低體重先天性心臟病嬰幼兒圍手術(shù)期Th1/Th2的動態(tài)變化

（河北省兒童醫(yī)院 心臟外科，河北 石家莊 050031）

先天性心臟?。ㄒ韵潞喎Q先心?。┦菄乐匚：π律鷥翰⒔档蛬胗變捍婊盥实某Ｒ姴1]。近年來，隨著嬰幼兒先心病外科技術(shù)不斷發(fā)展及醫(yī)療環(huán)境的不斷改善，多數(shù)患兒能順利進行手術(shù)且預后較好[2]。但對于小年齡、低體重患兒由于本身器官發(fā)育不成熟、免疫功能低下，行心臟外科手術(shù)后病情變化復雜，更易引起免疫功能失調(diào)，導致術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生[3]。與免疫功能調(diào)節(jié)緊密相關(guān)的輔助性T細胞在不同條件刺激下可分化為輔助性T細胞1（T helper cell 1,Th1）和輔助性T細胞2（T helper cell 2,Th2）。Th1 細胞介導細胞免疫，γ 干擾素（Interferon-γ,IFN-γ）為其經(jīng)典的致炎細胞因子。而Th2 細胞主要介導體液免疫，IL-4為其經(jīng)典的抗炎細胞因子。已有研究證實，炎癥感染、自身免疫病、變態(tài)反應及移植排斥等多種疾病中出現(xiàn)Th1/Th2 漂移現(xiàn)象[4-5]。目前探究先心病患兒圍手術(shù)期Th1/Th2 動態(tài)變化方面的研究尚少。本研究旨在通過觀察先心病患兒圍手術(shù)期IFN-γ/IL-4 反映Th1/Th2的動態(tài)變化，探討先心病患兒圍手術(shù)期免疫功能失調(diào)及發(fā)生術(shù)后并發(fā)癥的原因，為改善先心病患兒預后提供臨床參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2018年3月—2019年3月在河北省兒童醫(yī)院住院行外科手術(shù)治療的54例先心病患兒的臨床資料。先心病患兒年齡＜12個月、體重比同月齡正常小兒＜25%，且經(jīng)心導管、心臟彩超及手術(shù)等確診并排除其他疾病或感染。將32例肺充血型先心病患兒作為肺充血組。其中，男性14例，女性18例；年齡0.3～12個月，平均（9.04±6.21）個月；平均體重（5.16±1.21）kg；室間隔缺損14例，房間隔缺損10例，動脈導管未閉8例。將22例肺缺血型先心病患兒作為肺缺血組。其中，男性10例，女性12例；年齡0.5～12個月，平均（11.24±5.64）個月；平均體重（5.21±1.37）kg；法洛四聯(lián)癥9例，肺動脈狹窄13例。選取同期本院就診的低體重其他疾病患兒32例作為對照組。其中，男性17例，女性15例；年齡2～15個月，平均（12.67±3.27）個月；平均體重（6.16±2.14）kg；腹股溝斜疝13例，鞘膜積液10例，隱睪手術(shù)住院9例。對照組患兒排除標準：①合并有先心病或免疫缺陷；②入院前2周有呼吸道感染癥狀。

1.2 方法

采集所有患兒治療前、先心病患兒手術(shù)結(jié)束時及術(shù)后1、3和7 d的空腹靜脈或動脈血3 ml，置于真空采血管中。室溫靜置2 h后3 000 r/min 離心20 min，收集血清并進行編號。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法檢測血清IFN-γ、IL-4 并計算IFN-γ/IL-4，定量檢測試劑盒均購自美國Raybiotech公司。操作步驟如下：①除空白孔外，分別將不同濃度標準品或待測樣本加入，輕輕晃動混勻后封板，置于37℃恒溫孵育30 min；②揭去封板膜棄置液體后，洗板5次；③每孔加入顯色劑，輕輕震蕩混勻后，與37℃避光顯色15 min，再加入終止液終止反應；④終止后立即以空白孔調(diào)零，在450 nm 波長處依次測量各孔吸光度值。

1.3 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 22.0 統(tǒng)計軟件。計量資料以均數(shù)±標準差 （±s）表示，比較用單因素方差分析或隨機區(qū)組設(shè)計的方差分析，進一步兩兩比較用SNK-q法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 各組治療前IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4比較

各組治療前IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。肺充血組IFN-γ、IFN-γ/IL-4 較對照組低（P＜0.05），IL-4較對照組高（P＜0.05）；肺充血組IFN-γ/IL-4 低于肺缺血組（P＜0.05），肺缺血組IFN-γ/IL-4 低于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 各組治療前IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4比較 （±s）

表1 各組治療前IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4比較 （±s）

注：①與對照組比較，P＜0.05；②與肺缺血組比較，P＜0.05。

組別 n IFN-γ/（pg/ml）IL-4/（pg/ml）IFN-γ/IL-4對照組 32 19.24±6.37 6.96±3.55 3.85±1.74肺缺血組 22 17.32±7.36 8.62±4.68 2.49±1.39①肺充血組 32 13.27±7.59① 11.37±5.24① 1.32±0.95①②F值 3.267 5.019 4.736 P值 0.026 0.008 0.011

