吡丙醚微量農(nóng)藥中毒對兩廣二號親本F1代的影響

蘭艷妮，李楓燁，黃揚玉，莫炳巧，譚福洋，陳枝，葉建蔚，韋紅群，浦月霞

（廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣站，南寧市530007）

隨著現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的發(fā)展，柑橘、香蕉、甘蔗等規(guī)?；N植基地多采用機械噴灑農(nóng)藥，大大提高了工效，節(jié)約勞動力成本。農(nóng)藥中的有害成分在空氣中彌漫，可隨風(fēng)飄移至3～4公里外，使周邊桑園受到不同程度的污染，造成的家蠶中毒現(xiàn)象屢見不鮮[1-4]。隨著國家對高毒、高殘留農(nóng)藥的禁用和農(nóng)藥研發(fā)技術(shù)的進步，不斷推廣對人畜安全的綠色環(huán)保、環(huán)境友好型農(nóng)藥。吡丙醚是一種昆蟲保幼激素類幾丁質(zhì)合成抑制劑[5]，對抑制同翅目、纓翅目、雙翅目、鱗翅目等害蟲的化蛹和羽化有良好效果，具有高效、用量少、藥效長、對作物安全、對魚類及哺乳動物低毒等特點[6-7]，目前廣泛用于蔬菜及水果的蟲害防治。蠶種繁育過程發(fā)現(xiàn)：同為鱗翅目昆蟲的家蠶，1～4齡家蠶食下微量吡丙醚農(nóng)藥污染的桑葉，發(fā)育和齡期經(jīng)過基本正常，不易判定為中毒；5齡期食下微量吡丙醚農(nóng)藥污染的桑葉，因污染程度不同而表現(xiàn)中毒程度不同，輕者推遲1～2 d后能吐絲結(jié)繭，但化蛹推遲，復(fù)眼著色較晚，蛹期延長，交配性能差，產(chǎn)卵量少，不產(chǎn)卵蛾多，不良卵多；重者五齡期延長至9～12 d，少量吐絲結(jié)薄皮繭或不能吐絲結(jié)繭，更有蠶體變軟逐漸死亡。

家蠶吡丙醚農(nóng)藥中毒嚴(yán)重影響蠶業(yè)生產(chǎn)，威脅蠶種繁育及蠶品種選育，導(dǎo)致無種可養(yǎng)，品種資源滅絕的嚴(yán)重后果。本次試驗選取受吡丙醚農(nóng)藥中毒后能化蛹羽化的蠶蛾自交制種，將F1代蠶種催青飼養(yǎng)，記錄蠶期發(fā)育經(jīng)過，調(diào)查飼育成績、繭質(zhì)成績及卵質(zhì)成績，與同期飼養(yǎng)的原原種作對比分析，以期為蠶種繁育、品種保存及品種選育等出現(xiàn)此類中毒時能否繼續(xù)制種留種提供理論依據(jù)，為繁育應(yīng)急備用蠶種和搶救家蠶品種資源提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

受吡丙醚農(nóng)藥中毒的兩廣二號親本芙蓉、932、湘暉、7532自交所留蠶種，2019年春制秋用芙蓉、932、7532、湘暉的原原種，均由廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣站原種繁育科提供，桑葉由石埠基地提供。

1.2 試驗時間和地點

2019年8月，廣西蠶桑良種繁育與試驗示范基地。

1.3 試驗方法

某桑園周邊水果種植基地噴灑農(nóng)藥，導(dǎo)致所飼養(yǎng)批次的家蠶大量不吐絲結(jié)繭。經(jīng)送廣電計量檢測（南寧）有限公司檢測，該桑園葉子中吡丙醚含量在0.000 02～0.000 1 mg/kg之間。本試驗采回該地塊的桑葉飼養(yǎng)芙蓉、932、湘暉、7532親本，選取能結(jié)繭化蛹并羽化的蠶蛾進行品種內(nèi)自交并產(chǎn)卵獲得F1代蠶種，于2019年8月出庫催青。因蠶種單蛾產(chǎn)卵量少，不良卵多，產(chǎn)附差，孵化率低，試驗對每個品種采用混區(qū)收蟻，飼育至4齡起蠶后數(shù)蠶定頭數(shù)，每區(qū)400頭，重復(fù)3區(qū)。對照：同時收蟻2019年春制秋用芙蓉、932、湘暉、7532原原種作為對照，飼育至4齡起蠶后數(shù)蠶定頭數(shù)，每區(qū)400頭，重復(fù)3區(qū)。催青、飼育、種繭保護、制種、蠶種保護等各項操作及環(huán)境溫濕度調(diào)控全程按照良種繁育規(guī)程操作。飼養(yǎng)過程中記錄蠶期發(fā)育經(jīng)過、弱小蠶數(shù)、病蠶數(shù)，上蔟采繭記錄蔟中減蠶數(shù)，采繭后調(diào)查死籠情況和繭質(zhì)成績，制種后保護蠶種至固有色后調(diào)查產(chǎn)卵數(shù)和不良卵數(shù)，冷藏到期后浸酸、催青、孵化，調(diào)查孵化率。比較試驗的和對照的發(fā)育經(jīng)過、飼育成績、繭質(zhì)成績、卵質(zhì)成績的差異。試驗數(shù)據(jù)用Excel 2010計算和6SQ統(tǒng)計插件for Excel統(tǒng)計軟件進行方差分析。

