鐵皮石斛液體口香糖的研制

陸倩倩 楊薇 何靖 林冰 周英

摘 要：以鐵皮石斛、青錢柳和玫瑰茄為原料，研制液體口香糖。 通過感官評(píng)價(jià)、正交試驗(yàn)得出最佳配比為鐵皮石斛汁34 %，青錢柳汁12 %，玫瑰茄汁23 %，菊花汁31 %，薄荷腦0.58 %，吐溫-80 0.23 %，苯甲酸鈉0.02 %。并對(duì)液體口香糖的抑菌效果進(jìn)行了評(píng)價(jià)，結(jié)果表明：研制的鐵皮石斛液體口香糖外觀呈紅色液體，均勻一致，具有青錢柳、玫瑰茄、菊花的復(fù)合氣味，口感酸甜清爽，無異味;并對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌有一定抑制作用。

關(guān)鍵詞：鐵皮石斛;青錢柳;玫瑰茄;液體口香糖;抑菌

中圖分類號(hào)：R78文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1008-0457（2020）04-0082-06 國(guó)際DOI編碼：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2020.04.012

Abstract： This study prepared the liquid gum of Dendrobium officinale through using D.officinale，Cyclocarya paliurus，? and Hibiscus sabdariffa According to the sensory evaluation and orthogonal test of liquid gum， we found the best ratio for preparing liquid gum was as follows： 34%juice of D.officinale ， 12%juice of C.paliurus， 23%juice of H.sabdariffa， 31% juice of D.morifolium， 0.58% menthol， 0.23%tween-80， and 002%sodium benzoate. This study also investigated the antibacterial effect of liquid gum of D.officinale. The result showed that liquid gum was red liquid and uniform in appearance， and had compound smell of D.officinale， C.paliurus and H.sabdariffa. The taste was sweet and sour， and had no peculiar smell. It also had a certain inhibitory effect on Staphylococcus aureus and Escherichia coli.

Keywords： Dendrobium officinale; Cyclocarya paliurus;Hibiscus sabdariffa; liquid gum; bacteriostatic effect

鐵皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）為蘭科（Orchidaceae）石斛屬（Dendrobium）多年生草本植物，是我國(guó)及亞太地區(qū)一種傳統(tǒng)的名貴中藥材，為我國(guó)傳統(tǒng)藥用植物，在日常保健和臨床治療中應(yīng)用悠久，受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者廣泛關(guān)注。研究表明鐵皮石斛具有抗氧化[1-4]、抗腫瘤[5-8]、調(diào)節(jié)免疫力[9-11]、緩解疲勞[12]、治療糖尿病[13]及抑菌[14]等作用。如Wei等[15]在研究500mg/kg鐵皮石斛提取物對(duì)BALB/c小鼠的抗疲勞作用中，以紅景天提取物為陽性對(duì)照，采用負(fù)重游泳測(cè)試進(jìn)行評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)兩者在一定程度上均對(duì)各項(xiàng)疲勞指標(biāo)有抑制作用，但鐵皮石斛提取物表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗疲勞活性。

青錢柳（Cyclocarya paliurus）系胡桃科（Juglandaceae）青錢柳屬（Cyclocarya）植物，具有明顯的降血糖、降血壓、降血脂、抗氧化、抗腫瘤和增強(qiáng)機(jī)體免疫功能[16-22]等作用。如王小江等[23]發(fā)現(xiàn)青錢柳葉多糖能顯著抑制α-葡萄糖苷酶活性，半數(shù)抑制濃度（IC50）為3.3μg/mL，遠(yuǎn)小于抗2型糖尿病藥物阿卡波糖（193.6μg/mL）。

玫瑰茄（Hibiscus sabdariffa L .）為錦葵科（Malvaceae Juss）木槿屬（Hibiscus Linn.）一年生草本植物，有抗氧化、抗糖尿病、抗腫瘤、降血壓、調(diào)血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化[24-27]等醫(yī)療用途。如Afolabi等[28]研究幾種植物的甲醇和水提取物對(duì)口腔齲易感性突變鏈球菌的作用發(fā)現(xiàn)，玫瑰茄提取物顯示直接抗菌活性， 最小抑制濃度 （MIC） 為 2.5mg/mL。

