抗環(huán)瓜氨酸肽抗體、抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體和嗜酸性粒細(xì)胞聯(lián)合檢測(cè)在早期類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的診斷價(jià)值

魏 薇，何金昌，余素君

(四川省攀枝花市中心醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，四川 攀枝花 617067)

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)好發(fā)于中年女性，以多關(guān)節(jié)慢性炎癥為主要臨床表現(xiàn)，且隨病情進(jìn)展，還能誘發(fā)關(guān)節(jié)外器官、組織損傷，致殘率較高，患者預(yù)后較差[1]。故盡早診斷、及時(shí)治療，對(duì)RA患者預(yù)后非常重要。典型RA病例診斷并不困難，但早期RA可以單關(guān)節(jié)炎為首發(fā)癥狀，漏診及誤診率較高[2]。探尋早期早期的篩查指標(biāo)，盡早確診RA，有其必要性?？弓h(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體及抗突變型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗體均為RA相關(guān)自身抗體，近年來(lái)，在RA診斷方面研究較多，但二者靈敏度仍不太理想[3]。另外，T淋巴細(xì)胞及B淋巴細(xì)胞分泌的大量炎性因子在RA的發(fā)生發(fā)展中占據(jù)重要地位，在炎性因子的大量浸潤(rùn)下，嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)也能過(guò)度增殖，進(jìn)一步增強(qiáng)炎癥反應(yīng)，加速RA病情進(jìn)展，故EOS也與RA發(fā)生密切相關(guān)[4]。本研究分析外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS聯(lián)合檢測(cè)在早期RA診斷中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料2018年4月至2019年12月我院63例早期RA患者(RA組)及52例非RA自身免疫疾病患者(非RA組)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①RA患者與美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)(ACR)/歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(EULAR)[5]制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)相符，且以病程≤2年為早期；②RA組不合并其他免疫疾??；③年齡≥18歲；④臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①入院前1個(gè)月內(nèi)行高劑量糖皮質(zhì)激素或生物治療；②合并肝腎功能障礙、惡性腫瘤；③神經(jīng)精神疾病史；④合并過(guò)敏性疾病、寄生蟲感染等影響EOS水平的疾病。非RA組中系統(tǒng)性紅斑狼瘡18例，干燥綜合征14例，強(qiáng)直性脊柱炎11例，混合性結(jié)締組織病9例；非RA組疾病均符合ACR[6]制定的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。納入40例同期健康體檢者為健康對(duì)照組。三組性別、年齡及體質(zhì)量指數(shù)(BMI)等基線資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 三組基線資料比較

1.2 方法RA組及非RA組均在入院次日清晨，抽取空腹外周靜脈血，健康對(duì)照組則收集體檢當(dāng)日空腹外周靜脈血；采用酶聯(lián)免疫吸附法(試劑盒由美國(guó)R&D公司生產(chǎn))檢測(cè)抗CCP抗體、抗MCV抗體水平，使用血細(xì)胞自動(dòng)分析儀(儀器由日本日立公司生產(chǎn))檢測(cè)外周血EOS含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 21.0軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料比較采用單因素方差分析及LSD-t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析；診斷價(jià)值分析采用受試者工作特征曲線(ROC)分析，記錄曲線下面積(AUC)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS水平比較三組外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS水平比較，均為RA組>非RA組>健康對(duì)照組(P<0.05)，見表2。

2.2 早期RA患者外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體、EOS水平的相關(guān)性早期RA患者外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體、EOS水平相互呈正相關(guān)(P<0.05)，見表3。

表2 三組外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS水平比較

表3 早期RA患者外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體、EOS水平的相關(guān)性分析 (r)

2.3 外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS聯(lián)合檢測(cè)對(duì)早期RA的診斷價(jià)值分析外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS對(duì)早期RA均有較高診斷價(jià)值(P<0.05)，其Cut-off值分別為66.025 U/ml、51.780 U/ml、1.780 %；聯(lián)合診斷價(jià)值最高，AUC值可達(dá)0.997(P<0.05)，見圖1、表4。

圖1 外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS聯(lián)合檢測(cè)診斷早期RA的ROC曲線分析

表4 診斷價(jià)值分析

3 討論

大量研究證據(jù)顯示[7]，RA發(fā)病3個(gè)月內(nèi)即可出現(xiàn)關(guān)節(jié)滑膜破壞，未得到及時(shí)治療者，2年內(nèi)還能發(fā)生不可逆骨質(zhì)破壞，嚴(yán)重影響患者預(yù)后及生存質(zhì)量。因此，及時(shí)診療至關(guān)重要。目前，RA診斷多依據(jù)臨床表現(xiàn)、影像學(xué)檢查及類風(fēng)濕因子等手段，但早期RA不典型，較為隱匿，使早期RA檢出率較低[8]。故通過(guò)自身免疫抗體等血清學(xué)檢測(cè)方式，篩查早期RA，成為近年來(lái)學(xué)術(shù)界研究的熱點(diǎn)[9]。

