廣西家蠶原原種的冷藏與浸酸實(shí)用技術(shù)

韋紅群，藍(lán)必忠，李燕飛，蔣玉蓮，莫云霞

（廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣站，南寧市530007）

我國家蠶良種繁育采用三級繁育四級制種的制度。家蠶三級原種繁育擔(dān)負(fù)著家蠶良種繁育和品種種性保持的雙重任務(wù)，是家蠶良種繁育的基礎(chǔ)[1]。母種、原原種保育關(guān)系著品種的繼代和種性保持，是優(yōu)良品種種性保持和保障各級蠶種正常生產(chǎn)的關(guān)鍵。原原種的冷藏與浸酸的技術(shù)處理，直接關(guān)系到原原種的孵化與原種繁育成績，決定著廣西蠶業(yè)生產(chǎn)穩(wěn)定和健康發(fā)展。廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣站集科研與推廣為一體，承擔(dān)廣西家蠶品種的培育，現(xiàn)行家蠶推廣品種的原原母種、原原種的保育，同時負(fù)責(zé)各級蠶種的保護(hù)、冷藏與浸酸工作。40年來，該單位已摸索出一整套適應(yīng)廣西用種的蠶種人工孵化技術(shù)[2]，其中包括短期的單式冷藏技術(shù)、滯育卵長期冷藏浸酸技術(shù)、冷藏種浸酸后再冷藏技術(shù)以及即時浸酸前冷藏抑制技術(shù)、即時浸酸后冷藏技術(shù)。

莫云霞等[3-4]對不同冷藏時間的蠶品種的浸酸時間進(jìn)行了較系統(tǒng)的研究，提出對延期冷藏的原原種冷藏時間達(dá)150 d以上的，可不需浸酸而直接中庫調(diào)節(jié)后出庫催青。廣西現(xiàn)行的主要蠶種冷藏浸酸方法適用于各級蠶種，但原原種與原種及一代雜交種在浸酸技術(shù)處理安全范圍上，相對較窄。廣西目前主推兩廣二號、桂蠶2號和桂蠶N2，親本原原種10個，各個親本的耐冷藏和浸酸刺激能力不同。

鑒于原原種在蠶桑生產(chǎn)中的重要作用，筆者通過多年家蠶母種、原原種冷藏浸酸實(shí)踐，研究總結(jié)了廣西現(xiàn)行家蠶品種的親本原原種在不同時期的冷藏浸酸技術(shù)要點(diǎn)，以期為廣西原原種的保育和生產(chǎn)提供參考依據(jù)。

1 廣西原原種生產(chǎn)情況

優(yōu)良家蠶品種的推廣是獲得優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)蠶繭的重要物質(zhì)基礎(chǔ)，是最經(jīng)濟(jì)有效的增產(chǎn)手段[5]。我國蠶桑主產(chǎn)區(qū)集中分布在廣西、江蘇、浙江、四川、廣東、云南等省，各主產(chǎn)區(qū)在幾十年的蠶種繁育中，逐漸培育了地方優(yōu)良品種。其中廣西、廣東主要飼養(yǎng)的原原種品種為二化含多化性四眠中系品種芙蓉和932以及日系品種湘暉和7532。江蘇、四川等飼養(yǎng)的原原種主要品種為中系二化性四眠春用品種菁松及日系二化性四眠春用品種皓月。浙江與云南飼養(yǎng)的原原種主要品種為中系二化性四眠品種秋豐及日系二化性四眠夏秋品種白玉[6]。自2000年后，隨著國家“東桑西移”工程逐步實(shí)施，西部地區(qū)的蠶業(yè)，尤其是廣西蠶業(yè)的發(fā)展發(fā)生了歷史性的變化。自2004年起，廣西成為全國最大的蠶種生產(chǎn)市場，2007年廣西蠶繭產(chǎn)量已遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過世界第二大養(yǎng)蠶國印度[2]，成為全球最大的蠶繭生產(chǎn)基地。日益擴(kuò)大的蠶種市場，使得家蠶原種需求量大增，甚至出現(xiàn)區(qū)內(nèi)生產(chǎn)的原種滿足不了本地的蠶種市場需求的情況，2006—2012年仍需通過到云南代繁部分原種的方式補(bǔ)充供應(yīng)[1]，且隨著區(qū)內(nèi)原種生產(chǎn)規(guī)模的不斷增加，生產(chǎn)季節(jié)也在不斷地拉長，原原種的冷藏浸酸供種周期變長，從2月底出庫浸酸，連續(xù)不斷供種至11月結(jié)束，供種周期長達(dá)10個月，供種批次不斷增多。據(jù)統(tǒng)計，2015—2019年，廣西原原種每年生產(chǎn)的毛種數(shù)達(dá)2萬張左右，出庫量1萬張以上。