隨著生活水平的提高，人們?nèi)找骊P(guān)心自身健康問題，對(duì)口腔健康的關(guān)注度亦越來越高。細(xì)菌及病毒感染，空氣污染，用聲過度，煙酒及辛辣燥熱刺激食物等因素易導(dǎo)致口腔問題和咽喉炎癥，如果失治、誤治、錯(cuò)治，易演變成牙周炎、慢性咽喉炎等。張曉靜[29]發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽性球菌、銅綠假單胞菌和革蘭氏陰性短桿菌等細(xì)菌是口腔疾病的主要致病菌，涵蓋常見的大腸桿菌、腸桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌等多種類型。2018年1月，國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委食品安全標(biāo)志與監(jiān)測(cè)評(píng)估司下發(fā)了《國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委食品司關(guān)于就黨參等9種物質(zhì)作為按照傳統(tǒng)既是食品又是中藥材物質(zhì)開展試生產(chǎn)征求意見的函》，擬將鐵皮石斛、黨參等9種物質(zhì)列入按照傳統(tǒng)既是食品又是中藥材的名單，并將浙江和云南省兩省作為鐵皮石斛試生產(chǎn)的首批省份。因此，先期對(duì)鐵皮石斛的綜合利用開發(fā)進(jìn)行研究，為鐵皮石斛的應(yīng)用打下基礎(chǔ)，具有重要的意義。本研究以鐵皮石斛為主要原料，輔以青錢柳、玫瑰茄、茉莉、百合、陳皮、菊花等多種中藥材，研制了一種氣味清新，色澤均一，口感酸甜清爽、無異味，易于攜帶和使用的液體口香糖，并對(duì)其抑菌效果進(jìn)行了評(píng)價(jià)，為鐵皮石斛等中藥材的開發(fā)利用提供了理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

藥材：鐵皮石斛、青錢柳、玫瑰茄、菊花均為市售。經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)魏升華教授鑒定分別為：鐵皮石斛為蘭科植物鐵皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）的莖;青錢柳為胡桃科植物青錢柳（Cyclocarya paliurus）的葉;玫瑰茄為錦葵科植物玫瑰茄（Hibiscus sabdariffa L.）的花;菊花為菊科植物菊（Dendranthema morifolium（Ramat.） Tzvel.）的花。

菌株：大腸桿菌（Esche-richia Coli）（ATCC 25922）、銅綠假單胞桿菌（Pseudomonas aeruginosa）（CMCC 10104）、金黃色葡萄球菌（Staphylo-coccus aureus）（BNCC 186335）、普通變形菌在上海魯微科技有限公司采購。

試劑：營(yíng)養(yǎng)瓊脂及營(yíng)養(yǎng)肉湯（上海博微生物科技有限公司），MH瓊脂培養(yǎng)基（杭州百思生物技術(shù)有限公司），MH肉湯培養(yǎng)基（杭州百思生物技術(shù)有限公司），抗生素藥敏紙片（杭州微生物試劑有限公司）。薄荷腦（河南萬邦實(shí)業(yè)有限公司），吐溫-80（廣州穗欣化工有限公司），苯甲酸鈉（河南永順化工有限公司），水（娃哈哈純凈水，蒸餾水為實(shí)驗(yàn)室自制）。

儀器：電熱恒溫水浴鍋（DK-98-Ⅱ，天津市泰斯特儀器有限公司）;電子天平（13D101-1000，上海良平儀器儀表有限公司）;冰箱（BCD-225WDGK，青島海爾股份有限公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 提取液的制備