抗CCP抗體是一種含瓜氨酸氨基酸殘基的蛋白，且為環(huán)狀聚絲蛋白的多肽片段，以免疫球蛋白G型為主，在炎癥介質(zhì)刺激下，凋亡的巨噬細(xì)胞分泌波形蛋白以及突變型波形蛋白，使抗CCP抗體水平隨之升高，研究表明[10]，抗CCP抗體不僅與RA發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，其血清含量還能輔助評(píng)估關(guān)節(jié)外損傷、骨侵蝕等預(yù)后情況。本研究發(fā)現(xiàn)，三組外周血抗CCP抗體水平比較，為RA組>非RA組>健康對(duì)照組。說(shuō)明，抗CCP抗體在早期RA患者外周血中顯著增多，于診斷早期RA有利?？筂CV抗體為近年來(lái)發(fā)現(xiàn)存在于RA患者血液中的一種自身抗體，與抗CCP抗體共同屬于抗瓜氨酸化蛋白抗體，CCP抗原決定簇為人工合成，MCV抗原決定簇源自天然物質(zhì)，CCP抗原決定簇也相對(duì)MCV要少，故理論上抗MCV抗體特異度及敏感度更高[11]。但臨床不少學(xué)者發(fā)現(xiàn)，抗MCV抗體與抗CCP抗體在診斷RA時(shí)，具有相近的靈敏性及特異性，2者診斷相當(dāng)[12]。本研究中，三組外周血抗MCV抗體比較，為RA組>非RA組>健康對(duì)照組。表明，抗MCV抗體在鑒別早期RA中具有一定作用。且早期RA患者外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體水平呈顯著正相關(guān)。這也提示，抗CCP抗體及抗MCV抗體水平均與RA發(fā)生發(fā)展相關(guān)，于輔助診斷早期RA有積極意義。不僅如此，ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體對(duì)早期RA均具有較高診斷價(jià)值，其靈敏度分別為84.13%、85.71%，特異度分別為95.65%、100.00%，診斷價(jià)值相似。也證實(shí)抗CCP抗體、抗MCV抗體對(duì)早期RA診斷價(jià)值相當(dāng)。其Cut-off值分別為66.025 U/ml、51.780 U/ml，也可供臨床參考。

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[13]，EOS來(lái)源于骨髓造血干細(xì)胞，與粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子、白細(xì)胞介素-5等細(xì)胞因子的增殖、分化、成熟密切相關(guān)，在過(guò)敏性疾病中高表達(dá)，在RA發(fā)生發(fā)展中的作用也受到關(guān)注。為減少其他因素的影響，本研究將過(guò)敏性疾病等可能影響EOS表達(dá)的因素排除，研究顯示，三組外周血EOS水平比較，為RA組>非RA組>健康對(duì)照組。說(shuō)明，早期RA患者體內(nèi)EOS水平顯著升高，利于臨床鑒別。分析其原因可能與RA作為自身免疫系統(tǒng)疾病，在發(fā)病早期即可出現(xiàn)Ⅰ型輔助性T細(xì)胞/Ⅱ型輔助性T細(xì)胞(Th1/Th2)平衡紊亂，分泌大量炎癥因子，刺激EOS產(chǎn)生有關(guān)[14]。且早期RA患者外周血EOS水平還與抗CCP抗體、抗MCV抗體相互呈顯著正相關(guān)。提示，EOS可能參與RA發(fā)生發(fā)展，且可能與抗CCP抗體、抗MCV抗體也有一定關(guān)系?？紤]該結(jié)果與RA的免疫系統(tǒng)功能失衡及炎癥介質(zhì)的大量釋放，引起EOS、抗CCP抗體及抗MCV抗體協(xié)同增加有關(guān)。此外，經(jīng)ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)外周血EOS對(duì)早期RA具有較高診斷價(jià)值，其Cut-off值為1.780 %。這也提示，在排除過(guò)敏性疾病等因素影響的條件下，外周血EOS水平>1.780 %時(shí)，患者發(fā)生RA風(fēng)險(xiǎn)較高。然而，該數(shù)據(jù)是在本研究有限的樣本量基礎(chǔ)上分析得到的，僅供臨床參考。本研究還就外周血EOS、抗CCP抗體及抗MCV抗體聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值展開分析，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測(cè)診斷價(jià)值最高，其AUC可高達(dá)0.997。表明，檢測(cè)外周血EOS、抗CCP抗體及抗MCV抗體對(duì)RA早期診斷具有重要意義。

綜上所述，早期RA患者體內(nèi)外周血EOS、抗CCP抗體及抗MCV抗體水平相關(guān)性顯著，EOS、抗CCP抗體及抗MCV抗體可作為早期RA診斷的新方向，3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)診斷價(jià)值最高，可為RA盡早診療開辟新道路。