2 春制秋用原原種的冷藏與浸酸

2.1 春制秋用原原種的特點(diǎn)

春制秋用種由于處于庫外保護(hù)的時間較短，蠶卵沒有完全滯育就入庫冷藏，冷藏時間較短，因而生產(chǎn)上把春制秋用種稱為短期冷藏種。原原種制種后在25℃下保護(hù)3～5 d，冷藏50～90 d后出庫，再經(jīng)過溫鹽酸的刺激作用活化胚子，使胚子充分解除滯育達(dá)到孵化齊一。

2.2 春制秋用原原種的冷藏處理技術(shù)

根據(jù)原原種用種計劃制定相應(yīng)的蠶種保護(hù)冷藏計劃，春制秋用原原種保護(hù)與冷藏處理時間標(biāo)準(zhǔn)如表1所示。蠶種產(chǎn)下在25℃保護(hù)室保護(hù)，按品種，分日期排號，根據(jù)各品種預(yù)計出庫日期和用種量，確定各品種各個批段的庫外保護(hù)時間、入庫時間及冷藏時間，按生產(chǎn)日期、分批量分時段入庫冷藏。蠶種入庫后按品種和用種期別進(jìn)行分類排序整理，防止品種混雜和不同冷藏時段的蠶種混雜，確保蠶種出庫時蠶種冷藏時間和解除滯育程度發(fā)育一致。

表1 春制秋用原原種保護(hù)與冷藏處理時間標(biāo)準(zhǔn)

春制秋用原原種保護(hù)與冷藏技術(shù)要點(diǎn)：蠶種保護(hù)溫度可適當(dāng)偏高，采用25.0～25.5℃保護(hù)促進(jìn)蠶種發(fā)育，減少卵齡差。蠶種保護(hù)初期注意觀察卵色變化，確定蠶種產(chǎn)卵時間、發(fā)育是否一致。卵齡差大的蠶種適當(dāng)延長庫外保護(hù)時間和冷藏時間、推遲用種時間。蠶種冷藏初期（前40 d）冷藏溫度4～5℃，后期（40 d以后）冷藏溫度3～4℃。

2.3 春制秋用原原種的浸酸處理技術(shù)

廣西秋季原原蠶飼養(yǎng)一般在8月初開始，原原種一般在7月底開始出庫，冷藏時間較短，解除滯育還不充分，蠶種需要浸酸處理，根據(jù)各個品種的解除滯育程度和承受鹽酸刺激量不同，浸酸時間上有一定的差異。各品種的浸酸處理技術(shù)如表2所示。

表2 春制秋用原原種的浸酸技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)

中系親本8810解除滯育最慢，浸酸刺激量最大，芙蓉次之，932、NC99R和NC9C耐酸能力相當(dāng)，浸酸時間排序?yàn)?810＞芙蓉＞932、NC99R和NC9C。日系親本8711耐酸力低于其他4個日系品種，浸酸時間相應(yīng)減少。

3 秋制春用原原種的冷藏和浸酸

3.1 秋制春用原原種的特點(diǎn)

秋制春用原原種的庫外保護(hù)時間較長，蠶種充分滯育后入庫冷藏，生產(chǎn)上稱長期冷藏種或滯育卵冷藏種。

3.2 秋制春用原原種的保護(hù)與冷藏

秋制春用原原種庫外保護(hù)時間較長，為了減少營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，原原種產(chǎn)卵初期在24℃，濕度75%～80%條件下保護(hù)，避免接觸20℃以下低溫和27℃以上的溫度，避免翻動蠶種產(chǎn)生摩擦及外力刺激。大約經(jīng)過7～10 d，蠶卵呈現(xiàn)固有色后，還需要接觸一定時間的25℃的適溫，才能進(jìn)一步鞏固滯育性。在25℃中保護(hù)時間應(yīng)不多于30 d，以20 d為適宜，保護(hù)20 d后降為22℃保護(hù)。庫外保護(hù)時間控制在40 d以內(nèi)。庫外保護(hù)時間過長，容易消耗卵內(nèi)養(yǎng)分，降低卵質(zhì)，特別是7532和932，庫外保護(hù)時間過長，易出現(xiàn)紅死卵現(xiàn)象。常用的冷藏保護(hù)方法如表3所示。