2.2 先心病患兒圍手術(shù)期IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4比較

先心病患兒圍手術(shù)期IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4比較，經(jīng)隨機區(qū)組設(shè)計的方差分析，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。手術(shù)結(jié)束時、術(shù)后1和3 d的IFN-γ、IFN-γ/IL-4較手術(shù)前低（P＜0.05），IL-4較手術(shù)前高（P＜0.05）；術(shù)后1、3和7 d的IFN-γ、IFN-γ/IL-4較手術(shù)結(jié)束時高（P＜0.05），IL-4較手術(shù)結(jié)束時低（P＜0.05）；術(shù)后3和7d的IFN-γ、IFN-γ/IL-4較術(shù)后1 d高（P＜0.05），IL-4較術(shù)后1d低（P＜0.05）；術(shù)后7 d的IFN-γ、IFN-γ/IL-4較術(shù)后3 d高（P＜0.05），IL-4 較術(shù)后3 d低（P＜0.05）。見表2。

表2 先心病患兒圍手術(shù)期IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4比較 （n=54，±s）

表2 先心病患兒圍手術(shù)期IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4比較 （n=54，±s）

時間 IFN-γ/（pg/ml）IL-4/（pg/ml）IFN-γ/IL-4手術(shù)前 14.28±6.34 9.64±5.16 1.48±0.68手術(shù)結(jié)束時 9.54±4.27 13.57±6.27 0.71±0.26術(shù)后1 d 12.54±4.18 11.24±6.49 1.16±0.47術(shù)后3 d 13.09±5.44 10.06±4.81 1.31±0.43術(shù)后7 d 14.67±7.34 9.54±4.34 1.54±0.61 F值 4.968 4.631 3.195 P值 0.012 0.016 0.027

3 討論

免疫功能失調(diào)和術(shù)后并發(fā)癥是先心病患兒術(shù)后面臨的危險因素，也是導致患兒死亡的重要原因[6]。小年齡、低體重先心病患兒行心臟外科手術(shù)后，肺部感染是其主要的并發(fā)癥[7]。有研究顯示，左至右分流型導致肺充血的先心病患兒更容易并發(fā)肺炎等呼吸系統(tǒng)感染疾病[8]。過去常認為是由于存在血流動力學或機械因素的問題從而導致肺充血型先心病患兒肺部更易感染。近年來研究顯示，肺充血型先心病患兒表現(xiàn)出明顯免疫系統(tǒng)缺陷及免疫功能調(diào)節(jié)紊亂的傾向，可能與其更容易感染肺炎有關(guān)[9-10]。Th 細胞在維護免疫系統(tǒng)功能平衡方面有重要的作用，可在多種細胞因子、抗原、激素等的調(diào)節(jié)作用下分化為主要介導細胞免疫的Th1 細胞和介導體液免疫的Th2 細胞。IFN-γ是Th1 細胞分泌的主要致炎因子，能與Th2 細胞分泌的IL-4 相互拮抗，進而弱化IL-4 在免疫系統(tǒng)中的功能；而IL-4 則可以誘導Th 細胞向Th2 細胞分化，反向弱化IFN-γ的致炎功能[11]。機體內(nèi)Th1和Th2 細胞的相互制約直接影響患兒細胞免疫免疫功能和體液免疫功能的平衡和穩(wěn)定，并且與患兒病情發(fā)展緊密相關(guān)[12]。本研究結(jié)果顯示，相比非先心病患兒，肺充血型和肺缺血型先心病患兒IFN-γ/IL-4 更低。IFN-γ/IL-4的變化反映Th1/Th2的變化趨勢，說明先心病患兒相比非先心病患兒，存在Th1/Th2 淋巴細胞亞群比例漂移及免疫系統(tǒng)功能減弱。與肺缺血型先心病患兒相比，肺充血型先心病患兒IFN-γ/IL-4 更低，說明肺充血型先心病患兒存在以IFN-γ為主的Th1 細胞亞群功能低下，以及以IL-4為主的Th2 細胞亞群相對增強的免疫細胞功能失衡；一旦遇到感染，更容易引起免疫系統(tǒng)紊亂，導致病情加重。在先心病心臟外科手術(shù)、體外循環(huán)手術(shù)中，患兒體內(nèi)常發(fā)生復雜的細胞免疫及體液免疫反應[13]。其原因一方面是由于單核細胞、巨噬細胞、中性粒細胞等功能的活化及致炎介質(zhì)釋放，導致全身非特異性炎癥反應的激活；另一方面則是誘發(fā)以IL-4為主的抗炎癥介質(zhì)表達的增加，上調(diào)機體體液免疫功能，反向引起細胞免疫功能的短暫抑制，進而抑制炎癥反應[14-15]。有研究表明，體外循環(huán)可引起先心病患兒免疫功能調(diào)節(jié)失衡，推測其術(shù)后并發(fā)癥與免疫功能的改變有關(guān)[16-17]。本研究結(jié)果顯示，先心病患兒術(shù)后IFN-γ、IFN-γ/IL-4 有暫時性下調(diào)，IL-4 有暫時性上調(diào)，并在術(shù)后7 d恢復至術(shù)前水平。這說明圍手術(shù)期先心病患兒為保護機體，做出影響Th1、Th2 細胞亞群的分化，進而調(diào)節(jié)免疫功能穩(wěn)定的積極防御反應[18]。這種免疫防御反應對于患兒抗感染和減少并發(fā)癥的發(fā)生是積極有益的。

綜上所述，先心病患兒尤其是肺充血型先心病患兒存在Th1 細胞介導的細胞免疫功能低下、Th2 細胞介導的體液免疫功能相對增強的免疫系統(tǒng)功能相對失衡狀態(tài)。小年齡、低體重先心病患兒圍手術(shù)期內(nèi)出現(xiàn)IFN-γ/IL-4的短暫變化，提示Th1/Th2的功能變化，進而導致免疫功能的漂移。