6 種藥劑對黃野螟不同齡期幼蟲的室內(nèi)毒力測定

陳人豪，鄭偉，田樂宇，黃海，韋建杏

1.海南省楓木實(shí)驗(yàn)林場，海南屯昌 571600；

2.海南大學(xué)林學(xué)院，海南?？?70228

白木香屬瑞香科白木香屬，是中國特有的藥用植物。白木香在受到傷害后產(chǎn)生的含有樹脂的木材稱作沉香，具有治療胸腹脹悶疼痛、胃寒嘔吐呃逆及腎虛氣逆喘急等的功效[12]。白木香也是海南省珍貴的鄉(xiāng)土樹種之一，目前白木香種植面積現(xiàn)已達(dá)6666.67hm2，約900 萬株，遍布了海南省主要市縣。由于白木香國際市場需求量大，價(jià)值攀高，長期以來白木香野生資源遭到嚴(yán)重破壞，現(xiàn)已被列為國家二級瀕危保護(hù)植物[13]。

黃野螟是海南省各大白木香種植產(chǎn)區(qū)危害最嚴(yán)重的食葉害蟲，有著暴發(fā)性、暴食性、世代重疊等特點(diǎn)。前人對黃野螟的生物學(xué)特性研究表明，黃野螟幼蟲可分為5 齡，危害程度隨幼蟲齡期的增長而增大，每個(gè)世代幼蟲齡期的增長歷時(shí)平均為15d，1齡～2 齡幼蟲常群集取食葉肉，留下白色膜狀表皮，3 齡及以上幼蟲取食葉片，形成缺刻或吃光全葉，食物不足時(shí)，還會取食嫩枝條皮層、花、果皮[1]。初步統(tǒng)計(jì)每年海南黃野螟危害白木香300 萬株以上，平均蟲口密度達(dá)86/株，發(fā)生嚴(yán)重時(shí)，被害株率可達(dá)90%以上[14]。

目前，黃野螟的常見防治方法有生物防治[2]、物理防治[3]及化學(xué)防治，其中化學(xué)防治又是研究相對較廣的防治手段。前人對黃野螟幼蟲進(jìn)行過多種生物和化學(xué)藥劑試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)乙基多殺菌素、乙多·甲氧酰肼、甲維·茚蟲威、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、森得保、苯氧威、高效氯氰菊酯等均有較好的防治效果[4-8]，然而這些研究很少考慮藥劑對黃野螟不同齡期幼蟲的防效，且長期使用單一類型的化學(xué)藥劑以及不恰當(dāng)?shù)氖┯脻舛入S意對黃野螟不同發(fā)育階段幼蟲進(jìn)行防治，更易使黃野螟產(chǎn)生抗藥性，進(jìn)而導(dǎo)致田間防治達(dá)不到預(yù)期效果，因此針對黃野螟不同齡期幼蟲科學(xué)選擇藥劑種類及濃度尤為重要。該研究通過參考前人的防治試驗(yàn)結(jié)果，選擇了6 種不同類型的常用藥劑，采用室內(nèi)浸葉法測定了各藥劑對不同齡期黃野螟幼蟲的毒力，以期為黃野螟的田間防治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

黃野螟幼蟲采集自海南省屯昌縣楓木實(shí)驗(yàn)林場白木香苗圃，于室內(nèi)人工氣候箱中飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件為：溫度24℃±2℃、相對濕度80%±5%、光周期L:D=12.5:11.5。不同齡期幼蟲放置在不同養(yǎng)蟲盒中，喂食新鮮白木香葉片。

1.2 供試藥劑

4.5%高效氯氰菊酯(EW)；20 億PIB/mL 棉鈴蟲核型多角體病毒（SC）；5%氯蟲苯甲酰胺(SC)；18%殺蟲雙(AS)；0.3%苦參堿（AS）；30%敵百蟲(EC)。