表3 秋制春用原原種滯育卵保護(hù)冷藏標(biāo)準(zhǔn)d

冷藏溫度的控制要求按照冷藏初期（前50 d）的冷藏溫度為4.0～4.5℃，冷藏后期（50 d后）的冷藏溫度為2.5～3.0℃，以減少卵內(nèi)養(yǎng)分消耗和抑制蠶種發(fā)育。

3.3 秋制春用原原種的浸酸處理方法

秋制越年種冷藏到期后再經(jīng)過鹽酸的刺激作用，使之發(fā)育整齊和孵化齊一。蠶種在冷藏過程中會隨著冷藏時間的延長而不斷發(fā)育，蠶種耐酸能力逐步減弱，浸酸處理時間和鹽酸液溫也要縮短和降低，防止刺激過量造成卵質(zhì)下降，蟻蠶體質(zhì)變?nèi)?。根?jù)多年的浸酸經(jīng)驗(yàn)，總結(jié)出秋制春用原原種不同冷藏時間的浸酸處理方法，該方法亦適用于原種。

表4 不同冷藏時間秋制春用原原種的浸酸標(biāo)準(zhǔn)

實(shí)際浸酸中因品種而異，中系親本8810浸酸時間可適當(dāng)延長。932易解除滯育，浸酸時間則偏短。日系親本8711不耐酸，故浸酸時間要比同等條件下的其他日系親本少20～30 s，且浸酸液溫宜偏低。超過140 d后，浸酸適用的范圍可以跟中系品種相同。超過160 d的原原種，生產(chǎn)上可以不浸酸，但為了使孵化整齊，采用的方法通常為中系品種放在13～15℃中庫調(diào)節(jié)1 d，日系品種放置13～15℃中庫調(diào)節(jié)3 d，而后出庫進(jìn)行卵面消毒后直接催青。

4 原原種即時浸酸的處理方法

原原種的即時浸酸標(biāo)準(zhǔn)：鹽酸比重1.073～1.075，溫度45～46℃的條件下，中系品種浸4′30″～5′00″，日系品種浸5′00″～5′30″。掌握浸酸適期是生產(chǎn)上的技術(shù)關(guān)鍵。在實(shí)際生產(chǎn)中，通過解剖蠶種胚子判斷浸酸適期不切實(shí)際，通常根據(jù)產(chǎn)卵后蠶種保護(hù)溫度，經(jīng)過時間長短，并結(jié)合卵色來確定[7]。通常少數(shù)蠶種呈黃色，大部分蠶種呈淺黃色時為浸酸適期。根據(jù)產(chǎn)卵后保護(hù)溫度、各品種產(chǎn)卵習(xí)性、浸酸時蠶種發(fā)育老嫩程度來確定鹽酸刺激程度。如果是當(dāng)天浸酸，需特別需要注意的是932原原種，因其盛產(chǎn)卵時間較晚，胚子發(fā)育相對較嫩，一般放在25℃保護(hù)至下午16：30后再進(jìn)行裝種消毒浸酸，鹽酸刺激量宜偏輕，其他品種可按當(dāng)天下午15：00進(jìn)行浸酸處理。

原原種即時浸酸前冷藏，根據(jù)生產(chǎn)實(shí)際需要，收種當(dāng)天不能安排浸酸處理的，可進(jìn)行浸酸前冷藏保護(hù)。冷藏方法為當(dāng)日11：00～11：30放中庫，保護(hù)2～3 h，后入內(nèi)庫用4～5℃冷藏，冷藏時間控制在3 d內(nèi)，最長不超過5 d。浸酸當(dāng)天上午11：30出中庫，下午14：30出庫，15：00進(jìn)行福爾馬林卵面消毒、浸酸。

5 討論

5.1 原原種冷藏與浸酸技術(shù)的優(yōu)勢

5.1.1 能有效促使蠶種孵化齊一 在生產(chǎn)上，原原種的收蟻采用當(dāng)日早上孵化的蟻蠶，不采用晚孵化或者第2日孵化的蟻蠶，因此對蠶種的孵化率要求非常高，而原原種的孵化率基本要求達(dá)到95%以上。

5.1.2 能隨時供種，適應(yīng)原種市場需求 不論是短期種冷藏、滯育卵冷藏還是即時用種需求，都可靈活調(diào)節(jié)，按需調(diào)節(jié)，滿足不同時期，不同品種的供種要求。

