前列腺癌P504S蛋白表達與腫瘤特征及預(yù)后的關(guān)系

楊 東

前列腺癌的發(fā)生具有較高的基礎(chǔ)發(fā)病率和年發(fā)病人數(shù)[1]，在研究前列腺癌病情進展機理的過程中，可以認(rèn)定腫瘤調(diào)控蛋白能夠在移行上皮細(xì)胞的病變中發(fā)揮作用[2]。α-甲?；o酶A消旋酶(P504S)主要表達于線粒體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，作為過氧化酶因子，其能夠通過影響脂肪酸的代謝，加劇上皮細(xì)胞能力代謝，進而促進惡性腫瘤的早期發(fā)生過程[3]。部分研究者探討了P504S的表達與前列腺癌的關(guān)系，認(rèn)為在前列腺癌患者中，P504S蛋白的表達陽性率明顯上升[4]，但缺乏對于P504S的表達與前列腺癌患者的臨床病理特征的關(guān)系分析。本研究旨在探討P504S蛋白的表達與前列腺癌臨床病理特征的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取我院2014年1月至2016年7月手術(shù)切除的86例前列腺癌病理學(xué)組織標(biāo)本作為前列腺癌組、90例前列腺增生組織作為良性組。前列腺癌組，患者年齡52～78歲，平均(66.3±9.1)歲，血清前列腺特異性抗原(PSA)>4.0 ng/ml 43例、PSA≤4.0 ng/ml 43例；病灶直徑>5 cm 39例、≤5 cm 47例；TNM分期：Ⅰ期20例、Ⅱ期33例、Ⅲ期26例、Ⅳ期7例；組織學(xué)分化：高、中、低分化患者各為22、36、28例；術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移檢查結(jié)果發(fā)現(xiàn)陽性38例。良性組，患者年齡為52～79歲，平均年齡為(65.1±10.2)歲。前列腺癌患者與前列腺良性增生患者的年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。入選標(biāo)準(zhǔn)：①前列腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會制定的標(biāo)準(zhǔn)[5]；②患者年齡≤79歲；③手術(shù)后病理學(xué)檢查確診為前列腺癌，患者接受2年的隨訪觀察；④2組研究對象的基線資料完整；⑤本研究符合《赫爾透辛基宣言》相關(guān)倫理及保密原則。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他部位惡性腫瘤；②術(shù)前具有放化療史、內(nèi)分泌治療史；③伴有其他系統(tǒng)的重大疾病。

1.2 免疫組化染色方法及評價標(biāo)準(zhǔn)

石蠟切片采用二甲苯進行脫蠟至水，5%的雙氧水常溫孵育10 min，采用磷酸鹽緩沖液孵育5 min，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，5%的山羊血清抗體封閉10 min，不沖洗，滴加一抗(購自abcum公司 批號：20119304 濃度：1∶500)，4 ℃冰箱孵育過夜，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，滴加生物素標(biāo)記好的二抗(購自北京康泰生物 批號：20104856 濃度：1∶1000)，37 ℃孵育30 min，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，滴加第二代辣根酶標(biāo)記的工作液體，37 ℃孵育10 min，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，顯色之后采用酒精脫水、二甲苯透明、樹膠封片，鏡下觀察。免疫組化結(jié)果判定：P504S蛋白定位于細(xì)胞質(zhì)，陽性染色呈黃色、棕黃色、褐色表達。①依據(jù)染色的程度分為：未染色(0分)、僅僅淡黃色染色(1分)、棕黃色染色(2分)、染色呈褐色、黑色(3分)；②根據(jù)染色的細(xì)胞占比結(jié)果：占比≤10%計分1分、>10%～50%計分2分、>50%～75%計分3分、占比>75%計分4分。染色程度與陽性細(xì)胞計分之乘積<3分為陰性、≥3分為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 21.0軟件分析數(shù)據(jù)，應(yīng)用χ2檢驗分析不同組別間P504S蛋白陽性表達率；生存分析采用Kaplan-Meier法；P<0.05表明差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 P504S蛋白在2種組織中的表達情況對比

P504S蛋白陽性表達率在前列腺癌組織中為68.60%(59/86)，在前列腺增生組織中為24.44%(22/90)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=34.523，P=0.000)。

2.2 前列腺癌組織中P504S蛋白陽性表達率與病理學(xué)特征的關(guān)系

前列腺癌組織中的P504S蛋白陽性表達與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、PSA水平有關(guān)(P<0.05)；與年齡、組織學(xué)分化程度、病灶直徑、Gleason評分無關(guān)(P>0.05)，見表1。

