特應(yīng)性皮炎小鼠模型中白細胞介素-21、CC趨化因子配體20的表達分析

王娟 鄭愛義 鮑海平

[摘要]目的 測定白細胞介素-21（IL-21）和CC趨化因子配體20（CCL20）在2，4-二硝基氯苯（DNCB）誘導(dǎo)的特應(yīng)性皮炎小鼠模型中的表達情況，探討二者在特應(yīng)性皮炎發(fā)病中的作用。方法 將12只BALB/c雌性小鼠，隨機分為模型組和對照組，每組6只，使用DNCB構(gòu)建小鼠特應(yīng)性皮炎模型。造模成功后采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測小鼠血清中IL-21和CCL20的水平。結(jié)果 特應(yīng)性皮炎模型組小鼠血清中IL-21和CCL20的表達水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），并且二者表達成正相關(guān)（r=0.59，P<0.05）。結(jié)論 IL-21和CCL20在特應(yīng)性皮炎小鼠模型中表達升高，且成正相關(guān)，可能協(xié)同參與了特應(yīng)性皮炎的發(fā)生發(fā)展。

[關(guān)鍵詞]特應(yīng)性皮炎;白細胞介素-21;CC趨化因子配體20;小鼠模型

[中圖分類號] R751? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-4721（2020）8（b）-0014-03

[Abstract] Objective To detect the expression of interleukin-21 （IL-21） and CC chemokine ligand 20 （CCL20） in 2，4-dinitrochlorobenzene （DNCB） induced mice models with atopic dermatitis and explore their roles in the pathogenesis of atopic dermatitis. Methods Twelve female BALB/c mice were randomly divided into the model group and control group（6 in each）. Mice models with atopic dermatitis were established by DNCB. After successful modeling， the serum levels of IL-21 and CCL20 were detected by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）. Results The serum levels of IL-21 and CCL20 in the model group with atopic dermatitis were significantly higher than those in the control group （P<0.05）. There was a positive correlation between the serum levels of IL-21 and CCL20 in the model group（r=0.59， P<0.05）.Conclusions The expression of IL-21 and CCL20 in the mouse model of atopic dermatitis is increased and positively correlated， which may be synergistically involved in the occurrence and development of atopic dermatitis.

[Key words] Atopic dermatitis; Interleukin-21; CC chemokine ligand 20; Mouse model

特應(yīng)性皮炎（AD）是由多種免疫、炎性細胞和細胞因子參與的慢性炎癥性皮膚病，皮損頑固難愈，病因和發(fā)病機制較為復(fù)雜，與遺傳、免疫異常、皮膚屏障受損、生存環(huán)境和感染等因素有關(guān)[1]。不同亞型CD4+T細胞介導(dǎo)的免疫失衡是AD發(fā)病的重要環(huán)節(jié)[2-3]。白細胞介素-21（IL-21）是IL-2家族中重要的多效能細胞因子，可調(diào)節(jié)淋巴細胞和自然殺傷（NK）細胞的增殖分化，廣泛參與體內(nèi)免疫應(yīng)答和炎性反應(yīng)。CC趨化因子配體-20（CCL20）是CC亞族的趨化因子，可趨化表達CC趨化因子受體（CCR）6的淋巴細胞和未成熟樹突狀細胞向抗原局部定向遷移，與多種自身免疫性疾病有關(guān)。本研究通過測定AD小鼠模型血清中IL-21和CCL20的表達變化，探討二者在AD發(fā)病中的作用。

1材料與方法

1.1實驗動物與主要試劑

無特定病原體動物（SPF）級7～8周齡健康BALB/c雌性小鼠12只，動物合格證號SCXK（京）2015-0006，由山西大同大學(xué)動物實驗中心提供。2，4-二硝基氯苯（DNCB）購自美國Sigma公司，小鼠IL-21、CCL20酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測試劑盒購自武漢伊萊瑞特生物科技有限公司。本研究已通過本院醫(yī)學(xué)倫理委員會的審核批準。

1.2方法

1.2.1實驗動物造模? 12只BALB/c小鼠清潔級實驗室飼養(yǎng)1周，適應(yīng)環(huán)境后開始實驗，隨機分為模型組和對照組，各6只。參考文獻[4-5]構(gòu)建AD小鼠模型，實驗前剃除小鼠背部毛發(fā)，面積約3 cm×2 cm。模型組小鼠第1～3天背部剃毛區(qū)外涂100 μl 1%DNCB溶液（采用丙酮∶橄欖油=1∶3作為基質(zhì)配制），第4天繼續(xù)外涂100 μl 0.1%DNCB溶液，改為每間隔1 d外涂1次，直到第28天涂抹后造模完成。造模后小鼠背部皮膚增厚，可見明顯紅斑、丘疹、丘皰疹、滲出、堆積大量痂屑。對照組小鼠背部剃毛區(qū)僅外涂基質(zhì)，涂抹劑量、間隔時間與模型組相同。

1.2.2皮膚組織病理檢查? 造模后，無菌條件下兩組小鼠背部剃毛區(qū)皮膚組織取材，10%甲醛溶液固定、脫水、透明、石蠟包埋、切片染色、封片，鏡下觀察兩組小鼠皮膚組織病理改變。

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（收稿日期：2019-12-13）