1.3 試驗(yàn)方法

采用浸葉飼喂法進(jìn)行室內(nèi)毒力測定。根據(jù)藥劑每畝推薦劑用量的有效成分濃度將6 種供試藥劑用純凈水稀釋為5 個(gè)濃度梯度（表1）。由于核型多角體病毒單位不統(tǒng)一，采用張勝蘭等[9]的定量換算方法進(jìn)行換算：取1mL 樣品于離心管，4000r/min 轉(zhuǎn)速下離心20min，棄除上清液，風(fēng)干后稱量沉淀質(zhì)量進(jìn)行轉(zhuǎn)換。選取新鮮幼嫩白木香葉片5 片～6 片浸入藥劑10s 取出，自然晾干后置于干凈養(yǎng)蟲瓶內(nèi)，每種濃度處理黃野螟各齡期幼蟲30 頭，重復(fù)3 次，設(shè)立1 組清水對照組（CK），在室溫條件下觀察24h 后的幼蟲死亡數(shù)，毛筆輕觸蟲體無反應(yīng)則記為死亡，對照組死亡率不能超過10%。

表1 供試藥劑及使用濃度Tab.1 The Working Concentration of the Test Insecticide

1.4 數(shù)據(jù)分析

使用Excel 2020 整理原始數(shù)據(jù)，計(jì)算6 種藥劑處理24h 后黃野螟幼蟲的死亡率和校正死亡率。使用SPSS 22.0 的Probit 回歸分析，得出6 種藥劑的毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)、半致死濃度（LC50）及95%置信區(qū)間。

2 結(jié)果與分析

2.1 幾種藥劑處理黃野螟不同齡期幼蟲的死亡率

由表2 可知，處理24h 后，各齡期幼蟲死亡率隨著藥劑濃度的降低而減小。4.5%高效氯氰菊酯5 種濃度對1 齡～3 齡幼蟲致死率與4 齡～5 齡幼蟲致死率具有極顯著差異。其中1 齡～3 齡幼蟲的致死率均大于70.00%，最高致死率達(dá)100.00%，而對4齡～5 齡幼蟲的藥效較弱，致死率均小于50.00%；20億PIB/ml 棉鈴蟲核型多角體病毒140.06mg·L-1對5 個(gè)齡期幼蟲的致死率均為100.00%、46.69mg·L-1對5 個(gè)齡期幼蟲致死率無顯著差異，35.02mg·L-1、87.54mg·L-1兩個(gè)濃度對5 齡幼蟲的藥效與1 齡～4齡幼蟲均具有顯著差異，23.34mg·L-1對5 齡幼蟲的致死率最低僅有53.33%；5%氯蟲苯甲酰胺隨蟲齡的增大及濃度的減小，藥效明顯減弱，對3 齡～5 齡幼蟲致死率均未達(dá)到50.00%，且多個(gè)濃度致死率為0.00%，對1 齡幼蟲的致死率較高，但相比其他藥劑，該藥劑藥效偏低；18%殺蟲雙選擇的5 種濃度較大，對1 齡～4 齡幼蟲致死率均大于60.00%，對5 齡幼蟲致死率均小于60.00%，差異顯著；0.3%苦參堿對5個(gè)齡期幼蟲的藥效俱佳，僅有2.00mg·L-1濃度對2齡幼蟲的致死率小于80.00%；30%敵百蟲對1 齡～4齡幼蟲的致死率均大于80.00%，藥效較好，但選用濃度相較于其他藥劑偏大，且不同濃度對5 齡幼蟲的致死率存在明顯差異，375.00mg·L-1、300.00mg·L-1致死率均小于50.00%。

表2 6 種藥劑不同濃度處理黃野螟不同齡期幼蟲的死亡率Tab.2 Mortality Rate of Six Insecticides Against Different Instar Larvae of Heortia vitessoides

6 種藥劑對1 齡幼蟲的致死率為71.11%～100.00%，藥效差異性相對較?。粚? 齡幼蟲致死率為28.69%～100.00%，5%氯蟲苯甲酰胺低濃度藥效與其他藥劑對比存在明顯差異；對3 齡幼蟲致死率為2.22%～100.00%，5%氯蟲苯甲酰胺各濃度致死率均比其他藥劑低、其次18%殺蟲雙低濃度藥效較其他藥劑差異明顯、0.3%苦參堿和30%敵百蟲兩種藥劑藥效無顯著差異；對4 齡幼蟲致死率為0～100.00%，5%氯蟲苯甲酰胺、4.5%高效氯氰菊酯和18%殺蟲雙三種藥劑藥效具有顯著差異、0.3%苦參堿和30%敵百蟲兩種藥劑藥效差異不顯著；對5 齡幼蟲致死率為100.00%，各藥劑之間藥效差異顯著，除0.3%苦參堿和5%氯蟲苯甲酰胺，其他藥劑的高低濃度藥效差異均顯著。