挑選干燥、色澤均一的鐵皮石斛、青錢柳、玫瑰茄、菊花藥材，分別按一定比例加入蒸餾水，在90℃下浸提60min，過濾，濾液4℃保存。

1.2.2 液體口香糖感官評(píng)價(jià)的測(cè)定

參照QBT 2945-2012口腔清潔護(hù)理液產(chǎn)品的感官理化指標(biāo)，對(duì)液體口香糖的感官進(jìn)行評(píng)分，包括色澤（滿分30分），口感和氣味（滿分30分），組織狀態(tài)（滿分40分），滿分以100分計(jì)。評(píng)價(jià)小組由10名有感官評(píng)品經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員組成，結(jié)果取平均值，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表1。

1.2.3 單因素試驗(yàn)

為確定液體口香糖的配方，先進(jìn)行單因素試驗(yàn)確定鐵皮石斛汁、青錢柳汁、玫瑰茄汁、菊花汁、薄荷、吐溫-80加入的量。試驗(yàn)時(shí)固定其他條件，一次改變其中一個(gè)條件，以便于分析各因素對(duì)液體口香糖的影響。固定鐵皮石斛汁為15g、青錢柳汁5g、玫瑰茄汁10g、菊花汁13g、薄荷0.25g、吐溫-80 0.15g，分別以鐵皮石斛汁（13、14、15、16及17g）、青錢柳汁（4、5、6、7及8g）、玫瑰茄汁（8、9、10、11及12g）、菊花汁（10、11、12、13及14g）、薄荷（0.15、0.2、0.25、0.3及035g）、吐溫-80（0.05、0.1、0.15、0.2及0.25g）進(jìn)行單因素試驗(yàn)，從色澤、口感氣味、組織狀態(tài)3個(gè)方面進(jìn)行感官評(píng)價(jià)，得分去掉一個(gè)最低分，去掉一個(gè)最高分，剩下的作為正交試驗(yàn)的較優(yōu)區(qū)間。

1.2.4 正交試驗(yàn)

根據(jù)單因素試驗(yàn)所確定的鐵皮石斛汁、青錢柳汁、玫瑰茄汁、菊花汁、薄荷、吐溫-80加入的量，進(jìn)行L18（37）正交試驗(yàn)，通過感官評(píng)價(jià)分析確定液體口香糖的最佳配方。正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)見表2。

1.2.5 灌裝、殺菌裝瓶后及時(shí)滅菌。

1.2.6 抑菌圈實(shí)驗(yàn)采用濾紙片擴(kuò)散法

將金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、普通變形菌、銅綠單胞菌采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基活化并擴(kuò)大培養(yǎng)，采用平板牛津杯法進(jìn)行體外抑菌活性的測(cè)定。將以上幾種菌液稀釋至106cfu/mL，取100μL均勻涂于凝固的培養(yǎng)基平板表面。將滅菌好的濾紙片置于待測(cè)液中浸泡，30min后取出，瀝干多余藥液后，均勻放在固體培養(yǎng)基上，恒溫箱中培養(yǎng)、觀察，測(cè)定其抑菌圈大小。取鏈霉素溶液 10μL 滴加于滅菌濾紙片上作為陽性對(duì)照。抑菌圈的直徑大于 6.00mm 者，則判有抑菌作用;抑菌圈直徑越大，抑菌能力越強(qiáng)。

1.3 液體口香糖指標(biāo)測(cè)定

1.3.1? 感官理化指標(biāo)

參照QBT 2945-2012口腔清潔護(hù)理液產(chǎn)品的感官理化指標(biāo)。

1.3.2 微生物指標(biāo)

參照QBT 2945-2012檢測(cè)，應(yīng)符合表3要求。

1.3.3 防腐劑

液體口香糖為多劑量液體制劑，應(yīng)加入適當(dāng)防腐劑，GB 2760-2014規(guī)定苯甲酸限量為0.2g/kg，故而本試驗(yàn)選取0.02 %苯甲酸鈉作為防腐劑。