表1 前列腺癌組織中P504S蛋白陽性表達率與病理學(xué)特征的關(guān)系(例，%)

2.3 P504S蛋白表達與前列腺癌患者預(yù)后的關(guān)系

隨訪2年，P504S蛋白陽性表達組失訪4例患者，P504S蛋白陽性表達患者的2年生存率為63.64%(35/55)、陰性表達患者為81.48%(22/27)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=2.560，P=0.110)。

經(jīng)Kaplan-Meier法分析，P504S蛋白陽性表達患者的生存時間與陰性表達患者的生存時間差異無統(tǒng)計學(xué)意義[Log-rank(Mantel-Cox)=1.432，P=0.233>0.05]；見圖1。

圖1 P504S蛋白陽性與陰性患者的生存曲線圖

3 討論

長期的臨床隨訪觀察研究發(fā)現(xiàn)，不同措施治療后前列腺癌患者的病情進展速度仍然較快，遠(yuǎn)期臨床預(yù)后或者生存時間仍然無明顯的改善[6-8]。現(xiàn)階段缺乏對于前列腺癌患者病情評估的腫瘤標(biāo)志物，雖然前列腺特異性抗原能夠在前列腺癌的病情評估過程中發(fā)揮作用。但部分單中心的臨床回顧性分析研究發(fā)現(xiàn)，采用前列腺特異性抗原評估前列腺癌臨床預(yù)后的假陽性率較高，其對于前列腺癌患者臨床預(yù)后評估的吻合程度較低，參考價值不高[9]。本次研究通過對前列腺癌患者病灶組織中P504S蛋白的表達分析，深入揭示泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤發(fā)生的部分機制。

P504S蛋白是過氧化物酶相關(guān)因子，能夠通過影響線粒體能量代謝，提高線粒體合成ATP的速率，為癌細(xì)胞的異常擴增提供前提。P504S蛋白能夠影響氧化還原蛋白基因的轉(zhuǎn)錄水平，導(dǎo)致氧化還原反應(yīng)平衡的紊亂，促進了氧化應(yīng)激誘導(dǎo)下癌細(xì)胞的異常轉(zhuǎn)錄過程。P504S蛋白的表達上升能夠影響到腫瘤細(xì)胞核DNA的非對稱分裂速度，導(dǎo)致腫瘤癌基因的異常激活。部分研究者探討了P504S蛋白的表達及其與前列腺癌的關(guān)系，認(rèn)為P504S蛋白的上升能夠影響到前列腺癌短期內(nèi)病情進展速度[10]。

對于前列腺癌患者病灶組織中P504S蛋白的表達分析研究可見，在病例組患者中，P504S蛋白的表達陽性率明顯的上升，高于前列腺良性增生組患者，統(tǒng)計學(xué)差異顯著，提示了P504S蛋白的高表達在前列腺癌的早期發(fā)生和中晚期病情進展中發(fā)揮了作用。汪玉等[11]研究者也發(fā)現(xiàn)，在前列腺癌患者病灶組織中，P504S蛋白的表達陽性率可平均上升30%，同時短期內(nèi)腫瘤惡病質(zhì)較為明顯或者合并遠(yuǎn)期復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的前列腺癌患者中，P504S蛋白的表達可翻倍上升。在探討P504S蛋白的表達與前列腺癌臨床病理特征的關(guān)系過程中，發(fā)現(xiàn)在臨床分期較晚、發(fā)生了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或者PSA水平較高的患者中，P504S蛋白的表達陽性率較高，提示了P504S蛋白的表達與前列腺癌患者臨床病理特征的關(guān)系，這主要可以從下列幾個方面進行理解[12-14]：①P504S蛋白的表達上升，能夠提高癌細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換程度，促進癌細(xì)胞浸潤深度和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的發(fā)生，進而提高了臨床分期；②P504S蛋白的表達上升能夠提高癌細(xì)胞粘附淋巴結(jié)組織的能力，進而促進了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生。但并未發(fā)現(xiàn)P504S蛋白與Gleason評分的關(guān)系，提示P504S蛋白并不會調(diào)控前列腺癌細(xì)胞的分化成熟。最后本次研究并未發(fā)現(xiàn)P504S蛋白的表達與前列腺癌患者臨床預(yù)后的關(guān)系，提示臨床上暫時不能夠通過檢測P504S蛋白預(yù)測前列腺癌患者的臨床轉(zhuǎn)歸。

綜上所述，在前列腺癌患者中，P504S蛋白的表達明顯上升，同時P504S蛋白的表達與前列腺癌患者的臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。希望后續(xù)研究可以探討P504S蛋白的表達與前列腺癌患者病死率的關(guān)系。