5.2 原原種冷藏與浸酸技術(shù)存在的問題

5.2.1 原原種冷藏和浸酸技術(shù)存在一定的處理難度 受蠶種卵齡開差的影響，蠶卵產(chǎn)下的早晚，對浸酸后蠶種的孵化整齊度，特別是即浸種和短冷浸酸種的孵化率影響較大。單蛾圈內(nèi)蠶種胚子發(fā)育開差大，表現(xiàn)為外圈蠶種產(chǎn)卵時間早，內(nèi)圈蠶種產(chǎn)卵時間晚。各個蛾圈之間存在蠶種發(fā)育不齊，產(chǎn)卵時間開差過大。如2019年春制秋用的原原種，部分品種存在卵齡開差達(dá)10 h，給原原種的冷藏和浸酸技術(shù)處理帶來一定的難度。

5.2.2 原原種冷藏浸酸技術(shù)的操作規(guī)范有待改善 蠶種的冷藏與浸酸是全程手工操作，容易受人為因素，如人工熟練程度、人員素質(zhì)等影響，需要提高原原種冷藏浸酸技術(shù)的操作水平。

5.2.3 冷藏浸酸設(shè)備需要完善和維護(hù) 冷藏浸酸的設(shè)備設(shè)施對原原種的冷藏與浸酸技術(shù)有較大影響，設(shè)施與冷藏技術(shù)不配套，設(shè)備陳舊或年久失修易存在安全隱患，冷庫的保養(yǎng)與基礎(chǔ)設(shè)施的維護(hù)應(yīng)專人進(jìn)行，需要不斷投入人力和物力。隨著廣西桑蠶種質(zhì)資源保護(hù)庫的建成與投入使用，冷庫選用自動化溫濕調(diào)控系統(tǒng)，浸酸車間采用自動化流水線浸酸設(shè)備和配套的處理設(shè)備[8]。使蠶種的冷藏保護(hù)和浸酸條件得到極大的改善。但是冷藏浸酸設(shè)備常因福爾馬林、工業(yè)鹽酸的腐蝕影響，需要經(jīng)常性的檢查與維護(hù)保養(yǎng)，因此設(shè)備的維護(hù)與保養(yǎng)事關(guān)蠶種生產(chǎn)的安全，也是原原種冷藏與浸酸所要特別注意的問題。

5.3 對策建議

5.3.1 合理保護(hù)原原種，縮小卵齡開差 原原種生產(chǎn)單位在制種時，應(yīng)注意各品種的產(chǎn)卵特性，盡量縮小卵齡開差。蠶種冷庫在制定冷藏保護(hù)計劃時，應(yīng)注意觀察各品種的發(fā)育整齊度，對卵齡開差超過9 h的，特別是春制秋用種的冷藏，必須適當(dāng)延長庫外保護(hù)時間，推遲用種時期。如作為即浸種出庫，則卵齡開差要求不超過7 h。

5.3.2 提高操作人員的技能水平，培養(yǎng)操作人員的高度責(zé)任感 技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)試孵試驗(yàn)。原原種在出庫前10 d應(yīng)進(jìn)行試孵試驗(yàn)。對到期的各原原種品種進(jìn)行剪樣抽樣。按不同的浸酸時間、鹽酸液溫、鹽酸比重等分不同的梯度進(jìn)行分類試孵，調(diào)查各品種不同處理的孵化率，擇優(yōu)選擇處理組合。建立健全原種崗位責(zé)任制，健全冷藏與浸酸技術(shù)規(guī)程。原原種的冷藏與浸酸處理指定由技術(shù)過硬的專業(yè)技術(shù)人員負(fù)責(zé)，應(yīng)對冷藏及浸酸的標(biāo)準(zhǔn)熟練掌握與應(yīng)用，能結(jié)合實(shí)際情況嚴(yán)格按照技術(shù)操作規(guī)程來操作。

5.3.3 加強(qiáng)冷庫設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)，確保蠶種質(zhì)量安全 冷庫設(shè)備的正常運(yùn)行是蠶種冷藏與浸酸的基礎(chǔ)條件。制冷設(shè)備應(yīng)經(jīng)常進(jìn)行檢查與維護(hù)，確保制冷系統(tǒng)安全穩(wěn)定運(yùn)行，確保溫度和濕度正常，保證蠶種冷藏安全；浸酸設(shè)備包含鹽酸缸、浸酸用具、浸酸吊車等，生產(chǎn)中由于機(jī)器故障等原因造成蠶種浸酸事故時有發(fā)生，應(yīng)當(dāng)定期經(jīng)常進(jìn)行檢查與維護(hù)，避免存在各種隱患，給蠶種生產(chǎn)造成不可逆轉(zhuǎn)的損失。