2.2 幾種藥劑對黃野螟不同齡期幼蟲的毒力測定

由表3 可知，藥后24h，4.5%高效氯氰菊酯對1齡幼蟲的毒力最大，3 齡和2 齡次之，分別為0.71、0.60 倍，對4 齡和5 齡的毒力相對較小，分別為0.08、0.09 倍；20 億PIB/ml 棉鈴蟲核型多角體病毒對5個(gè)齡期幼蟲的毒力相對均勻，其中對2 齡幼蟲的毒力最大，對5 齡幼蟲的毒力最小，分別是1 齡幼蟲的1.24、0.69 倍；5%氯蟲苯甲酰胺對2 齡～5 齡幼蟲的毒力指數(shù)分別為1 齡幼蟲的0.53、0.20、0.07、0.10倍，對1 齡幼蟲的毒力最大，對4 齡幼蟲的毒力最??；18%殺蟲雙對5 個(gè)齡期幼蟲的毒力不均勻，2齡～5 齡幼蟲的相對毒力指數(shù)分別為1 齡幼蟲的0.99、0.62、0.77、0.09 倍，藥效隨蟲齡的遞增上下波動(dòng)，對5 齡幼蟲的毒力明顯偏?。?.3%苦參堿對5齡幼蟲的毒力最大，相對毒力指數(shù)為1 齡幼蟲的1.56 倍；對2 齡幼蟲的毒力最小，相對毒力指數(shù)僅為1 齡幼蟲的0.16 倍；30%敵百蟲毒力隨幼蟲齡期的增長出現(xiàn)不規(guī)則增減，對2 齡和5 齡幼蟲的毒力偏小，相對毒力指數(shù)是1 齡幼蟲的0.40、0.13 倍；對4 齡幼蟲的毒力最大，其相對毒力指數(shù)是1 齡幼蟲的1.33 倍。

表3 6 種藥劑對黃野螟不同齡期幼蟲的毒力Tab.3 Toxicity of Six Insecticides Against Different Instar Larvae of Heortia vitessoides

6 種藥劑對1 齡幼蟲的LC50 值在0.336mg·L-1～129.511mg·L-1之間，0.3%苦參堿的藥效最佳，18%殺蟲雙的藥效最弱，其相對毒力指數(shù)僅有0.07；對2 齡幼蟲LC50值在2.080mg·L-1～127.046mg·L-1之間，同為0.3%苦參堿的毒力最佳，18%殺蟲雙和30%敵百蟲毒力較?。粚? 齡幼蟲LC50值在0.386mg·L-1～106.518mg·L-1之間，最大毒力藥劑為0.3%苦參堿，最小毒力藥劑為18%殺蟲雙；對4 齡～5 齡幼蟲的LC50值分別在0.422mg·L-1～203.893mg·L-1和0.279mg·L-1～702.261mg·L-1之間，0.3%苦參堿對兩個(gè)齡期幼蟲的相對毒力指數(shù)均遠(yuǎn)大于其他5種藥劑，5%氯蟲苯甲酰胺對4 齡幼蟲毒力最弱，18%殺蟲雙對5 齡幼蟲毒力最弱。

3 結(jié)論與討論

3.1 結(jié)論

試驗(yàn)選用6 種常用藥劑，通過不同濃度處理黃野螟5 個(gè)齡期幼蟲24h 后的毒殺效果，篩選出最佳防治藥劑。6 種藥劑中除5%氯蟲苯甲酰胺，其余5 種對黃野螟低齡幼蟲（1 齡～3 齡）均具有較強(qiáng)的觸殺作用，以0.3%苦參堿水劑毒力最佳，5%氯蟲苯甲酰胺對1 齡幼蟲的毒力效果也較為良好，但對1 齡以上的幼蟲毒力效果明顯下降。對于高齡幼蟲（4 齡～5 齡），20 億PIB/ml 棉鈴蟲核型多角體病毒和0.3%苦參堿均具有良好的毒殺效果，30%敵百蟲對4 齡幼蟲也具有較好的毒效。每種藥劑藥效均隨濃度的降低而降低?？紤]到生態(tài)環(huán)保問題，0.3%苦參堿可以選用6.00mg·L-1濃度防治黃野螟高齡幼蟲、選用10.00mg·L-1防治低齡幼蟲；20 億PIB/ml 棉鈴蟲核型多角體病毒可以選用46.69mg·L-1防治高齡幼蟲、選用35.02mg·L-1防治低齡幼蟲。