2 結(jié)果與分析

2.1 料液比的確定

料液比的不同，直接影響到產(chǎn)品的口感，從表4可見，不同藥材最佳液料比為：鐵皮石斛1：10（g/mL），青錢柳1：100（g/mL），玫瑰茄1：50（g/mL），菊花1：100（g/mL）。

2.2 單因素試驗(yàn)

2.2.1 鐵皮石斛汁、青錢柳汁、玫瑰茄汁、菊花汁的單因素試驗(yàn)由圖1可知，鐵皮石斛汁、青錢柳汁、玫瑰茄汁、菊花汁加入的量分別為15、6、10、14g時(shí)感官評(píng)分最高。

2.2.2 薄荷、吐溫-80的單因素試驗(yàn)

由圖2可知，當(dāng)薄荷、吐溫-80加入的量分別為0.25 g、0.1 g時(shí)感官評(píng)分最高。

圖2 薄荷、吐溫-80加入的量對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響Fig2 The effect of the amount of menthol and Tween-80on sensory evaluation

2.3 正交試驗(yàn)

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步優(yōu)化液體口香糖的配比，設(shè)計(jì)L18（37）正交試驗(yàn)，試驗(yàn)因素水平表見表2，正交試驗(yàn)結(jié)果見表5。

由表5可知，對(duì)液體口香糖影響的主次關(guān)系為鐵皮石斛汁>薄荷腦>菊花汁>玫瑰茄汁>青錢柳汁>吐溫-80;最佳配比組合為A2B1C2D2E2F1，即鐵皮石斛汁15g、青錢柳汁5g、玫瑰茄汁10g，菊花汁13g，薄荷腦0.25g，吐溫-80 0.1g 。此時(shí)風(fēng)味最佳，其汁液芳香甘甜，入口清爽，有酸甜清涼感。

2.4 指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

2.4.1 感官評(píng)定結(jié)果

色澤：呈紅色液體，均勻一致。

口感和氣味：具有青錢柳、玫瑰茄、菊花的氣味，甜度適中、酸甜清爽，有薄荷清涼口感，無異味。

組織狀態(tài)：透明液體，無沉淀，無肉眼可見的外來雜質(zhì)。久置有絮狀天然提取物，屬正?，F(xiàn)象。

2.4.2 微生物測(cè)定結(jié)果

根據(jù)1.3.2項(xiàng)下測(cè)定，符合QBT 2945-2012要求。

2.5 抑菌作用

液體口香糖對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、普通變形桿菌、銅綠假單胞菌的抑菌作用見表6及圖3。從表6抑菌圈直徑大小可以看出，液體口香糖對(duì)銅綠假單胞菌、普通變形菌的抑制作用不明顯;對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌有抑制作用。

3 結(jié)論與討論

通過正交試驗(yàn)，確定液體口香糖的最佳配比為：鐵皮石斛汁34%，青錢柳汁12%，玫瑰茄汁23%，菊花汁31%，薄荷腦0.58%，吐溫-80 0.23 %，苯甲酸鈉0.02%。制備出的液體口香糖外觀呈紅色液體，均勻一致，具有青錢柳、玫瑰茄、菊花的復(fù)合氣味，甜度適中、酸甜清爽，具有薄荷清涼口感，無異味。抑菌試驗(yàn)表明，本產(chǎn)品對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌有一定的抑菌作用，為今后其在口腔護(hù)理品中的應(yīng)用提供了很好的試驗(yàn)研究依據(jù)。

隨著人們生活水平的不斷提高和保健意識(shí)的增強(qiáng)，藥食兩用產(chǎn)品將會(huì)越來越受歡迎。目前已有學(xué)者開展了相關(guān)鐵皮石斛保健食品的研究，如石斛飲料[30]、酸奶[31]、發(fā)酵酒[32]等，并取得了一定的研究成果?；诖?，本研究將鐵皮石斛作為原料制成液體口香糖（此類研究目前尚未見相關(guān)報(bào)道），為石斛產(chǎn)品的多樣化提供思路，促進(jìn)石斛產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，激發(fā)和帶動(dòng)我國(guó)石斛產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。

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