1.4 調(diào)查項目及計算公式

蠶期發(fā)育經(jīng)過：收蟻至盛上蔟間的日差。蟲蛹統(tǒng)一生命率（%）=幼蟲生命率×（1－死籠率）×100；幼蟲生命率（%)=（收繭顆數(shù)/飼育頭數(shù)）×100；病蠶率（%）=（病蠶數(shù)/飼育頭數(shù)）×100；蔟中減蠶率（%）=（蔟中減蠶頭數(shù)/飼育頭數(shù)）×100；遲眠率%=遲眠頭數(shù)/（遲眠頭數(shù)+飼育頭數(shù)）×100；死籠率（%）=（死籠數(shù)/收繭顆粒）×100；全繭量/g=（25粒雌繭全繭量+25粒雄繭全繭量）/50；繭層量/g=（25粒雌繭繭層量+25粒雄繭繭層量）/50；繭層率（%）=（繭層量/全繭量）×100；不良卵率（%）=（不良卵數(shù)/總卵數(shù)）×100；孵化率（%）=（孵化卵數(shù)/總卵數(shù)）×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 蠶期發(fā)育經(jīng)過

試驗中，吡丙醚微量中毒的F1代蠶期發(fā)育經(jīng)過與對照差異不大，如圖1所示。芙蓉、932、湘暉3個品種的處理比對照的蠶期經(jīng)過時間稍長，但不超過半天，差異不大。7532處理和對照蠶期發(fā)育經(jīng)過基本一致。吡丙醚微量中毒的F1代，蟻蠶體質(zhì)稍弱，但經(jīng)過精心飼養(yǎng)，喂飼安全桑葉，蠶體發(fā)育趨于一致，熟蠶時間與對照沒有明顯差別。

2.2 體質(zhì)成績

由表1可以看出，吡丙醚農(nóng)藥微量中毒對芙蓉、932、湘暉、7532 4個品種的F1代飼育成績影響各不相同。其中對7532 F1代的影響最小，蟲蛹率、幼蟲生命率、病蠶率、蔟中減蠶率、遲眠率和死籠率，均與對照無顯著差異；對932 F1代的影響只有蔟中減蠶率一個指標(biāo)有顯著差異。吡丙醚農(nóng)藥微量中毒對芙蓉F1代的影響有蔟中減蠶率上升，幼蟲生命率、死籠率下降，與對照相比有顯著差異；吡丙醚農(nóng)藥微量中毒對湘暉的F1代影響最大，表現(xiàn)為蟲蛹率下降約10%，幼蟲生命率下降約6%，病蠶率上升4%，死籠率增加1倍多，這4個指標(biāo)與對照相比差異顯著。從表1還可以看出，4個品種的處理與對照相比，遲眠率都極低，都無顯著差異，這與圖1調(diào)查的蠶期發(fā)育一致相吻合。

表1 吡丙醚微量農(nóng)藥中毒對 F1代體質(zhì)成績的影響%

2.3 繭質(zhì)成績

吡丙醚農(nóng)藥微量中毒對F1代全繭量、繭層量、繭層率的影響，如表2所示。芙蓉、湘暉、7532三個品種的繭質(zhì)成績指標(biāo)，處理與對照相比無顯著差異。吡丙醚農(nóng)藥微量中毒對932 F1代的全繭量和繭層量有影響，分別下降了0.18 g和0.033 g，與對照差異顯著。

表2 吡丙醚微量農(nóng)藥中毒對 F1代繭質(zhì)成績的影響

2.4 卵質(zhì)成績

從表3可以看出，吡丙醚農(nóng)藥微量中毒對F1代制種產(chǎn)卵的卵質(zhì)成績無影響，不良卵率、孵化率在對照的上下浮動，經(jīng)方差分析，都無顯著差異。

表3 吡丙醚微量農(nóng)藥中毒對 F1代卵質(zhì)的影響

3 小結(jié)與討論

3.1 小結(jié)