3.2 討論

研究表明，初孵幼蟲表皮薄，體內(nèi)的水解酶、解毒酶活性較低，藥劑觸殺作用更為明顯，隨著蟲齡的增加，發(fā)育逐漸完全，藥劑穿透速率降低，藥效也就隨之降低[10]。6 種藥劑除了0.3%苦參堿，其余5 種對黃野螟幼蟲的致死率均表現(xiàn)出低齡幼蟲較高齡幼蟲的死亡率高。魯艷輝等[11]通過比較26 種殺蟲劑對草地貪夜蛾三個(gè)發(fā)育階段的毒力發(fā)現(xiàn)多數(shù)藥劑對初孵幼蟲的藥效明顯高于中、高齡幼蟲。因此表明黃野螟的防治應(yīng)在幼蟲低齡期進(jìn)行。

高效氯氰菊酯屬于擬除蟲菊酯類殺蟲劑，CHEN Z Y 等[7]使用4.5%高效氯氰菊酯對黃野螟高齡和低齡幼蟲進(jìn)行室內(nèi)毒力測定發(fā)現(xiàn)該藥劑對低齡幼蟲的致死率均達(dá)100.00%，對高齡幼蟲致死率也在90.00%以上，與該試驗(yàn)結(jié)果近似。邱瓊等[5]使用2.5%高效氯氰菊酯對黃野螟幼蟲進(jìn)行林間防治試驗(yàn)得出低濃度配劑有更明顯的觸殺作用，高濃度也有一定的胃毒作用，施藥4d 后的校正死亡率均為100.00%。氯蟲苯甲酰胺屬于酰胺類內(nèi)吸殺蟲劑，作用效果遲緩，彭思穎等[4]研究發(fā)現(xiàn)氯蟲苯甲酰胺處理黃野螟幼蟲24h 后的致死率相比其他類型藥劑要低得多，該研究結(jié)果也表明該藥劑對黃野螟幼蟲的藥效較低。殺蟲雙屬于沙蠶毒素類殺蟲劑，是一種神經(jīng)毒劑，目前還尚未見該類型藥劑防治黃野螟的相關(guān)研究，該研究結(jié)果顯示殺蟲雙的藥效較差，對5 個(gè)齡期幼蟲的致死中濃度均較大。敵百蟲是一種有機(jī)磷類殺蟲劑，Chen Z Y 等[7]使用90%敵百蟲原藥配置三種濃度得到其對黃野螟高齡幼蟲的致死率為93.10%～100.00%，而該試驗(yàn)中不同濃度處理5 齡幼蟲的致死率有著較大差異。出現(xiàn)這一情況的可能原因?yàn)樵囼?yàn)選用的5 齡幼蟲發(fā)育時(shí)間不一致，在低濃度處理的同時(shí)選用了接近蛹期的5 齡幼蟲，導(dǎo)致幼蟲進(jìn)食量少而未達(dá)到理論藥效。棉鈴蟲核型多角體病毒和苦參堿均為生物殺蟲劑，該類型藥劑有著安全無公害等特點(diǎn)，推行、應(yīng)用廣泛，周亞奎等[6]測定了20 億PIB/g 棉鈴蟲核型多角體病毒和0.3%苦參堿兩種藥劑對黃野螟幼蟲的毒力和田間藥效，發(fā)現(xiàn)兩種藥劑的致死中濃度與田間試驗(yàn)藥后1d 的致死率與該研究相差較大，可能原因?yàn)閮煞N藥劑的配置濃度均要高于前者，而高濃度配劑對黃野螟幼蟲有更好的觸殺作用。室內(nèi)毒力測定僅為用藥選擇提供指導(dǎo)，選出的兩種生物殺蟲劑及濃度對黃野螟的田間效果還有待進(jìn)一步驗(yàn)證，該試驗(yàn)測定時(shí)間是施藥24h 后，研究過程中發(fā)現(xiàn)幼蟲會出現(xiàn)中毒現(xiàn)象，在一段時(shí)間后又會恢復(fù)活力，所以需要選擇以更長的藥后時(shí)間進(jìn)行試驗(yàn)驗(yàn)證藥效。