株溶磷真菌，其中：LM1，LM2，GM1為黃絲曲霉屬(Talaromycessp.)，GM2，GM3為青霉屬(Penicilliumsp.)。其中溶磷效果較好的GM3號菌株經(jīng)系統(tǒng)鑒定為產(chǎn)黃青霉(Penicilliumchrysogenum)。溶磷微生物溶磷過程非常復(fù)雜，存在多種機理，主要機制包括質(zhì)子的釋放、有機酸的產(chǎn)生和酸性磷酸酶的生物合成作用[23-24]。微生物分泌有機酸機制是人們目前廣泛接受的學(xué)術(shù)理論[25]。越來越多的研究表明，溶磷量與培養(yǎng)液中的pH值存在一定的負相關(guān)性[22,26]。在本試驗中，從溶磷真菌復(fù)篩的結(jié)果中可以看出，各菌株培養(yǎng)液中的pH值均顯著低于對照并且隨著溶磷率的提高，pH值大致呈下降的趨勢。經(jīng)相關(guān)性分析5株溶磷真菌的溶磷率與培養(yǎng)液中的pH值呈極顯著負相關(guān)，這與徐冰等[27]、劉輝等[28]的研究結(jié)果基本一致。

在植物根系接種溶磷真菌不僅可以提高植物吸收磷素，轉(zhuǎn)化難溶性磷為有效磷[9],還能夠增強葉片的光合作用，提高植物的碳素營養(yǎng)，促進植物生長，增加植物的生物量或干重[29]。

在本次的盆栽試驗中，供試的5個曲霉科菌株都對苗高、鮮重、葉綠素含量、光合速率、植株磷素累積有促進作用，其中GM3效果較好。

在不施P的情況下，GM3號處理下的糜子干重較對照顯著增加178%。施1/2 P時，GM3號菌株能夠顯著(p<0.05)增加糜子苗期株高和鮮重，株高較對照增加24.9%，鮮重較對照增加44.52%。葉綠素是植物進行光合作用的主要色素并且在光合作用的光吸收中起核心作用，而凈光合速率指的是植物光合作用積累的有機物，很大程度上能反映出植物的營養(yǎng)狀況和健康程度[30]。施1/5 P和1/2 P時，GM3號菌株處理下的糜子SPAD值分別達到了20.63，21.46，凈光合速率分別達到了23.2和25.87 μmol/(m2·s)且顯著(p<0.05)高于對照。磷不但是植物體中許多重要化合物的成分，而且以多種方式參與植物的新陳代謝[1]。在缺P，1/5 P及1/2 P情況下，GM3號菌株較對照分別增加了290.74%，168.35%，121.25%的植株全磷含量，這表明在缺磷或者少磷的情況下GM3號菌株均能有效增加糜子的磷素累積。溶磷真菌將難溶的磷酸三鈣中的磷釋放出來，一部分供真菌自身生長繁殖所需在菌體中積累起來，另一部分可被植物吸收利用[31]。在常量施P情況下，磷素對于苗期糜子的生長發(fā)育已經(jīng)足夠，溶磷菌株的作用可能很大程度被減弱甚至掩蔽。盆栽試驗中雖然驗證了溶磷真菌對糜子生理特征的影響，但其機理性仍需進一步的研究。

曲霉科真菌是Class 1型內(nèi)生真菌，可通過種子進行垂直傳播，對糜子適應(yīng)干旱和半干旱環(huán)境具有重要的作用[32]。青霉和曲霉是沙漠植物常見的內(nèi)生真菌，他們的菌絲含有明顯的色素，又稱為色素真菌[33-34]，這些色素可以幫助植物吸收紫外線，提高植物耐高溫和干旱的能力。本研究在分離的糜子中，20%的種子發(fā)現(xiàn)有這些真菌，他們在糜子適應(yīng)性、產(chǎn)量和品質(zhì)方面的作用尚需要進一步研究。

4 結(jié) 論

從寧夏、甘肅不同糜子品種內(nèi)共分離得到25株內(nèi)生真菌，其中的5個內(nèi)生菌株屬曲霉科真菌，它們具有一定的溶磷能力，經(jīng)初步鑒定后發(fā)現(xiàn)LM1，LM2，GM1為黃絲曲霉屬(Talaromycessp.)，GM2，GM3為青霉屬(Penicilliumsp.)，其中GM3經(jīng)鑒定為產(chǎn)黃青霉(Penicilliumchrysogenum)。GM1，GM3號菌株為溶磷能力較強的菌株，可溶性磷含量分別為264.75和323.48 μg/ml，溶磷率分別高達5.26%和6.43%。5株溶磷真菌的溶磷率與pH呈極顯著負相關(guān)(r=-0.899**，p<0.001)，這表明溶磷菌的溶磷能力可能與其分泌的酸有關(guān)。在1/5 P和1/2 P處理下，GM3產(chǎn)黃青霉(Penicilliumchrysogenum)處理下的糜子SPAD值分別為20.63和21.46，較對照提高20.67%,22.28%；凈光合速率分別達為23.2和25.87 μmol(m2·s)，較對照提高145.76%,104.18%；植株全磷含量分別為10.09和12.39 mg/盆，較對照提高168.35%,121.25%，均顯著高于對照。表明GM3對糜子促生作用明顯，表現(xiàn)出了良好的溶磷效果,研究結(jié)果為旱地糜子生產(chǎn)實現(xiàn)“減肥減藥”提供了一個新的技術(shù)途徑。