芙蓉、932、湘暉、7532 4個品種吡丙醚微量農(nóng)藥中毒后，將能結(jié)繭化蛹并羽化的蠶蛾制種產(chǎn)卵，孵化后飼養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)各品種蠶期發(fā)育與對照基本同步，能結(jié)繭、化蛹并制種，但不同品種的各項成績表現(xiàn)出一定的差異性。

（1）吡丙醚微量農(nóng)藥中毒對F1代體質(zhì)成績的影響從大到小排序是：湘暉＞芙蓉＞932＞7532。體質(zhì)指標(biāo)差異性較小的品種為7532和932，說明7532和932體質(zhì)強健，即使上一代受微量農(nóng)藥污染，只要能制種，對下一代蠶的強健性指標(biāo)影響較小。在本次試驗中，吡丙醚微量農(nóng)藥中毒對芙蓉、湘暉這兩個品種F1代體質(zhì)成績中的多個指標(biāo)有影響，與對照有顯著差異，說明芙蓉、湘暉這兩個品種對農(nóng)藥敏感，可持續(xù)影響到下一代，也與生產(chǎn)實踐中觀察到的湘暉和芙蓉對農(nóng)藥較敏感，如果同一批次有中毒情況發(fā)生，湘暉和芙蓉中毒蠶數(shù)量多且較為嚴(yán)重等現(xiàn)象一致。

（2）吡丙醚微量中毒的芙蓉、湘暉、7532這3個品種的F1代繭質(zhì)成績與對照無明顯差異，但蠶期表現(xiàn)較好的932的全繭量和繭層量有明顯的下降。根據(jù)生產(chǎn)實踐經(jīng)驗，932對吡丙醚農(nóng)藥的敏感度是最低的，即使微量中毒，大部分還能吐絲結(jié)繭，部分推遲半天也能正常結(jié)繭，為何對下一代的全繭量和繭層量影響較大，有待今后進一步試驗研究。

（3）吡丙醚微量中毒的兩廣二號4個親本F1代所制蠶種的卵質(zhì)成績與對照均無顯著差異。說明吡丙醚微量中毒的芙蓉、932、湘暉、7532親本對卵質(zhì)的影響不大，經(jīng)過F1代后得到明顯的改善。

3.2 討論

本試驗中芙蓉、932、湘暉、7532 4個品種吡丙醚微量農(nóng)藥中毒，F(xiàn)1代各品種均能孵化飼養(yǎng)、并結(jié)繭、化蛹直至制種，可用于指導(dǎo)蠶種繁育、品種選育等受此類農(nóng)藥微量污染時繁育少量備用種，達(dá)到安全搶救家蠶品種資源的目的。但是，芙蓉、932、湘暉、7532 4個品種吡丙醚微量農(nóng)藥中毒后，F(xiàn)1代的體質(zhì)成績、繭質(zhì)成績的一些指標(biāo)與對照有顯著差異，因此，在大批量蠶種繁育時發(fā)現(xiàn)吡丙醚中毒，即使部分能結(jié)繭化蛹，也應(yīng)及時整批淘汰，不再制種，與家蠶良種繁育規(guī)程相一致。

吡丙醚在桑葉上的殘效期超過47 d，家蠶五齡前期受低濃度吡丙醚農(nóng)藥微量中毒，雖有推遲但仍有部分可結(jié)繭，中毒越晚，結(jié)繭率越低[8]。生產(chǎn)上一旦發(fā)現(xiàn)家蠶此類農(nóng)藥微量中毒，且蠶期在五齡以前的，應(yīng)及時更換新鮮桑葉，爭取部分甚至全部能結(jié)繭，盡可能降低損失。吡丙醚在桑葉上的殘效期長，受過污染的桑園在采葉試喂后，確保家蠶能正常吐絲結(jié)繭再大面積用葉。

吡丙醚微量農(nóng)藥中毒對蠶業(yè)生產(chǎn)帶來很大影響，經(jīng)濟損失慘重，因此建設(shè)蠶業(yè)基地要遠(yuǎn)離規(guī)?；涕俜N植基地、“三高”甘蔗種植基地等頻繁使用無人機、風(fēng)送式霧炮車噴藥的區(qū)域。積極與周邊種植戶溝通協(xié)商，推薦使用非吡丙醚類替代農(nóng)藥。桑園周邊是零散水果種植戶的，要求噴農(nóng)藥選擇無風(fēng)時作業(yè)，不使用大動力噴藥機噴藥，噴藥前通知養(yǎng)蠶戶，在桑園周邊牽拉薄膜設(shè)立屏障隔離，盡可能縮小農(nóng)藥中毒的影響范圍。